【正文】 如仿制復(fù)方制劑（或改劑型）而選擇單方為參比，且規(guī)格不同；未按批件要求選擇參比制劑等。 典型案例： 品種 問題 復(fù)方布洛 復(fù)方布洛芬軟膠囊，按注冊分類 5申報，國內(nèi)有復(fù)方布洛芬片上市，規(guī)格：布洛芬 ，本品申報規(guī)格（ 1）布洛芬 芬軟膠囊 ，（ 2）布洛芬 。本品生物等效性試驗參比制劑選擇單方布洛芬軟膠囊（ 200mg/粒）以及單方對乙酰氨基酚片（ 500mg/片），而未選擇已經(jīng)上市的片劑，導(dǎo)致試驗 結(jié)果無法說明新劑型與原劑型是否生物等效以及臨床是否具有可替換性。 ：如吸收相選點(diǎn)過少，導(dǎo)致第一個點(diǎn)就是 Cmax；消除相取血點(diǎn)不夠，采樣時間不足 3個半衰期，最后一個取樣點(diǎn)的血藥濃度過高，影響等效性評價。與此相關(guān)的還有可能是分析方法靈敏度不夠，延長取血時間后血藥濃度低于定量下限。 案例分析： 品種 問題 更昔洛韋分散片 本品生物等效性試驗設(shè)計中，取血點(diǎn)設(shè)計為服藥前（ 0小時）及服藥后 、 、 1 15小時，從試驗 結(jié)果看，試驗藥和參比制劑的半衰期分別為 177。 177。，其取血時間不足 3個半衰期，從第 15個小時的血藥濃度看， 80％的受試者血藥濃度大于 Cmax的 1/10，以此為基礎(chǔ)的等效性評價可靠性較差。 消旋卡多曲分散片 本品取血點(diǎn)設(shè)計服藥前、服藥后 5min、 10min、 15min、 、 、 1h、 、2h、 3h、 4h、 5h和 6h。采用 HPLCUV方法測定消旋卡多曲的體內(nèi)活性代謝物Thiorphan(TP)血漿濃度。線性范圍為 50ng/ml4000ng/ml，最 低定量濃度為 50ng/ml。原研廠說明書顯示，活性代謝產(chǎn)物的半衰期為 3小時左右，本試驗結(jié)果半衰期也在～ 2小時，而生物樣本取樣僅為 6小時，且最后一點(diǎn)的血藥濃度除個別點(diǎn)外，均大于 Cmax的 1/10，試驗設(shè)計不合理。 本品分析方法的定量下限為 ，而本品試驗藥物和參比制劑的 Cmax分別為177。、 177。，有 4例在最后一個取樣點(diǎn)已無法測到血藥濃度，本方法的靈敏度不能滿足生物樣本的檢測要求。 ：試驗設(shè)計中未對飲食 等進(jìn)行必要的控制，干擾檢測。 典型案例： 品種 問題 枸櫞酸鉀緩釋 枸櫞酸鉀為內(nèi)源性物質(zhì)，在生物等效性研究中應(yīng)對受試者的飲食、運(yùn)動等嚴(yán)格控制，而本研究中對受試者缺少相應(yīng)控制，導(dǎo)致在給藥前的飲食控制期受試者尿中枸櫞酸根排量變異很大，此外，幾乎所有 PK參數(shù)變異都非常大。無法對本品的藥代動力 片 學(xué)特點(diǎn)進(jìn)行評價。 ：主要為口腔崩解片、泡騰片、咀嚼片等未按臨床實(shí)際用藥方法服用。 典型案例： 品種 問題 鹽酸伐昔洛韋泡騰片 試驗設(shè)計存在嚴(yán) 重缺陷，未按泡騰片劑型特點(diǎn)服藥，導(dǎo)致試驗結(jié)果無法評價。 ：主要存在于半衰期較長的藥，如半衰期過長，建議采用平行組設(shè)計。 二、分析方法存在嚴(yán)重問題： 生物樣本檢測方法的建立和驗證是生物等效性研究的重要內(nèi)容之一。應(yīng)參照指導(dǎo)原則中對方法學(xué)的相關(guān)要求開展相應(yīng)的研究，并提供方法學(xué)驗證的資料。在多種方法可供選擇時，應(yīng)使用更為穩(wěn)定、專屬、靈敏的方法。 ：分析方法的特異性應(yīng)能夠滿足測定要求。 ：分析方法的精密度和準(zhǔn)確 度應(yīng)能滿足指導(dǎo)原則的最低要求，保證試驗結(jié)果的可靠性。 ：標(biāo)準(zhǔn)曲線高低濃度范圍為定量范圍，在定量范圍內(nèi)濃度測定結(jié)果應(yīng)達(dá)到試驗要求的精密度和準(zhǔn)確度。 ：分析方法的定量下限應(yīng)滿足測定 3～ 5 個消除半衰期時樣品中的藥物濃度或檢測出 Cmax 的 1／ 10～ 1／ 20 時的藥物濃度。 ：應(yīng)根據(jù)具體情況，對含藥生物樣品在室溫、冰凍或凍融條件下以及不同存放時間進(jìn)行穩(wěn)定性考察，以確定生物樣品的存放條件和時間。還應(yīng) 注意考察儲備液的穩(wěn)定性以及樣品處理 后的溶液中分析物的穩(wěn)定性，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。 ：應(yīng)考察高、中、低 3 個濃度的提取回收率，其結(jié)果應(yīng)當(dāng)精密和可重現(xiàn)。 在過渡期品種集中審評中，方法學(xué)方面存在的問題最為突出，具體表現(xiàn)在以下幾個方面： 1）檢測物的選擇：在原型藥物半衰期較長且可檢測的情況下未檢測原型藥物，而僅檢測代謝物，增加了評價的可變因素。 典型案例： 品種 問題 復(fù)方別嘌醇分散片 生物等效性研究測定物為苯溴馬隆、別嘌醇的代謝產(chǎn)物氧別嘌呤醇。本試驗設(shè)計存在嚴(yán)重缺陷：本復(fù)方中所含別嘌 醇，文獻(xiàn)報道其原型藥的半衰期約 ，同品種試驗所得半衰期約為 1小時，本試驗設(shè)計中僅測定代謝產(chǎn)物氧別嘌醇，不符合生物等效性試驗的要求。 2）檢測方法的特異性存在問題：本次集中審評的品種中，抗生素類藥物以微生物法進(jìn)行血樣分析，由于無法分清原型藥與活性代謝產(chǎn)物，特異性存在問題而不能通過審評（同時微生物法的靈敏度、準(zhǔn)確性也較其他方法誤差大）。 典型案例： 品種 問題 阿奇霉素膠囊 阿奇霉素分散片 生物等效性試驗采用微生物法，其方法的靈敏度、專屬性不能滿足生物樣本的檢測要求，導(dǎo)致試驗 結(jié)果不可靠。 3）標(biāo)準(zhǔn)曲線與定量下限：如標(biāo)準(zhǔn)曲線上限過高，導(dǎo)致曲線斜率發(fā)生變化；定量下限過高，靈敏度差，導(dǎo)致后面的多個取血點(diǎn)不能檢出血藥濃度，分析方法不能滿足檢測要求。 典型案例： 品種 問題 消旋卡多曲分散片 見 “取血時間設(shè)計不合理 ”案例分析 更昔洛韋分散片 采用高效液相色譜紫外檢測法測定血漿樣品中的濃度，本方法的線性范圍是，定量下限為 ，而試驗制劑和參比制劑的 Cmax分別為177。 177。，本檢測 方法的靈敏度較差，僅能檢測到用藥后 18小時，不足 3個半衰期，因此其生物等效性試驗結(jié)果無法評價。 4）穩(wěn)定性考察：雖然本次審評中沒有單純由于穩(wěn)定性考察不全面或不規(guī)范而不批準(zhǔn)的品種，但審評中發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定性考察存在問題較多，如考察時間不夠、樣本量不夠、方法不規(guī)范等。 典型案例： 品種 問題 曲克蘆丁滴丸 生物等效性試驗中，穩(wěn)定性考察為單樣本，不滿足要求；冷凍條件考察 7天，與樣品檢測時間不相關(guān)；缺方法回收率結(jié)果。生物樣本檢測方法學(xué)驗證不充分，分析方法的可行性無法判斷。 5）方法 學(xué)驗證問題：方法學(xué)驗證已經(jīng)顯示該分析方法存在問題，但仍采用。 典型案例： 品種 問題 奧美 本品生物等效性試驗，方法學(xué)驗證顯示，高濃度組日間變異已經(jīng)超過 15％，說明 拉唑腸溶片 該方法的準(zhǔn)確性較差，結(jié)果：試驗藥和參比制劑的 Cmax(ng/ml)分別為177。 177。，其 SD遠(yuǎn)大于均值，該分析方法不能滿足生物樣本檢測的要求。 