20xx人教版高中生物選修3專題1第1節(jié)dna重組技術(shù)的基本工具-文庫吧在線文庫
【正文】 DNA片段末端通常有兩種形式： ?________和 ?________。 黏性末端 平末端 黏性末端 平末端 比較低 4 ．基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體 (1) 載體具備的條件： a. ○23 _______________ _______ ____________________ ； b ．在宿主細(xì)胞中能保存下來并能大量復(fù)制； c. ○24 __________________________________________ 。 (2)種類：迄今已從近 300種不同的微生物中分離出了約4000種限制酶 。 以下是兩種限制酶切割后形成的 DNA片段 ， 分析回答問題 。 現(xiàn)有多個(gè)上述線性 DNA分子 ， 若在每個(gè) DNA分子上至少有 1個(gè)酶切位點(diǎn)被該酶切斷 ， 則從理論上講 ， 經(jīng)該酶酶切后 ， 這些線性 DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的 DNA片段種類數(shù)是 ( ) A． 3 B． 4 C． 9 D． 12 [答案 ] C [解析 ] 每一種限制性內(nèi)切酶切割 DNA后會(huì)留下特征性的黏性末端 ， 同時(shí)一次切割后 ， 會(huì)把 DNA分割成兩個(gè)片段 ， 且不同的限制酶切后的片段不一樣 ， 如果將題圖中的三個(gè)切割位點(diǎn)自左至右依次標(biāo)為甲 、 乙 、 丙 ， 只在甲處切 ， 可產(chǎn)生兩個(gè)片段 ， 即 a和右邊的 b＋ c＋ d段 ， 如果只在乙處切 ， 就有 a＋ b和 c＋ d段 ， 如果只在丙處切 ， 就有 a＋ b＋ c和 d段 ， 在甲 、 乙兩處同時(shí)切 ， 就有 a、 b和 c＋ d段 ， 在乙 、 丙處同時(shí)切 ， 就有 a＋ b和c、 d段 ， 在甲 、 丙兩處同時(shí)切 ， 就有 a、 b＋ c、 d段三種片段 ，在甲 、 乙 、 丙三處同時(shí)切 ， 就有 a、 b、 c、 d四種片段 。 但實(shí)際上 ， 天然載體一般不會(huì)同時(shí)具備上述條件 ， 所以在基因工程中需要對(duì)載體進(jìn)行人工改造 。 思 維 升 華 1． 與遺傳有關(guān)的各種酶的比較 名稱 作用 參與的生理 過程與應(yīng)用 作用位點(diǎn) (如下圖 ) DNA 連接酶 連接兩個(gè) DNA片段 基因工程 a 限制性核 酸內(nèi)切酶 能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開 a 名稱 作用 參與的生理 過程與應(yīng)用 作用位點(diǎn) (如下圖 ) DNA 聚合酶 在脫氧核苷酸鏈上添加單個(gè)脫氧核苷酸 DNA的復(fù)制 a RNA 聚合酶 在核糖核苷酸鏈上添加單個(gè)核糖核苷酸 轉(zhuǎn)錄 a 解旋酶 使核堿基間氫鍵斷裂形成單脫氧核苷酸鏈 DNA復(fù) 制及轉(zhuǎn)錄 b 逆轉(zhuǎn)錄酶 以 RNA為模板合成 DNA 逆轉(zhuǎn)錄、 基因工程 — 特別提醒： ① DNA連接酶和 DNA聚合酶的作用都是催化形成磷酸二酯鍵 ， 而不是氫鍵 ， 氫鍵是分子間的靜電吸引力 ，不需要通過酶的催化形成 。 (2)pBR322分子中有單個(gè) EcoR I限制酶作用位點(diǎn) ， EcoR I只能識(shí)別序列 —GAATTC—， 并只能在 G與 A之間切割 。 由圖二 、 圖三結(jié)果顯示 ， 多數(shù)大腸桿菌都能抗氨芐青霉素 ， 而經(jīng)限制酶 BamH I作用后 ， 標(biāo)記基因 tetR被破壞 ， 而不能抗四環(huán)素 ， 故多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是 pBR322質(zhì)粒 。 與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是 ___________________________， 圖三結(jié)果顯示 ， 多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是 ___________________。 限制酶在細(xì)菌內(nèi)會(huì)將外源 DNA切割掉 ， 以保證自身的安全 。 [答案 ] C 質(zhì)粒是基因工程最常用的載體 ， 下列關(guān)于質(zhì)粒
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