【正文】 譜 （ 附錄 VI E） 測(cè)定 。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 改良聚乙二醇毛細(xì)管柱 （ 柱長 30m，內(nèi)徑 ， 膜厚度 ） ， 柱溫 110℃ ；進(jìn)樣口溫度為 250℃ ；檢測(cè)器溫度為 250℃ ；分流比為 25:1。 理論板數(shù)按萘峰計(jì)算應(yīng)不低于 5000。 校正因子測(cè)定 精密稱取萘適量 ， 加環(huán)已烷制成每 1ml含 15mg的溶液 ，作為內(nèi)標(biāo)溶液 。 另取薄荷腦對(duì)照品 75mg， 精密稱定 ， 置 5ml量瓶中 ， 加環(huán)已烷稀釋至刻度 ， 搖勻 。 精密量取 1ml， 置 20ml量瓶中 ， 精密加入內(nèi)標(biāo)溶液 1ml， 加環(huán)已烷至刻度 ， 搖勻 。 吸取 1μ l， 注入氣相色譜儀 ， 計(jì)算校正因子 。 測(cè)定法 精密量取本品 50ml， 照揮發(fā)油測(cè)定法 （ 附錄 X D） 試驗(yàn) ， ……(加環(huán)已烷回流提取 ） ， 合并環(huán)已烷液 ， 置 20ml量瓶中 ， 精密加入內(nèi)標(biāo)溶液 1ml， 加環(huán)已烷至刻度 ， 搖勻 。 吸取 1μ l， 注入氣相色譜儀 ， 測(cè)定 ， 即得 。 本品每 1ml含薄荷腦（ C10H20O）應(yīng)不得少于 。 167。 4 常用定量分析方法 高效液相色譜法 分離效能高、分析速度快及應(yīng)用范圍廣 ? 適用于測(cè)定 －揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的高分子化合物及離子型化合物，如蛋白質(zhì)、氨基酸、生物堿、甾體、類脂、核酸、維生素及無機(jī)鹽類 ? 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) 167。 4 常用定量分析方法 高效液相色譜法 ? 實(shí)驗(yàn)條件的選擇 ?色譜柱的選擇 ?流動(dòng)相的選擇 — 優(yōu)質(zhì)純或光譜純，脫氣，過濾（ m） ? 部分含水溶劑： 適用于分離中等極性、弱極性藥物 ? 非水溶劑： 分離疏水性物質(zhì) ? 緩沖溶液： 適用于可溶于水并具可解離特性的化合物，如蛋白質(zhì)、肽及弱酸、弱堿類化合物 。 ?洗脫方式： 等度洗脫與梯度洗脫 ?檢測(cè)器： UVD(紫外 ), FD(熒光 ), ELSD(蒸發(fā)光散射 ), ECD(電化學(xué) ),RID(示差折光 ) 167。 4 常用定量分析方法 高效液相色譜法 雙黃連口服液的含量測(cè)定 （ 反相 HPLC外標(biāo)一點(diǎn)法 ） [含量測(cè)定 ] 黃芩 照高效液相色譜法 （ 附錄 VI D） 測(cè)定 。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇 水 冰醋酸 （ 50:50:1） 為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為 274nm。 理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于 1500。 對(duì)照品溶液的制備 取黃芩苷對(duì)照品適量 ， 精密稱定 ， 加 50%甲醇制成每 1ml含 ， 即得 。 供試品溶液的制備 精密量取本品 1ml， 置 50ml量瓶中 ， 加 50%甲醇適量 ， 超聲處理 20分鐘 ， 放置至室溫 ， 加 50%甲醇稀釋至刻度 ， 搖勻 ， 即得 。 測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各 5ul， 注入液相色譜儀 ， 測(cè)定 ， 即得 。 本品每 1ml含黃芩按黃芩苷 （ C21H18O11） 計(jì) ， 不得少于 。 金銀花 照高效液相色譜法 （ 附錄 VI D） 測(cè)定 。 