20xx人教版高中生物選修一52《多聚酶鏈式反應(yīng)擴增dna片段》-預覽頁
【正文】 NA分子能準確復制的原因有哪些？ DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)提供模板；堿基互補配對； DNA聚合酶的復查功能。 復制條件： 緩沖液 ,DNA模板 ,四種脫氧核苷酸 ,熱穩(wěn)定 DNA聚合酶 ,兩種引物。 2． 4 水浴法：將微型離心管依次在 95℃、 55℃、 72℃的恒溫水浴鍋中循環(huán)處理相應(yīng)時間。 3． 4混勻后離心處理，使反應(yīng)液集中在離心管底部。L蒸餾水添加到比色杯中，在 260nm處將分光光度計調(diào)整讀數(shù)為零。 答案： B 例 2 關(guān)于 DNA的復制，下列敘述正確的是（ ） A. DNA聚合酶不能從頭開始合成 DNA，只能從 5’端延伸 DNA鏈 B. DNA復制不需要引物 C. 引物與 DNA母鏈通過堿基互補配對進行結(jié)合 D. DNA的合成方向總是從子鏈的 3’端向 5’端延伸 解析：由于 DNA聚合酶不能從頭開始合成 DNA， 只能從引物的 3’端即復制方向由 3’端向 5’端延伸；由于 DNA分子是反向平行的，子鏈是依據(jù)堿基互補配對原則，在 DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向是從子鏈 5’端向 3’端延伸。對于 PCR反應(yīng)過程的教學，應(yīng)以讀圖識圖為主。 九、【 資料袋】 免疫 PCR 免疫 PCR(immunoPCR)是新近建立的一種靈敏、特異的抗原檢測系統(tǒng) .它利用抗原 抗體反應(yīng)的特異性和 PCR擴增反應(yīng)的極高靈敏性來檢測抗原，尤其適用于極微量抗原的檢測 . 免疫 PCR 試驗的主要步驟有三個 :①抗原 抗體反應(yīng)，②與嵌合連接分子結(jié)合，③ PCR擴增嵌合連接分子中的 DNA(一般為質(zhì)粒 DNA).該技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是嵌合連接分子的制備 .在免疫 PCR 中，嵌合連接分子起著橋梁作用，它有兩個結(jié)合位點，一個與抗原抗體復合物中的抗體結(jié)合，一個與質(zhì)粒 DNA結(jié)合，其基本原理與 ELISA和免疫酶染色相似，不同之處在于其中的標記物不是酶而是質(zhì)粒 DNA，在操作反應(yīng)中形成抗原抗體 連接分子 DNA 復合物，通過 PCR擴增 DNA來判斷是否存在特異性抗原 . 免疫 PCR優(yōu)點為 :①特異性較強，因為它建立在抗原抗體特異性反應(yīng)的基礎(chǔ)上 .②敏感度高， PCR具有驚人的擴增能力，免疫 PCR比 ELISA敏感度高 105倍以上，可用于單個抗原的檢測 .③操作簡便， PCR擴增質(zhì)粒 DNA比擴增靶基因容易得多，一般實驗室均能進行 .
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