蛋白質(zhì)的分離純化-文庫(kù)吧資料
2024-11-04 05:30本頁(yè)面
【正文】 少抑制程度。 〔2〕抑制程度決定(ju233。)的增大而增大,第三十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。,★Vmax不變 ★Km變大，而且隨[I]濃度(n243。)競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑后，Km 變大，酶促反響速度減小。,可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué)特征(t232。,㈣可逆抑制作用的動(dòng)力學(xué),第三十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。nbi233。,通過(guò)透析、超濾、凝膠過(guò)濾等 通過(guò)VE速度曲線(xiàn)(qūxi224。zh236。,酶只有(zhǐyǒu)在與底物結(jié)合后，才能與抑制劑結(jié)合。)圖示,第三十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。,非競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制(y236。 不能通過(guò)(tōnggu242。) 〔noncompetitive inhibition〕,底物和抑制劑可以同時(shí)與酶結(jié)合，但是，中間的三元復(fù)合物ESI不能進(jìn)一步分解為產(chǎn)物，因此，酶的活性降低。,⑵非競(jìng)爭(zhēng)性抑制(y236。)圖示,第二十九頁(yè)，共六十七頁(yè)。,競(jìng)爭(zhēng)性可逆抑制(y236。 可以通過(guò)增加底物濃度而解除此種抑制。g242。zh236。ng),第二十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。,㈡抑制作用的類(lèi)型(l232。)， 使酶的活性下降，無(wú)法用透析、超濾等物理方法除 去抑制劑而使 酶復(fù)活。,不可逆的抑制作用 抑制劑與酶活性中心〔外〕的必需基團(tuán)共價(jià)結(jié)合(ji233。)分?jǐn)?shù),★相對(duì)(xiāngdu236。)的兩種表示方法,★相對(duì)活力(hu243。,㈠ 抑制程度(ch233。)毒物對(duì)人畜的中毒而設(shè)計(jì)快速有效解毒藥物。,研究(y225。,變性作用(denaturation)： 抑制作用(inhibiton)：使酶活力下降或喪失但并不引起酶蛋白變性 變性劑沒(méi)有(m233。nc236。,兩種不同模式的雙底物(dǐ w249。,多底物酶促反響有 三種(sān zhǒnɡ)動(dòng)力學(xué)機(jī)理 ★sequential reactions〔singledisplacement reactions): ▲ Ordered reaction (ordered Bi Bi) ▲Random reactions (random Bi Bi) ★ Ping pong reactions 〔doubledisplacement reactions),㈢多底物(dǐ w249。,其他(q237。ng)數(shù)增量，點(diǎn)多集中在1/v軸附近。,選底物濃度應(yīng)考慮能否得到1/[S]的常數(shù)增量： [S]為1.01.11.21.41.62.0、2.3.35.0、10時(shí) 1/[S]為0.0.0.0.0.0.0.0.0.1.0是常數(shù)增量。,Km和Vmax的求解(qiguān)地比較不同的酶或同一種酶催化不同底物的催化效率。),第十七頁(yè)，共六十七頁(yè)。,Vmax與K3〔 Kcat〕的意義(y236。ng)的酶濃度下，Vmax是一個(gè)常數(shù)，它只與底物的種類(lèi)及反響條件有關(guān)。,第十六頁(yè)，共六十七頁(yè)。 〔5〕Km值只是在固定的底物，一定的溫度和pH條件下，一定的緩沖體系中測(cè)定的，不同條件下具有不同的Km值。 〔4〕不同的酶具有(j249。)Km的意義,〔1〕指出了[S]與V的關(guān)系 〔2〕指明了Km的定義 〔3〕 Km不是ES的解離平衡常數(shù)，Km近似地說(shuō)明E與S的親和力。,米氏常數(shù)(ch225。,當(dāng)[S]Km時(shí),當(dāng)[S]Km時(shí),當(dāng)[S]=Km時(shí),由米式方程(fāngch233。,酶催化(cuī hu224。 因此,米氏常數(shù)的單位為mol/L。)， Vmax為最大反響速度,當(dāng)反響速度等于最大速度一半(yīb224。ng)后的米式方程,Briggs和Haldane 1925,Km 即為米氏常數(shù)(ch225。)常數(shù)〕,第十二頁(yè)，共六十七頁(yè)。ng)的動(dòng)力學(xué)方程式 米式方程： Michaelis和Menten 1913年,Ks為底物(dǐ w249。,第十一頁(yè)，共六十七頁(yè)。zh236。)濃度對(duì)酶反響速率的影響,㈠中間(zhōngjiān)絡(luò)合物學(xué)說(shuō) 酶與底物先絡(luò)合成一個(gè)中間產(chǎn)物，然后中間產(chǎn)物進(jìn)一步分解成產(chǎn)物和游離的酶。ng)動(dòng)力學(xué),第十頁(yè)，共六十七頁(yè)。ng)速度的各種因素，包括底物濃度、酶濃度、pH、溫度、激活劑與抑制劑等。,研究酶促反響(fǎny236。
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