【正文】 吸干表面水分(70％的酒精)搖動(dòng)23次67秒(無(wú)菌水)清洗(無(wú)菌吸水紙)吸干表面水分(氯化汞)溶液浸泡1～2分鐘(無(wú)菌水)清洗3次［思考7］在此消毒過(guò)程中，是不是強(qiáng)度越大越好，為什么？ 不是。對(duì)外植體進(jìn)行表面消毒時(shí)，既要考慮到藥劑的消毒效果，又要考慮到植物的耐受力。3．發(fā)酵操作活動(dòng)5：閱讀“接種、培養(yǎng)、移栽和栽培”，填寫(xiě)：3．1前期準(zhǔn)備：用70％的酒精消毒工作臺(tái)，點(diǎn)燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進(jìn)行，器械使用前后都要用火焰灼燒滅菌。3．2接種操作：接種過(guò)程中插入外植體時(shí)形態(tài)學(xué)上端朝上，每個(gè)錐形瓶接種7～8個(gè)外植體。〖思考8〗外植體接種與細(xì)菌接種相似之處是操作步驟相同，而且都要求無(wú)菌操作。3．3培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該放在無(wú)菌箱中進(jìn)行，并定期進(jìn)行消毒，保持適宜的溫度和光照。3．4移栽前應(yīng)先打開(kāi)培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過(guò)毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時(shí)間，進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露天栽培。［思考9］外植體在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)被污染，你認(rèn)為造成污染的原因有哪些？外植體消毒不徹底；培養(yǎng)基滅菌不徹底；接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。（三）課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)菊花的組織培養(yǎng)基本原理細(xì)胞的全能性基本過(guò)程脫分化愈傷組織再分化影響因素材料性質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件操作流程配制MS固體培養(yǎng)基外植體的消毒接種培養(yǎng)移栽栽培資料——克隆羊多利2003年2月14日蘇格蘭羅斯林研究所證實(shí)世界上首只成年體細(xì)胞克隆動(dòng)物多利已經(jīng)死亡。多利的尸體將被制成標(biāo)本，存放在蘇格蘭國(guó)家博物館。多利于1996年7月5日出生，于1997年2月23日被介紹給公眾，它是用一只6歲母羊的體細(xì)胞進(jìn)行克隆，由羅斯林研究所與英國(guó)PPL醫(yī)療公司共同培育而成的。羅斯林研究所所長(zhǎng)哈里格里芬說(shuō)，綿羊通常能活11到12年。但2002年1月科學(xué)家發(fā)現(xiàn)多利羊的左后腿患上了關(guān)節(jié)炎這種典型的“高齡病癥”，現(xiàn)在，多利羊壯年死于老年羊常得的肺部感染疾病。研究人員對(duì)它實(shí)施了“安樂(lè)死”。世界第一只體細(xì)胞克隆動(dòng)物多利羊的誕生曾震驚了世界，它的死也引起了人們對(duì)克隆動(dòng)物的關(guān)注、以及對(duì)克隆技術(shù)發(fā)展前景的再思考。 課題2 月季的花藥培養(yǎng)【教學(xué)目標(biāo)】（一）知識(shí)與技能識(shí)記被子植物花粉發(fā)育的過(guò)程通過(guò)學(xué)習(xí)花藥培養(yǎng)的基本技術(shù)，培養(yǎng)設(shè)計(jì)試驗(yàn)、動(dòng)手操作、分析解釋實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的能力（二）過(guò)程與方法列表比較花藥培養(yǎng)與組織培養(yǎng)選擇適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基（三）情感、態(tài)度與價(jià)值觀培養(yǎng)動(dòng)手實(shí)踐、勇于探索的科學(xué)探究素質(zhì)通過(guò)討論花藥離體培養(yǎng)技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用，幫助學(xué)生確立理論聯(lián)系實(shí)際的觀點(diǎn)【教學(xué)重點(diǎn)】選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基【教學(xué)難點(diǎn)】選取適宜的培養(yǎng)材料和培養(yǎng)基【教學(xué)方法】啟發(fā)式教學(xué)【教學(xué)工具】多媒體課件【教學(xué)過(guò)程】（一）引入新課利用植物的莖可以經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)得到新植株，但這種方法同時(shí)也存在著一定的缺陷，繁殖出來(lái)的新植株往往無(wú)法獲得一些新的性狀。