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理學(xué)酶工程ppt課件-資料下載頁

2025-02-21 22:20本頁面
  

【正文】 法或不同載體固定化后 , 其最適溫度可能不同 。 如: 氨基?;? 用 DEAE— 葡聚糖凝膠經(jīng)離子鍵結(jié)合法固定化后 ,其最適溫度 (72℃ )比游離酶的最適溫度 (60℃ )提高12℃ ; 用 DEAE— 纖維素固定化 , 其最適溫度 (67℃ )比游離酶提高 7℃ ; 用烷基化法固定化的氨基?;?, 其最適溫度卻比游離酶則有所降低 。 2022/3/13 74 最適 pH: 酶經(jīng)固定化后 , 其作用的最適 pH常會發(fā)生偏移 , 影響固定化酶最適 PH的因素主要有兩個(gè) 。 (1) 載體性質(zhì)對最適 pH影響: 用帶負(fù)電荷載體制備的固定化酶 , 最適 pH比游離酶最適 pH高 。 用帶正電荷載體制備的固定化酶 , 最適 pH比游離酶最適 pH低 。 用不帶電荷載體制備的固定化酶 , 最適 pH一般不改變 。 2022/3/13 75 (2) 產(chǎn)物性質(zhì)對最適 pH影響; 若酶催化反應(yīng)產(chǎn)物為酸性時(shí) , 固定化酶最適 pH比游離酶的最適 pH要高 。 若酶催化反應(yīng)產(chǎn)物為堿性時(shí) , 固定化酶最適 pH比游離酶的最適 PH要低 。 若酶催化反應(yīng)產(chǎn)物為中性時(shí) , 固定化酶最適 pH不變 。 2022/3/13 76 底物特異性: 作用于小分子底物的酶類經(jīng)固定化后,專一性基本不變。而既可作用大分子也可作用小分子底物的酶類經(jīng)固定化后專一性會發(fā)生變化。 如: 胰蛋白酶既可作用于高分子的蛋白質(zhì) , 又可作用于低分子的二肽或多肽 , 固定在羧甲基纖維素上的胰蛋白酶 , 對二肽或多肽的作用保持不變 , 而對酪蛋白的作用僅為游離酶的 3% 左右 . 以羧甲基纖維素為載體經(jīng)迭氮法制備的核糖核酸酶 ,當(dāng)以核糖核酸為底物時(shí) , 催化速度僅為游離酶的 2%左右 ,而以環(huán)化鳥苷酸為底物時(shí) , 催化速度可達(dá)游離酶的 50~60% 。 2022/3/13 77 1.酶制劑可用于 化驗(yàn)診斷、 治療疾病 。 從曲霉中提取的淀粉酶可用于治療消化不良、溶菌酶可用于抗菌、消炎。 2.酶制劑可用于加工 生產(chǎn) 一些產(chǎn)品。 三、酶工程的應(yīng)用 2022/3/13 78 世界上生產(chǎn)規(guī)模最大,應(yīng)用最為成功的一種固定化酶 ,用來生產(chǎn)一種重要的甜味劑 果葡糖漿 。 此固定化酶在國內(nèi)外均進(jìn)行過廣泛的研究和應(yīng)用, 1973年就已用于工業(yè)化生產(chǎn)。 葡萄糖異構(gòu)酶 2022/3/13 79 青霉素?;福? 這是在 醫(yī)藥工業(yè)上廣泛應(yīng)用的一種固定化酶 。 可用多種方法固定化 。 1973年已用于工業(yè)化生產(chǎn) , 用于制造各種半合成青霉素和頭孢霉素 。 用同一種固定化青霉素?;?, 只要改變 pH等條件 , 就既可以催化青霉素或頭孢霉素水解生成 6氨基青霉烷酸 (6APA)或 7氨基頭孢霉烷酸 (7ACA), 也可以催化 6APA或 7ACA與其他的羧酸衍生物進(jìn)行反應(yīng) , 以 合成新的具有不同側(cè)鍵基團(tuán)的青霉素或頭孢霉素 。 2022/3/13 80 ① 水凈化 : 20世紀(jì) 70~ 80年代,固定化酶已被用于水和空氣的凈化。法國工業(yè)研究所積極開展利用固定化酶處理工業(yè)廢水的研究,將能處理廢水的酶制成固定化酶。處理靜止廢水時(shí)直接用酶布或酶片;處理流動廢水時(shí)根據(jù)廢水所含污物的種類和數(shù)量,確定玻璃酶柱或塑料酶柱的高度和內(nèi)徑,采用多酶酶柱或單一酶柱。 2022/3/13 81 b. 食品工業(yè)廢水 將固定化蛋白酶應(yīng)用于糧食加工廢水的預(yù)處理,其后續(xù)工藝可以采用任何一種生物處理法。因?yàn)楣潭ɑ鞍酌敢褜U水中不易生化降解的大分子轉(zhuǎn)化為易于生物降解的小分子,大大提高了廢水的可生化性。固定化蛋白酶穩(wěn)定、可重復(fù)使用的特點(diǎn),使得將酶應(yīng)用于廢水處理成為一種經(jīng)濟(jì)可行的方法,具有良好的發(fā)展前景。 2022/3/13 82 ② 環(huán)境監(jiān)測 Ⅰ 、早在 50年代末, Weiss等就用魚腦乙酚膽堿酶活力受抑制程度來監(jiān)測水中極低濃度的有機(jī)磷農(nóng)藥。 Ⅱ 、最新研究發(fā)現(xiàn)以蛋白磷酸酶活力來檢測微囊藻毒素量,最低檢出限量可達(dá) mg/L,靈敏度極高,可用來監(jiān)測水體的富營養(yǎng)化。 Ⅲ 、利用固定化酶可以檢測有機(jī)磷、有機(jī)氯農(nóng)藥和其他痕劑量的環(huán)境污染物,具有靈敏度高、性能穩(wěn)定,可以連續(xù)測定等優(yōu)點(diǎn)。 2022/3/13 83 ③ 固定化生物膜技術(shù) 當(dāng)微生物吸附到固體表面上形成小菌落并開始以固著方式生活時(shí) , 形成了微生物群體組成的粘狀物 , 即生物膜 ( biofilm) 。 生物膜法兼有活性污泥法與固定細(xì)胞法的優(yōu)點(diǎn) 。 2022/3/13 84 復(fù)習(xí)題 ? 酶分離純化方法的基本原理 ? 酶的固定化方法 ? 舉例說明固定化酶在環(huán)境污染治理中的應(yīng)用
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