20xx人教版高中生物選修一52《多聚酶鏈式反應擴增dna片段》(文件)
【正文】 量 ATP 為解螺旋和合成子鏈供能 引物 RNA 為 DNA聚合酶提供合成的 3’端起點 1． 2細胞內 DNA復制過程 （ 1） DNA的反向平行結構：（結合教材圖 5－ 6） 核苷酸分子的結構與方向性：（分子結構模式圖） 由核苷酸通過 3,5磷酸二酯鍵連接形成核苷酸長鏈：（模式圖，體現方向性）。 后續(xù)加工： DNA 聚合酶 I將引物切去，并合成空缺處的 DNA單鏈，再由 DNA連接酶將不連續(xù)的 DNA子鏈連接起來（半不連續(xù)合成。 RNA聚合酶沒有校對功能，因此 RNA的合成不需要引物，而是從頭合成的，它的錯配可能性較大，在 RNA引物完成功能后即被 DNA聚合酶 I刪去，代之以高保真的 DNA鏈。 恢復螺旋：在 50℃左右時，兩條 DNA單鏈重新形成雙螺旋結構，稱為復性。 （ 5） DNA在 PCR儀中大量擴增。 3． 3每添加一種反應成分，更換一個移液器的槍頭。L 蒸餾水； 2．分光光度計調零：將 100181。 4． 3計算： DNA含量＝ 50光吸收值稀釋倍數 （三）課堂總結、點評 變性 復性 延伸 多聚酶鏈式反應擴增 DNA片段 PCR 原理 DNA 的復制需要酶、原料、能量、引物 DNA 的變性和復性受溫度影響 PCR 過程 變 性 復性 延伸 操作步驟 配制 PCR 反應體系 移入離心管 （四）實例探究 例 1 在（ ）的溫度范圍內， DNA的雙螺旋 結構解開 A. 10－ 20℃ B. 80－ 100℃ C. 20－ 30℃ D. 40－ 60℃ 解析：蛋白質大多不能忍受 60－ 80℃的高溫，而 DNA在 80℃以上才會變性。 A從 DNA分子的左端向右端 B從 DNA分子的右端向左端 C從子鏈的 5，端向 3，端 D從子鏈的 3，端向 5，端 PCR反 應在體外的條件下順利地進行，需要嚴格的控制（ ） A 氧氣的濃度 B酸堿度 C溫度 D 大氣的濕度 PCR反應循環(huán)一次后，新合成的那條子鏈的脫氧核苷酸的序列應與（ ） A模板母鏈相同 B非模板母鏈相同 C兩條模板母鏈相同 D兩條
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