蛋白質的分離、純化和表征(1)-文庫吧資料
2025-05-06 06:38本頁面
【正文】 白質的分離純化方法 五、蛋白質的分離純化方法 （一） 根據(jù)分子大小不同的純化方法 透析和超過濾 ?利用蛋白質分子不能透過半透膜將其 與小分子物質分開 ?半透膜為玻璃紙或纖維素材料 血液透析 小分子溶出 小分子被帶出 透析機 透析液 加壓 血液 凝膠過濾 凝膠過濾所用介質為凝膠珠，其內部為多孔網(wǎng)狀結構一定型號的凝膠網(wǎng)孔大小一定，只允許相應大小的分子進入凝膠顆粒內部，大分子則被排阻在外 洗脫時大分子隨洗脫液從顆粒間隙流下來，洗脫液體積??；小分子在顆粒網(wǎng)狀結構中穿來穿去，歷程長，后洗脫下來，洗脫體積大 . 測定蛋白質分子量一般用葡聚糖，商品名： Sephadex （二）利用溶解度差別的純化方法 調整溶液 pH 不同蛋白在各自 pI處依次沉淀 2. 鹽析 在蛋白質的水溶液中，加入大量 高濃度的強電解質鹽 如硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等，可破壞蛋質分子表面的水化層，中和它們的電荷，因而使蛋白質沉淀析出，這種現(xiàn)象稱為 鹽析 。 一、蛋白質的兩性電離及等電點 蛋白質含有酸 /堿 AA殘基具有兩性 堿 /酸越大 —— pI 越大 ? pI通常在 左右 一、蛋白質的兩性電離及等電點 二、蛋白質的膠體性質與蛋白質的沉淀 （一）膠體性質 （ colloidal system） 膠體溶液的特點： ? 分子直徑在 1100 nm內 ? 溶于水 ? 不易聚集沉淀 大多數(shù)球狀蛋白能形成穩(wěn)定的親水膠體溶液 蛋白質膠體溶液的穩(wěn)定因素： ，相互排斥 ? 蛋白質溶液具有丁達爾效應、布朗運動以及不能通過半透膜等性質 （二）蛋白質的 沉淀 Pr從膠體溶液中析出 Ⅰ 可逆
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