20xx人教版高中生物選修3專題1 第1節(jié)《dna重組技術(shù)的基本工具》-預(yù)覽頁
【正文】 不能將雙鏈 DNA 片段 ? ____ ____之間進(jìn) 行連接；而 T 4 DNA 連接酶既可以 “ 縫合 ” 雙鏈 DNA 片段互補(bǔ)的 ? ________ ，又可以 “ 縫合 ” 雙鏈 DNA 片段的 ○21________ 。其中最常用的是質(zhì)粒。 ② 所有生物共用一套遺傳密碼子 ， 為某生物的基因能夠在其他生物細(xì)胞內(nèi)正常指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成提供可能 。 (4)結(jié)果：形成黏性末端或平末端 。 2． DNA連接酶 (1 ) 分類??????????? E (2) _______ _ 和 ______ __ 是由另一種限制酶切割形成的____________ 末端，兩者要形成重組 DNA 片段，所用 D NA 連接酶通常是 ____________ 。coliDNA連接酶 已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性 DNA分子上有 3個(gè)酶切位點(diǎn) ， 如右圖中箭頭所指 。 3． “ 分子運(yùn)輸車 ” ——載體 (1)作用：一是用它作為運(yùn)載工具 ， 將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞中去；二是利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量的復(fù)制 (稱為克隆 )。 ④ 本身是安全的 ， 不能對受體細(xì)胞產(chǎn)生危害 。 質(zhì)粒是基因工程最常用的載體 ， 它的主要特點(diǎn)是 ( ) ① 能自主復(fù)制 ② 不能自主復(fù)制 ③ 結(jié)構(gòu)很小 ④ 是蛋白質(zhì) ⑤ 是環(huán)狀 RNA ⑥ 是環(huán)狀 DNA ⑦ 能 “ 友好 ” 地 “ 借居 ” A． ①③⑤⑦ B． ②④⑥ C． ①③⑥⑦ D． ②③⑥⑦ [解析 ] 質(zhì)粒存在于細(xì)菌和酵母菌等生物中 ， 是一種很小的環(huán)狀 DNA， 上面有標(biāo)記基因 ， 便于在受體細(xì)胞中檢測 。 而質(zhì)粒進(jìn)入宿主細(xì)胞后不一定都要整合到染色體 DNA上 ， 如宿主細(xì)胞是細(xì)菌細(xì)胞則不需整合 。 ③ 目前發(fā)現(xiàn)的DNA連接酶不具有連接單鏈 DNA的能力 。 知 識(shí) 構(gòu) 建 基因工程的基本工具????????????? 分子手術(shù)刀：限制性核酸內(nèi)切酶????? 來源作用結(jié)果分子縫合針： DNA 連接酶????? 分類作用分子運(yùn)輸車：基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體????? 常用載體：質(zhì)粒載體的條件其他載體 應(yīng) 用 探 究 目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒 ， pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體 ， 其主要結(jié)構(gòu)如下圖所示 。 (3)pBR322分子中另有單個(gè)的 BamH I限制酶作用位點(diǎn) ， 現(xiàn)將經(jīng) BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶 BglⅡ 處理得到的目的基因 ， 通過 DNA連接酶作用恢復(fù) ________________鍵 ， 成功獲得了重組質(zhì)粒 ， 說明 ______________________________ (4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無 ampR和 tetR的大腸桿菌 ， 將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ， 得到如圖二的菌落 。 (2) 同一限制酶切割 DNA 分子產(chǎn)生的黏性末端相同，根據(jù)題意可知：該目的基因兩側(cè)被限制酶 EcoR Ⅰ 切割后所形成的黏性末端為： 目的基因 — G AA T TC — ?? — G AA TTC — — CT T AA C — ?? — CT T AA G — (3)DNA連接酶催化兩個(gè) DNA片段形成磷酸二酯鍵；而通過 DNA連接酶作用能將兩個(gè) DNA分子片段連接 ， 表明經(jīng)兩種限制酶 (BamH I和 BglⅡ )切割得到的 DNA片段 ， 其黏性末端相
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