【正文】 譜 （ 附錄 VI E） 測定 。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 改良聚乙二醇毛細管柱 （ 柱長 30m，內(nèi)徑 ， 膜厚度 ） ， 柱溫 110℃ ；進樣口溫度為 250℃ ；檢測器溫度為 250℃ ；分流比為 25:1。 理論板數(shù)按萘峰計算應不低于 5000。 校正因子測定 精密稱取萘適量 ， 加環(huán)已烷制成每 1ml含 15mg的溶液 ，作為內(nèi)標溶液 。 另取薄荷腦對照品 75mg， 精密稱定 ， 置 5ml量瓶中 ， 加環(huán)已烷稀釋至刻度 ， 搖勻 。 精密量取 1ml， 置 20ml量瓶中 ， 精密加入內(nèi)標溶液 1ml， 加環(huán)已烷至刻度 ， 搖勻 。 吸取 1μ l， 注入氣相色譜儀 ， 計算校正因子 。 測定法 精密量取本品 50ml， 照揮發(fā)油測定法 （ 附錄 X D） 試驗 ， ……(加環(huán)已烷回流提取 ） ， 合并環(huán)已烷液 ， 置 20ml量瓶中 ， 精密加入內(nèi)標溶液 1ml， 加環(huán)已烷至刻度 ， 搖勻 。 吸取 1μ l， 注入氣相色譜儀 ， 測定 ， 即得 。 本品每 1ml含薄荷腦（ C10H20O）應不得少于 。 167。 4 常用定量分析方法 高效液相色譜法 分離效能高、分析速度快及應用范圍廣 ? 適用于測定 －揮發(fā)性低、熱穩(wěn)定性差、分子量大的高分子化合物及離子型化合物，如蛋白質(zhì)、氨基酸、生物堿、甾體、類脂、核酸、維生素及無機鹽類 ? 系統(tǒng)適應性試驗 167。 4 常用定量分析方法 高效液相色譜法 ? 實驗條件的選擇 ?色譜柱的選擇 ?流動相的選擇 — 優(yōu)質(zhì)純或光譜純，脫氣，過濾（ m） ? 部分含水溶劑： 適用于分離中等極性、弱極性藥物 ? 非水溶劑： 分離疏水性物質(zhì) ? 緩沖溶液： 適用于可溶于水并具可解離特性的化合物，如蛋白質(zhì)、肽及弱酸、弱堿類化合物 。 ?洗脫方式： 等度洗脫與梯度洗脫 ?檢測器： UVD(紫外 ), FD(熒光 ), ELSD(蒸發(fā)光散射 ), ECD(電化學 ),RID(示差折光 ) 167。 4 常用定量分析方法 高效液相色譜法 雙黃連口服液的含量測定 （ 反相 HPLC外標一點法 ） [含量測定 ] 黃芩 照高效液相色譜法 （ 附錄 VI D） 測定 。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇 水 冰醋酸 （ 50:50:1） 為流動相；檢測波長為 274nm。 理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應不低于 1500。 對照品溶液的制備 取黃芩苷對照品適量 ， 精密稱定 ， 加 50%甲醇制成每 1ml含 ， 即得 。 供試品溶液的制備 精密量取本品 1ml， 置 50ml量瓶中 ， 加 50%甲醇適量 ， 超聲處理 20分鐘 ， 放置至室溫 ， 加 50%甲醇稀釋至刻度 ， 搖勻 ， 即得 。 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 5ul， 注入液相色譜儀 ， 測定 ， 即得 。 本品每 1ml含黃芩按黃芩苷 （ C21H18O11） 計 ， 不得少于 。 金銀花 照高效液相色譜法 （ 附錄 VI D） 測定 。 167。 4 常用定量分析方法 原子吸收分光光度法 工作原理 1） 各種元素的原子結(jié)構(gòu)和外層電子排布不同， 基態(tài) ?第一激發(fā)態(tài) : 躍遷吸收能量不同 ——具有特征性 2） 各種元素的基態(tài) ?第一激發(fā)態(tài) 最易發(fā)生，吸收最強，最靈敏線。特征譜線 (共振線 )。 3） 利用待測元素的原子蒸氣中基態(tài)原子與共振線吸收之間的關(guān)系來定量分析 。 167。 4 常用定量分析方法 ? 原子化系統(tǒng) —將試樣中離子轉(zhuǎn)變成原子蒸氣。 ?原子化方法 ? 火焰法 ? 無火焰法 —電熱高溫石墨管，激光 ? 冷原子化法 ? 單色器 （色散元件 （ 棱鏡、光柵 ）， 凹凸鏡 、 狹縫等） ? 檢測系統(tǒng) （光電池、光電倍增管、光敏晶體管 原子吸收光譜儀 ? 銳線光源 —空心陰極燈 167。 4 常用定量分析方法 優(yōu)缺點 ? 優(yōu)點 ： 原子化程度高，試樣用量少 （ 1～ 100μ L）， 可測固體及粘稠試樣 ， 靈敏度高，檢測限 1012 g/L。 ? 缺點 ： 精密度差，測定速度慢，操作不夠簡便，裝置復雜。 167。 5 含量測定的方法學考察 提取條件的考察 ? 提取方式、浸泡時間、提取時間等 分析方法的選擇 半月清散劑中紅粉 （ HgO） 的含量測定 ? F檢驗 — 精密度 ? t檢驗 — 準確度 對照品的處理及標化 ? 含量測定用 ? 定性鑒別用 → 用兩種洗脫系統(tǒng)進行含量標化，歸一化法計算 ? 自制對照品 → 純度檢查、含量測定、結(jié)構(gòu)確認等 測定條件的選擇 AAS NH4SCN滴定 167。 5 含量測定的方法學考察 工作曲線 ? 確定 線性化范圍 (回歸方程 ) ? 相關(guān)系數(shù) r （ HPLC法 ≥ ； TLC法 ≥ ） 穩(wěn)定性 試驗 —確定最佳的測定時間 精密度 考察 ? 相同方法對同一試樣多次測定 → RSD 重復性試驗 ? 同一分析者在同一條件下對同一批樣品的多次測定 （ n=5） 再現(xiàn)性試驗 ? 不同分析者或不同實驗室在不同實驗條件下對同一批樣品的多次測定 167。 5 含量測定的方法學考察 靈敏度 檢測限 or 空白試驗 準確度考察（ 回收率 ） 樣品含量測定及數(shù)據(jù)處理 CRS???SND ??SND ??%C BA%R ??????StX f,p???*習題： 作用發(fā)到： 前處理的一般步驟是什么？ 樣品的提取有哪些方法？ 中藥制劑含量測定的定義是什么？其測定方法可分為哪幾類？ 中藥制劑顯微鑒別的定義是什么？哪些中藥制劑適合用顯微鑒別方法？ 分別簡述一般化學反應法的定義和特點。 什么是中藥炮制？ *注 ： 作用發(fā)到： 下節(jié)課的內(nèi)容： 中藥制劑中各類化學成分分析 再 見 RSD即 Relative Standard Deviation.叫 相對標準偏差 ，也稱變異系數(shù) (CV)。 RSD=標準差 /平均值 *100% 常用它表示精密度 返回 軟膏劑（霜劑）基質(zhì)處方 硬脂酸、十八醇和白凡士林各 3克；司盤 60：；吐溫 80： ；液體石蠟： 5克；甘油： 10克；水： 25克