酶促動(dòng)力學(xué)-生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)-資料下載頁(yè)
2025-01-06 15:52本頁(yè)面
【正文】 表觀 Km 表觀 Vm ?雙倒數(shù)作圖 斜率 縱軸截距 橫軸截距 Km Vm Km/Vm 1/Vm 1/Km E Km(1+[I]/Ki) ? Vm Km(1+[I]/Ki)/Vm ? 1/Vm 1/Km(1+[I]/Ki) ? E、 ES Km Vm/(1+[I]/Ki) ? Km(1+[I]/Ki)/Vm ? (1+[I]/Ki)/Vm ? 1/Km ES Km/(1+[I]/Ki) ? Vm/(1+[I]/Ki) ? Km/Vm (1+[I]/Ki)/Vm ? (1+[I]/Ki)/Km ? 酶的分類 氧化還原酶（ oxidoreductase） 轉(zhuǎn)移酶（ transferase） 水解酶（ hydrolase） 裂解酶（或裂合酶 lyase） 異構(gòu)酶（ isomerase） 合成酶（ synthease）或連接酶（ ligase） 1. 加入酶液立即計(jì)時(shí) ， 迅速混勻置 37℃ 水浴 15min。 注意：酶促反應(yīng)開始 ， 從加入酶液起計(jì)時(shí)至下一步加入堿性溶液停止反應(yīng) ， 各管反應(yīng)時(shí)間應(yīng)準(zhǔn)確一致 ， 均為 15分鐘 。 2. 保溫后各管立即加入 NaOH溶液 ， 快速混勻 ， 防止局部濃度過高 。 3. 各管混勻之后再 分別加入 % %K3Fe（ CN） ， 混旋儀充分振蕩混勻 ， 使顯色完全 。 室溫放置 10min后以 6號(hào)管校正零點(diǎn) ， 在分光光度計(jì)中比色(λ=510nm) 注意：必須立即混勻，否則顯色不完全。 注：表 1～表 3中，基質(zhì)液即底物液（磷酸苯二鈉） 表 1 表 2 以下操作同表 1步聚中 步 表 3 以下操作同表 1步聚中 步 ? 拓展 可通過以后要學(xué)習(xí)的實(shí)驗(yàn)，開展酶的分離，純化，理化特性分析研究。 純化酶可進(jìn)行結(jié)構(gòu)、序列分析。 可通過修飾等方法掌握酶的活性中心。 可進(jìn)行酶的細(xì)胞化學(xué)定位。 可進(jìn)行同功酶分析，了解不同物種、品種、品系的遺傳性差異。
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