【正文】
層析 ? 通過特異性的標(biāo)簽肽或蛋白,包括 GST,His,使得目的蛋白能夠與蛋白柱特異性的結(jié)合。 2022年 7月 wash porous bead glutathione elute GST apply sample thrombin site protein of interest Example: GST Glutathione GSTtagged proteins bind to gluthatione on beads Nonspecifically or weakly bound proteins washed off GSTtagged proteins eluted with glutathione (petitor) or thrombin (protease) GST親合層析 2022年 7月 利用蛋白特性親合純化 ?如 NADPH偶連的層析柱能夠捕捉 NADPH結(jié)合的蛋白質(zhì); ?如鈣磷 ATP柱能夠特異性的捕捉與 ATP結(jié)合的蛋白激酶; ?金黃色葡萄球菌蛋白 ProteinA可以特異性的結(jié)合抗體,并用于抗體蛋白的分離與純化。 2022年 7月 三種蛋白質(zhì)層析的檢測 2022年 7月 Protein mixture applied to column Solvent (buffer) applied to top, flowed through column Different proteins interact with matrix to different extents, flow at different rates Proteins collected separately in different fractions 柱層析 2022年 7月 Coomassie Blue/ Silver Staining 電泳分析 2022年 7月 蛋白質(zhì)純化實例