三、 分析圖譜存在嚴(yán)重問題： 本次生物等效性審評要求申報單位提供 20％受試者生物樣本檢測的圖譜和相應(yīng)分析批的標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控圖譜，從審評中發(fā)現(xiàn)圖譜存在以下主要問題： ：提供的圖譜缺少相應(yīng)分析批的標(biāo)準(zhǔn)曲線和 /或質(zhì)控樣本的圖譜；有些品種提供的圖譜不是 20％受試者兩個周期試驗的所有圖譜，而是 40％受試者一個周期的圖譜。 ，無法溯源：有相當(dāng)數(shù)量的品種提供的圖譜缺少必要的信息，如圖譜缺少明確標(biāo)示（不清楚所對應(yīng)的樣品）、進(jìn)樣時間、修改時間、報告日期、峰面積的積分線、相應(yīng)濃度等，導(dǎo)致試驗結(jié)果的真實(shí)性無法評價、原始數(shù)據(jù)無法溯源等。 供圖譜的真實(shí)性存在問題：突出表現(xiàn)為圖譜的后期制作（以 office進(jìn)行編輯）、一圖多用、進(jìn)樣時間矛盾等。 四、 試驗結(jié)果無法評價： 對試驗制劑是否與參比制劑生物等效的評價應(yīng)基于完整、可靠的試驗數(shù)據(jù)和正確的統(tǒng)計分析方法。應(yīng)提供完整可靠的試驗數(shù)據(jù)，并采用正確的方法進(jìn)行統(tǒng)計分析。 1. 提供的試驗數(shù)據(jù)的完整性： 應(yīng)提供每個受試者、每個時間點(diǎn)的血藥濃度值（受試制劑和參比制劑） 應(yīng)提供每一時間點(diǎn)的平均血藥濃度、標(biāo)準(zhǔn)差 提供每 個受試者的血藥濃度－時間曲線、平均血藥濃度－時間曲線和各時間點(diǎn)的血藥濃度標(biāo)準(zhǔn)差 提供必要的藥代動力學(xué)參數(shù)： Cmax 、 Tmax、 AUC0→t 、 AUC0→∞ 數(shù)據(jù)處理：對試驗所得數(shù)據(jù)處理應(yīng)采用正確統(tǒng)計和分析方法。 2. 試驗結(jié)果的評價： 對生物等效性試驗的結(jié)果的評價，不但是整個試驗的結(jié)論，同時是對試驗制劑可否在臨床上替代參比制劑的評價，因此應(yīng)滿足指導(dǎo)原則的相關(guān)要求。 對試驗結(jié)果的評價源于試驗數(shù)據(jù)的可靠性和完整性，本次審評中，試驗數(shù)據(jù)的 問題有如下幾個方面： ：主要表現(xiàn)在對用藥前的取血點(diǎn)未進(jìn)行檢測，而直接以 0表示；對低于定量下限的數(shù)據(jù)計為實(shí)測值（或 0），導(dǎo)致數(shù)據(jù)處理的偏差；缺少應(yīng)該提供的藥代動力學(xué)參數(shù)等。 典型案例： 品種 問題 某品種 生物等效性試驗中，該化合物的半衰期 40小時，試驗采用雙交叉設(shè)計，試驗的清洗期僅為一周，而用藥前取血點(diǎn)的血樣未測定，因此無法判斷清洗期是否足夠，第二周期的血藥濃度是否受到影響。 ：主要表現(xiàn)在由于提供的生物樣本檢測圖譜的真實(shí) 性和可溯源性存在的問題，導(dǎo)致試驗數(shù)據(jù)的可靠性無法評價。 ，導(dǎo)致試驗的結(jié)論不可靠。同時缺少對某些參數(shù)的等效性評價，而使試驗的結(jié)果分析不具有系統(tǒng)性。 如：未對 Tmax進(jìn)行統(tǒng)計分析 采用置信區(qū)間的方法對 Tmax進(jìn)行分析 五、規(guī)范性問題： 整體生物等效性試驗以及試驗報告都存在大量的規(guī)范性問題，雖然并不構(gòu)成否定項，但由于規(guī)范性問題而對評價帶來很大的障礙，包括試驗起止日期的合理解釋、分析圖譜應(yīng)包括的信息、試驗數(shù)據(jù)的表達(dá)、統(tǒng)計分析結(jié)果的表 達(dá)等。