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生物制品概述-資料下載頁

2025-08-01 16:55本頁面
  

【正文】 第一節(jié)、一般生物制品的制備方法 第二節(jié)、各類生物制品的分離純化方法 第三節(jié)、基因工程制品的制備 第一節(jié) 一般生物制品的制備方法 Your site here 生物制品的制造主要包括以下工藝過程 : ? ?物質(zhì) ? ? 一、生物材料的選取與預(yù)處理 : 選取時(shí)需考慮其來源、價(jià)格、目的物的含量、雜質(zhì)的種類、含量和性質(zhì)等。 具體選擇原則是: 1)根據(jù)目的物的分布應(yīng)選擇富含有效成分的生物品種, 如制備催乳素,應(yīng)選擇哺乳動(dòng)物,而不是魚類。 2)選擇合適的組織器官 ,如制備胃蛋白酶要選擇胃做原料,而不是骨頭。 3)選擇生物適宜的生長期, 生物的生長期對(duì)生理活性物質(zhì)的含量影響很大。如凝乳酶只能以哺乳期小牛、仔羊的胃為原料,成年的牛羊就不適用。 4)應(yīng)考慮到雜質(zhì)的性質(zhì),應(yīng)避免選擇雜質(zhì)的性質(zhì)與有效成分相似的生物材料,以避免分離純化時(shí)雜質(zhì)帶來的干擾。 如胰臟含有磷酸單酯酶和磷酸二酯酶,二者很難分開,所以很少選胰臟作為提取磷酸單酯酶的原料,而是選用前列腺為提取材料,應(yīng)為它不含磷酸二酯酶。 生物活性物質(zhì)易失活,易降解,采集時(shí)必須保持材料的新鮮。防止腐敗、變質(zhì)和微生物污染。如胰臟、脾臟采摘后要立即速凍,防止有效成分活力喪失。膽汁不可在空氣中久置,以防止膽紅素氧化。 二、生物活性物質(zhì)的提取 生物組織與細(xì)胞的破碎 生物制品大部分存在于生物組織或細(xì)胞中,因此,要分離或提取這些產(chǎn)物或者提高提取率,把生物組織或細(xì)胞破碎就顯得十分的重要。 破碎細(xì)胞是為了破壞細(xì)胞壁或細(xì)胞膜,使細(xì)胞內(nèi)容物有效的釋放出來,獲得有效的提取。 具體使細(xì)胞破碎的方法有: 1)高壓勻漿法 2)反復(fù)凍融法 3)超聲振蕩破碎法 4)酶溶破碎法 5)高速珠磨法 6)化學(xué)滲透法 7)壓力法 1)高壓勻漿法 屬于機(jī)械破碎法,所用的設(shè)備是高壓勻漿器。破碎原理是:在高壓下將勻漿液以高速噴射到靜止的環(huán)上,再流出,再轉(zhuǎn)到常壓下。經(jīng)過這樣高壓與常壓的反復(fù)將細(xì)胞破碎。此法的優(yōu)點(diǎn)是:可大規(guī)模處理勻漿;缺點(diǎn)是工作中會(huì)使液體升溫,造成一些蛋白的失活。 2)反復(fù)凍融法 該法是將細(xì)胞放在低溫下冷凍,然后在室溫中融化,如此反復(fù)多次而使細(xì)胞壁破裂,其原理主要有兩點(diǎn):一是冷凍使細(xì)胞內(nèi)的疏水鍵斷裂,增加細(xì)胞液的溶解度,而使冷凍使細(xì)胞內(nèi)的水結(jié)冰膨脹而使細(xì)胞壁破裂。 優(yōu)點(diǎn)是設(shè)備簡單操作簡便,活性保持好;缺點(diǎn)是耗時(shí),細(xì)胞破碎率低。 3)超聲振蕩破碎法 這種方法是當(dāng)今應(yīng)用較多的一種方法。原理是:當(dāng)聲波達(dá)到 202200HZ以上時(shí),液體會(huì)發(fā)生非??焖俚恼駝?dòng),產(chǎn)生數(shù)以萬計(jì)的小氣泡,這些小氣泡不斷的產(chǎn)生內(nèi)爆,造成局部的真空,這叫做空穴 效應(yīng),這種空穴效應(yīng)造成細(xì)胞內(nèi)外壓強(qiáng)的改變而達(dá)到破碎的目的。 4)酶溶破碎法 在提取液中加入特定的能夠破壞細(xì)胞壁或細(xì)胞膜的酶。利用酶促反應(yīng)將細(xì)胞壁或細(xì)胞膜分解掉或破壞它們的結(jié)構(gòu),使細(xì)胞里面的內(nèi)容物流出來。 為了提高破碎效率,有時(shí)可以幾種方法同時(shí)使用。破碎過程中要選擇盡量經(jīng)濟(jì)便捷的方法,但是首先應(yīng)以不破壞有效成分為前提。 把破碎的勻漿固液分離 剛破碎完的勻漿中含有有效成分,但是并不能直接使用,因?yàn)樵趧驖{中除了有效成分還還有大量的細(xì)胞碎片和顆粒性物質(zhì),所以需要對(duì)提取液進(jìn)行固液分離操作,出去細(xì)胞碎片等。 固液分離操作可采用的方法很多,常用的有離心法、膜過濾法和萃取法。 三、生物制品的分離、純化 固液分離后,各種成分均以溶解狀態(tài)分散在提取液中,除了我們想要的那種成分,其他的成分都屬于雜質(zhì),所以我們要對(duì)這樣的混合狀態(tài)的提取液再進(jìn)一步分離純化。 分離純化是生物制品制備的核心操作,由于生化物質(zhì)種類繁多,因此分離純化的方法也千變?nèi)f化,所以具體的分離純化方法應(yīng)該根據(jù)目的物的物化性質(zhì)與生物學(xué)性質(zhì)而定。 分離純化過程中,常用分級(jí)沉淀、超濾、電泳、色譜層析等技術(shù)。具體的各成分的分離純化方法將在接下來的第二節(jié)中為大家重點(diǎn)講到。
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