血清球蛋白的分離純化與鑒定-資料下載頁(yè)
2025-05-26 18:25本頁(yè)面
【正文】 分子大小與結(jié)構(gòu)不同，所帶表面電荷的多少不同，因而在電場(chǎng)中向陽(yáng)極移動(dòng)的速度不同。經(jīng)過(guò)一定的電泳時(shí)間后可形成許多蛋白質(zhì)區(qū)帶，每一個(gè)區(qū)帶代表一組遷移率相近似的蛋白質(zhì)。 醋酸纖維素薄膜電泳 介質(zhì)：醋酸纖維素薄膜，纖維素的羥基經(jīng)乙?；纬傻睦w維素醋酸酯。溶于有機(jī)溶劑后涂成薄膜，具均一的泡沫狀結(jié)構(gòu)，有強(qiáng)滲透性。 電泳緩沖液： 液 清蛋白 pI= 57%～ 72% α1 2% ～ 5% α2 pI6 4% ～ 9% β % ～ 12% γ pI= 2% ～ 20% 球蛋白 ? ? 清蛋白 ?1 ?2 ? ? 清蛋白（ albumin， A）： 38～ 48g/L 球蛋白（ globulin， G）： 15～ 30g/L A/G：正常值 ～ ? ? ? ? 清蛋白 ?1 ?2 ? ? 加樣線 加樣線 純化蛋白 對(duì)照 樣品 【 操作步驟 】 1． 點(diǎn)樣 ：取經(jīng)巴比妥緩沖液浸透的 2 8cm薄膜，濾紙吸去表面多余水分，在無(wú)光澤面距一端 2cm處用鉛筆劃一加樣線，寫(xiě)上編號(hào)。小濾紙片蘸取血清 /樣品，垂直壓在加樣線上，待樣品滲入薄膜，無(wú)光澤面向下平貼在電泳槽支架的鹽橋上，靜置 5～ 10分鐘平衡。點(diǎn)樣端置陰極，蓋上蓋子。 2． 通電 ：接通電源，調(diào)節(jié)電壓為 40～ 50V，通電 2 ～ ，關(guān)閉電源，停止電泳。 3． 染色 ：薄膜浸入氨基黑 B染色液 2～ 5分鐘。 4． 漂洗 ：取出薄膜在漂洗液中漂洗 4～ 5次，至無(wú)蛋白區(qū)完全脫色為止。取出，用濾紙吸干液體。觀察。 5）醋酸纖維素薄膜電泳在臨床上的應(yīng)用 實(shí)驗(yàn)二 血清 γ 球蛋白的分離純化與鑒定 實(shí)驗(yàn)二 血清 γ 球蛋白的分離純化與鑒定
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