血清球蛋白的分離純化與鑒定-文庫(kù)吧資料
2025-06-01 18:25本頁(yè)面
【正文】 8 104 G100 40～ 120 15～ 20 4 103 ～ 1 105 交聯(lián)葡聚糖凝膠層析介質(zhì)的有關(guān)技術(shù)參數(shù) 實(shí)驗(yàn)原理 透析及超濾法 鹽析、有機(jī)溶劑 /免疫沉淀 電泳 凝膠層析 離子交換層析 超離心 共性 ： *生命高分子：透析、超濾、超離心、 凝膠層析 *蛋白質(zhì)溶液是親水膠體：穩(wěn)定因素為水化膜和電荷 → 鹽析 /有機(jī)溶劑沉淀 *兩性電解質(zhì)和等電點(diǎn)： pH pI，蛋白質(zhì)帶負(fù)電；反之帶正電 → 電泳、離子交換層析 *有一定的功能：抗原性 → 免疫沉淀 個(gè)性 ：蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、親水程度、形狀不同 分離依據(jù)：蛋白質(zhì)理化性質(zhì)的和個(gè)性 清蛋白 pI= 57%～ 72% α1 2% ～ 5% α2 pI6 4% ～ 9% β % ～ 12% γ pI= 2% ～ 20% 球蛋白 實(shí)驗(yàn)思路 分段鹽析去除雜蛋白 凝膠層析脫鹽 交聯(lián)葡聚糖吸水濃縮 醋酸纖維素薄膜電泳鑒定 上午完成 下午完成 先粗后細(xì) ① 分段鹽析： ?常用中性鹽： 硫酸銨 、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉等。凝膠分離范圍之外的分子，難以分離。因此， “ G” 反映凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分部范圍。 ② 基本原理： 固定相 ：凝膠，惰性三維空間多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故稱(chēng)分子篩，包括瓊脂糖、 交聯(lián)葡聚糖 、聚丙烯酰胺、瓊脂糖 葡聚糖復(fù)合凝膠。各組分理化性質(zhì)不同，對(duì)流動(dòng)相和固定相具有不同的作用力，因此在流動(dòng)相推動(dòng)樣品通過(guò)固定相的過(guò)程中，通過(guò)不斷地吸附、解吸、吸附、解吸作用，造成混合物中各組分在固定相中的遷移距離不等，達(dá)到分離。實(shí)驗(yàn)二 血清 γ 球蛋白的分離純化與鑒定 層析技術(shù) 實(shí)驗(yàn)原理 實(shí)驗(yàn)思
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