本節(jié)我們將學(xué)習(xí)花藥離體培養(yǎng)技術(shù)，這是一種信的育種技術(shù)。（二）進(jìn)行新課1．基礎(chǔ)知識(shí)活動(dòng)2：閱讀“被子植物的花粉發(fā)育”，回答下列問(wèn)題：1．被子植物的花粉是在 中由 經(jīng)過(guò) 分裂形成的。2．結(jié)合教材內(nèi)容填下列示意圖：小孢子母細(xì)胞（2n）（ ）時(shí)期（n）單核（ ）期（n）雙核期（ ）細(xì)胞核（n）（ ）細(xì)胞核（n）（ ）細(xì)胞（n）（ ）細(xì)胞（n）（ ）個(gè)精子(n)（ ）分裂（ ）分裂單核（ ）期（n）（ ）分裂〖思考2〗由此可見(jiàn)，被子植物的花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 四分體 時(shí)期， 單核 期和 雙核 期等階段?！妓伎?〗在正常情況下，一個(gè)小孢子母細(xì)胞可以產(chǎn)生 4 個(gè)精子；在一枚花藥中可以產(chǎn)生 很多 個(gè)花粉?！妓伎?〗營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在花粉萌發(fā)過(guò)程中的作用是什么？控制花粉的萌發(fā)并提供營(yíng)養(yǎng)?；顒?dòng)3：閱讀“產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑”，討論并回答下列問(wèn)題：1．產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株）的兩種途徑：一是花粉通過(guò) 胚狀體 階段發(fā)育為植株，二是通過(guò) 愈傷組織 階段發(fā)育為植株。這兩種途徑的區(qū)別主要取決于培養(yǎng)基中 激素 的種類(lèi)及其 濃度 的配比。2．填寫(xiě)培育花粉植株的途徑圖解：（ ）花藥中的花粉（ ）（ ）（ 胚狀體 ）（ 愈傷組織 ）（ ）叢芽生根移栽3．胚狀體的結(jié)構(gòu)及其發(fā)育過(guò)程與種子相似，所以把胚狀體到從芽的過(guò)程稱(chēng)為 分化 ，而把從愈傷組織到從芽的過(guò)程稱(chēng)為 再分化 。活動(dòng)4：閱讀“影響花藥培養(yǎng)的因素”，回答下列問(wèn)題：1．影響花粉植株的主要因素： 材料的選擇 和 培養(yǎng)基的組成 等。2．材料的選擇：①?gòu)幕ㄋ巵?lái)看，應(yīng)當(dāng)選擇（初花期、盛花期、晚花期）的花藥；②從花粉來(lái)看，應(yīng)當(dāng)選擇（四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期）的花粉；③從花蕾來(lái)看，應(yīng)當(dāng)選擇（完全未開(kāi)放、略微開(kāi)放、完全盛開(kāi)）的花蕾。〖思考5〗除此之外，你認(rèn)為影響花粉誘導(dǎo)成功率的因素還有哪些？植物的種類(lèi)、親本生長(zhǎng)條件、材料的低溫處理、接種密度、培養(yǎng)基組成、培養(yǎng)的環(huán)境條件等。〖思考6〗為什么不選擇使用單核期之前或之后的花粉？單核期之前，花藥質(zhì)地幼嫩，容易破碎；單核期之后，花瓣開(kāi)始松動(dòng)，消毒困難。〖思考7〗花瓣松動(dòng)會(huì)給材料消毒帶來(lái)困難的原因是 外界環(huán)境中的微生物容易侵入到花藥中 。2．實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)活動(dòng)5：閱讀“材料的選擇”，回答下列問(wèn)題：1．選擇花藥時(shí)一般通過(guò) 鏡檢 確定花粉發(fā)育時(shí)期，此時(shí)需要對(duì)花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色，最常用的染色劑是 醋酸洋紅溶液 和 焙花青－鉻釩溶液 ，它們分別可以將細(xì)胞核染成 紅 色和 藍(lán)黑 色。2．在使用焙花青－鉻釩溶液時(shí)，需要首先將花藥用 卡諾氏固定液 處理20min。該試劑的配制方法是將 無(wú)水酒精和冰醋酸 按體積比為 3：1 的比例混合均勻?；顒?dòng)6：閱讀“材料的消毒”，填寫(xiě)下列流程圖：花蕾（70％酒精）大約30s（無(wú)菌水）清洗（無(wú)菌吸水紙）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（無(wú)菌水）沖洗〖思考8〗月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較，二者有何不同？在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗?；顒?dòng)7：閱讀“接種和培養(yǎng)”，回答下列問(wèn)題：1．剝?nèi)』ㄋ帲合竞蟮幕ɡ伲? 無(wú)菌 條件下除去花萼、花瓣?！妓伎?