高中生物專(zhuān)題5課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段練習(xí)新人教版選修1-資料下載頁(yè)
2025-11-30 03:33本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】原料：4種脫氧核苷酸。引物：為DNA聚合酶的起始提供3′末端。DNA為模板，在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬(wàn)份的DNA拷貝。如果沒(méi)有PCR儀，可用3個(gè)恒溫水。浴鍋代替，操作時(shí)按程序在3個(gè)水浴鍋中來(lái)回轉(zhuǎn)移PCR反應(yīng)的微量離心管。原理：利用DNA在260_nm的紫外線(xiàn)波段有一強(qiáng)烈的吸收峰。PCR反應(yīng)體系的配方在微量離心管中依次加入各組分，再設(shè)計(jì)好PCR儀的循環(huán)程序就可以了。及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌。進(jìn)行的，在60℃下不會(huì)變性。8．DNA檢測(cè)技術(shù)可應(yīng)用于親子鑒定、遺傳病檢測(cè)等領(lǐng)域。DNA檢測(cè)離不開(kāi)對(duì)樣品DNA的PCR. 補(bǔ)配對(duì)原則結(jié)合，因此不同樣品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。PCR的每次循環(huán)可以分為_(kāi)_________三步。假設(shè)在PCR反應(yīng)中，只有一個(gè)DNA片段作為
【正文】 _____________________________________________________________。 (4)假如引物都用 3H 標(biāo)記 ， 從理論上計(jì)算 ， DNA 片段經(jīng) 3 次擴(kuò)增所得的 8 個(gè) DNA分子中 ， 含有 3H 標(biāo)記的 DNA 分子占 ________%。 (5)假定 DNA片段含 200對(duì)脫氧核苷酸 ， 經(jīng) 3次擴(kuò)增 ， 從理論上計(jì)算 ， 除需要引物 14個(gè)外 ，還需要游離的脫氧核苷酸 ________個(gè)。 解析： PCR技術(shù)是一種在體外模擬生物細(xì)胞內(nèi) DNA復(fù)制的過(guò)程 ，在這一過(guò)程中存在 DNA分子變性 (高溫使雙鏈解旋 )、復(fù)性 (低溫引物與單鏈結(jié)合 )、延伸 (中溫復(fù)制延伸 )， 其中高溫下雙鏈解旋相當(dāng)于解旋酶的作用。 PCR 過(guò)程中所使用的 DNA 聚合酶必須要能夠耐高溫。由于每一個(gè) DNA分子都要和引物結(jié)合 ， 所以每一個(gè) DNA 分子中都要含有引物；每個(gè) DNA 都含有 400 個(gè) 脫氧核苷酸 ， 則計(jì)算式為： 4008 － 400－ 2014 ＝ 2 520。 答案： (1)DNA 復(fù)制 (2)使 DNA 雙鏈解開(kāi)成為單鏈 解旋 (3)耐高溫 (4)100 (5)2 520 13． 下圖是 PCR 技術(shù)示意圖 ， 請(qǐng)回答下列問(wèn)題： (1)標(biāo)準(zhǔn)的 PCR過(guò)程一般分為 ____________、 ____________、 ____________三大步驟。 (2) 引 物 是 此 過(guò) 程 中 必 須 加 入 的 物 質(zhì) ， 從 化 學(xué) 本 質(zhì) 上 說(shuō) ， 引 物 是 一 小 段__________________。 (3) 將雙鏈 DNA________________ ， 使 之 變 性 ， 從 而 導(dǎo) 致________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (4)Taq DNA 聚合酶的作用是 __________________， 且只能由 ________端開(kāi)始。 (5)引物延伸需提供 ________________________作為原料。 答案： (1)變性 復(fù)性 延伸 (2)單鏈 DNA 或 RNA (3)加熱到 95 ℃ 雙鏈 DNA 分離成兩條單鏈 (4)催化合成 DNA 子鏈 3′ (5)四種脫氧核苷酸
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