生物制品工藝學(xué)xxxx年12月考試復(fù)習(xí)資料-資料下載頁
2025-04-17 07:11本頁面
【正文】 ：銨型陽離子交換樹脂，洗脫劑為氨水加氯化銨；用茚三酮檢查流出液，～12，得率可達(dá)90%～95%；③真空濃縮：去除氨，并提高Lys含量，真空時溫度65℃，濃度22～23176。B233。；④中和結(jié)晶：加入工業(yè)鹽酸，攪拌，自然冷卻結(jié)晶，至5℃結(jié)晶完全（粗結(jié)晶，含一分子結(jié)晶水的粗LLys鹽酸鹽）；⑤重結(jié)晶：用蒸餾水溶解，1112176。B233。，加入活性炭脫色，壓濾，再真空濃縮至22176。B233。，再結(jié)晶、冷卻、離心分離并水洗；⑥干燥：60℃熱風(fēng)干燥，去結(jié)晶水，得到LLys鹽酸鹽，%以下。2IMP發(fā)酵生產(chǎn)菌種應(yīng)具備的條件：答：①選擇肌苷酸酶弱或喪失的出發(fā)菌株（不分解肌苷酸）。②切斷IMP向下的兩條支路，使IMP大量生成和積累；③選育結(jié)構(gòu)類似物雙重抗性突變株；④限量添加Mn2+，解除細(xì)胞膜滲透型障礙。2從鳥甘酸的生物合成途徑及其調(diào)節(jié)機(jī)制分析，要積累鳥苷，應(yīng)使鳥苷生產(chǎn)菌（枯草芽孢桿菌）具備哪些條件？答：①枯草芽孢桿菌具有GMP的環(huán)形支路：菌株因喪失SAMP合成酶（Ade－）活性，切斷從IMP到AMP的通路，使生成的IMP全部轉(zhuǎn)向合成GMP，同時喪失GMP還原酶活性，使生成的GMP不致還原為IMP。②為了積累鳥苷，核苷酶或核苷磷酸化酶等鳥苷分解酶的活性必須微弱；③鳥苷酸（GMP）是嘌呤核苷酸全合成的終產(chǎn)物，為了積累鳥苷，必須解除GMP對PRPP轉(zhuǎn)胺酰酶，IMP脫氫酶及GMP合成酶等的反饋抑制與阻遏。（封閉基因或選擇滲漏）④為了抑制肌苷產(chǎn)生，高效率積累鳥苷，由IMP脫氫酶及GMP合成酶所催化的反應(yīng)應(yīng)該比核苷酸酶（IMPIR)所催化的反應(yīng)優(yōu)先進(jìn)行。2離子交換樹脂法提取肌苷酸的工藝流程及說明？答：（1）工藝流程：發(fā)酵液→過濾→→陽離子樹脂吸附→→陰離子樹脂吸附→洗脫→減壓濃縮→溶解→結(jié)晶→溶解→重結(jié)晶→肌苷酸精品（2）提取工藝說明：過濾、酸化：發(fā)酵液加活性白土（15g/L)，壓濾除菌體，；陽離子交換：732（H＋）型樹脂，上柱液體積為濕樹脂體積的6倍。；陰離子交換：上柱液體積為濕樹脂體積的6倍，90％肌苷酸被吸附；洗脫：先用水沖洗柱子，；。收集肌苷酸流出液；減壓濃縮：將洗脫液用40％，減壓濃縮15－20倍體積；結(jié)晶：濃縮液加入2倍體積的95％乙醇，低溫育晶，析出肌苷酸粗品；重結(jié)晶：肌苷酸粗品加水溶解，加乙醇低溫結(jié)晶，過濾，晶體用30％乙醇洗滌2－3次⑧肌苷酸精品：濕肌苷酸晶體烘干，制得肌苷酸精品。2簡述抗生素的作用機(jī)制有哪幾類？答：①抑制細(xì)胞壁合成的抗生素；②影響細(xì)胞膜功能的抗生素；③抑制核酸合成的抗生素；④抑制蛋白質(zhì)合成的抗生素；⑤抑制生物能作用的抗生素。2青霉素和頭孢菌素合成的代謝調(diào)控？答：①碳源分解代謝物阻遏；②賴氨酸的反饋調(diào)節(jié)；③L－甲硫氨酸（調(diào)節(jié)物）對頭孢菌素C形成的促進(jìn)作用；④在頭孢菌素C的合成過程中，擴(kuò)環(huán)和羥化是其中的關(guān)鍵反應(yīng)和限速階段 。⑤纈氨酸是青霉素生物合成的前體物。2青霉素發(fā)酵中造成異常溶氧可能原因？答：①染菌：溶氧迅速下降，鏡檢。②染噬菌體：溶氧上升，C下降，發(fā)酵液迅速轉(zhuǎn)稀，應(yīng)及早處理，嚴(yán)防擴(kuò)大；③代謝異常：可能是有機(jī)酸大量積累，溶氧不足引起泡沫：2青霉素提煉工藝中采用了哪些單元操作，為什么？答： ①預(yù)處理：發(fā)酵液加少量絮凝劑沉淀蛋白。原因：濃度較低，含有大量雜質(zhì)。目的在于濃縮目的產(chǎn)物，去除大部分雜質(zhì)，改變發(fā)酵液的流變學(xué)特征，利于后續(xù)的分離純化過程。②過濾:去除蛋白、菌體及其它雜質(zhì)③萃取：正相萃?。簭臑V液萃取到乙酸丁酯；反相萃取：從乙酸丁酯反萃取到水相中。反復(fù)萃取2~~3次，達(dá)到結(jié)晶要求。④脫色：萃取液中添加活性炭，除去色素、熱源，過濾，除去活性炭。在提取液中加活性炭150300g/10億單位。⑤結(jié)晶： M 。，16－26℃。水和丁醇形成共沸物而蒸出。蒸出餾分中含水達(dá)24%時，停止蒸餾。鈉鹽結(jié)晶析出。結(jié)晶經(jīng)過洗滌（丁醇46L/10億）、干燥后，得到青霉素產(chǎn)品。 青霉素游離酸在有機(jī)溶劑中的溶解度很大，當(dāng)它與某些金屬離子或有機(jī)胺結(jié)合后，由于極性增大，溶解度大大降低而自有機(jī)溶劑中析出。菌種篩選的方法？答：①透明圈法：在平板培養(yǎng)基中加入溶解性較差的底物，使培養(yǎng)基混濁。能分解底物的微生物便會在菌落周圍產(chǎn)生透明圈，圈的大小初步反應(yīng)該菌株利用底物的能力。②變色圈法：對于一些不易產(chǎn)生透明圈產(chǎn)物的產(chǎn)生菌，可在底物平板中加入指示劑或顯色劑，使所需微生物能被快速鑒別出來。③生長圈法：生長圈法通常用于分離篩選氨基酸、核苷酸和維生素的產(chǎn)生菌。④抑菌圈法：常用于抗生素產(chǎn)生菌的分離篩選。抑菌圈法是常用的初篩方法，工具菌采用抗生素的敏感菌。8 / 8
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