〗剝?nèi)』ㄋ帟r(shí)，一是注意不要損傷花藥，原因是 容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織 ；二是要徹底除去花絲，原因是 花絲不利于愈傷組織或胚狀體的形成 。2．接種花藥：剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 培養(yǎng)基 上。每個(gè)培養(yǎng)瓶接種 7～10 個(gè)花藥。3．培養(yǎng)：花藥培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 MS 培養(yǎng)基，pH為 ，溫度為 25 ℃，幼苗形成之前（需要、不需要）光照?！妓伎?0〗在花藥培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 IAA ；在誘導(dǎo)叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 BA ；在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中，用量最高的激素是 IAA 。4．培養(yǎng)20－30d后，花藥開(kāi)裂，長(zhǎng)出 愈傷組織 或釋放出 胚狀體 。前者還要轉(zhuǎn)移到 分化培養(yǎng)基 上進(jìn)行分化培養(yǎng)成再生植株；后者要盡快 分開(kāi) 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。5．通過(guò)愈傷組織形成的植株，常常會(huì)出現(xiàn) 染色體倍性 的變化，因而需要鑒定和篩選?！妓伎?1〗為什么通過(guò)愈傷組織形成的植株會(huì)發(fā)生染色體倍性的變化？（05全國(guó)理綜III）有些是由花粉發(fā)育形成的單倍體花粉植株，有些是由花粉壁細(xì)胞發(fā)育形成的二倍體花藥壁植株。（三）課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)本課題有一定難度，成功率較低。全部完成課題不僅耗時(shí)較長(zhǎng)，又有季節(jié)限制。最好課前做好時(shí)間規(guī)劃，以提高工作效率。建議教師提前做好相關(guān)環(huán)節(jié)的準(zhǔn)備，如花蕾的選擇、培養(yǎng)基配方等。同時(shí)對(duì)于興趣較高的同學(xué)可以安排在課外動(dòng)手嘗試，教師提供相關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)。（四）實(shí)例探究例1．某名貴花卉用種子繁殖會(huì)發(fā)生性狀分離。為了防止性狀分離并快速繁殖，可以利用該植物的一部分器官或組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，發(fā)育出完整植株。進(jìn)行離體培養(yǎng)時(shí)不應(yīng)采用該植株的（ ）A．莖尖 B．子房壁 C．葉片 D．花粉粒解析：本題主要考查無(wú)性生殖特點(diǎn)。涉及知識(shí)點(diǎn)有：組織培養(yǎng)、體細(xì)胞、生殖細(xì)胞等。抓住無(wú)性生殖能夠保持原物種特性這一特點(diǎn)。組織培養(yǎng)就是無(wú)性生殖的一種方式，它是由體細(xì)胞培養(yǎng)而來(lái)的，含有原物種的全部基因，而花粉粒是生殖細(xì)胞。該題易陷入思維定勢(shì)，聯(lián)想到花粉粒的離體培養(yǎng)?？梢?jiàn)，植物組織培養(yǎng)若取自體細(xì)胞則為無(wú)性生殖；若取自生殖細(xì)胞則為有性生殖。答案：D例2． 一個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞在減數(shù)分裂的第一次分裂時(shí)，有一對(duì)同源染色體不發(fā)生分離，所形成的次級(jí)精母細(xì)胞減數(shù)分裂的第二次分裂正常；另一個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞減數(shù)分裂的第一次分裂正常，減數(shù)第二次分裂時(shí)，在兩個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞中，有一個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞的1條染色體姐妹染色單體沒(méi)有分開(kāi)。以上兩個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞可產(chǎn)生染色體數(shù)目不正常的配子（以下簡(jiǎn)稱(chēng)不正常的配子）。上述兩個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞減數(shù)分裂的最終結(jié)果應(yīng)當(dāng)是A． 兩者產(chǎn)生的配子全部都不正常 B． 前者產(chǎn)生一半不正常的配子，后者產(chǎn)生的配子不正常C． 兩者都產(chǎn)生一半不正常的配子D．前者產(chǎn)生全部不正常的配子，后者只產(chǎn)生一半不正常的配子