167。 4 常用定量分析方法 原子吸收分光光度法 工作原理 1） 各種元素的原子結(jié)構(gòu)和外層電子排布不同， 基態(tài) ?第一激發(fā)態(tài) : 躍遷吸收能量不同 ——具有特征性 2） 各種元素的基態(tài) ?第一激發(fā)態(tài) 最易發(fā)生，吸收最強(qiáng)，最靈敏線。特征譜線 (共振線 )。 3） 利用待測(cè)元素的原子蒸氣中基態(tài)原子與共振線吸收之間的關(guān)系來定量分析 。 167。 4 常用定量分析方法 ? 原子化系統(tǒng) —將試樣中離子轉(zhuǎn)變成原子蒸氣。 ?原子化方法 ? 火焰法 ? 無火焰法 —電熱高溫石墨管，激光 ? 冷原子化法 ? 單色器 （色散元件 （ 棱鏡、光柵 ）， 凹凸鏡 、 狹縫等） ? 檢測(cè)系統(tǒng) （光電池、光電倍增管、光敏晶體管 原子吸收光譜儀 ? 銳線光源 —空心陰極燈 167。 4 常用定量分析方法 優(yōu)缺點(diǎn) ? 優(yōu)點(diǎn) ： 原子化程度高，試樣用量少 （ 1～ 100μ L）， 可測(cè)固體及粘稠試樣 ， 靈敏度高，檢測(cè)限 1012 g/L。 ? 缺點(diǎn) ： 精密度差，測(cè)定速度慢，操作不夠簡便，裝置復(fù)雜。 167。 5 含量測(cè)定的方法學(xué)考察 提取條件的考察 ? 提取方式、浸泡時(shí)間、提取時(shí)間等 分析方法的選擇 半月清散劑中紅粉 （ HgO） 的含量測(cè)定 ? F檢驗(yàn) — 精密度 ? t檢驗(yàn) — 準(zhǔn)確度 對(duì)照品的處理及標(biāo)化 ? 含量測(cè)定用 ? 定性鑒別用 → 用兩種洗脫系統(tǒng)進(jìn)行含量標(biāo)化，歸一化法計(jì)算 ? 自制對(duì)照品 → 純度檢查、含量測(cè)定、結(jié)構(gòu)確認(rèn)等 測(cè)定條件的選擇 AAS NH4SCN滴定 167。 5 含量測(cè)定的方法學(xué)考察 工作曲線 ? 確定 線性化范圍 (回歸方程 ) ? 相關(guān)系數(shù) r （ HPLC法 ≥ ； TLC法 ≥ ） 穩(wěn)定性 試驗(yàn) —確定最佳的測(cè)定時(shí)間 精密度 考察 ? 相同方法對(duì)同一試樣多次測(cè)定 → RSD 重復(fù)性試驗(yàn) ? 同一分析者在同一條件下對(duì)同一批樣品的多次測(cè)定 （ n=5） 再現(xiàn)性試驗(yàn) ? 不同分析者或不同實(shí)驗(yàn)室在不同實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)同一批樣品的多次測(cè)定 167。 5 含量測(cè)定的方法學(xué)考察 靈敏度 檢測(cè)限 or 空白試驗(yàn) 準(zhǔn)確度考察（ 回收率 ） 樣品含量測(cè)定及數(shù)據(jù)處理 CRS???SND ??SND ??%C BA%R ??????StX f,p???*習(xí)題： 作用發(fā)到： 前處理的一般步驟是什么？ 樣品的提取有哪些方法？ 中藥制劑含量測(cè)定的定義是什么？其測(cè)定方法可分為哪幾類？ 中藥制劑顯微鑒別的定義是什么？哪些中藥制劑適合用顯微鑒別方法？ 分別簡述一般化學(xué)反應(yīng)法的定義和特點(diǎn)。 什么是中藥炮制？ *注 ： 作用發(fā)到： 下節(jié)課的內(nèi)容： 中藥制劑中各類化學(xué)成分分析 再 見 RSD即 Relative Standard Deviation.叫 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 ，也稱變異系數(shù) (CV)。 RSD=標(biāo)準(zhǔn)差 /平均值 *100% 常用它表示精密度 返回 軟膏劑（霜?jiǎng)┗|(zhì)處方 硬脂酸、十八醇和白凡士林各 3克；司盤 60：；吐溫 80： ；液體石蠟： 5克；甘油： 10克；水： 25克