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酶促動力學-生物化學實驗-資料下載頁

2025-01-06 15:52本頁面
  

【正文】 表觀 Km 表觀 Vm ?雙倒數(shù)作圖 斜率 縱軸截距 橫軸截距 Km Vm Km/Vm 1/Vm 1/Km E Km(1+[I]/Ki) ? Vm Km(1+[I]/Ki)/Vm ? 1/Vm 1/Km(1+[I]/Ki) ? E、 ES Km Vm/(1+[I]/Ki) ? Km(1+[I]/Ki)/Vm ? (1+[I]/Ki)/Vm ? 1/Km ES Km/(1+[I]/Ki) ? Vm/(1+[I]/Ki) ? Km/Vm (1+[I]/Ki)/Vm ? (1+[I]/Ki)/Km ? 酶的分類 氧化還原酶( oxidoreductase) 轉移酶( transferase) 水解酶( hydrolase) 裂解酶(或裂合酶 lyase) 異構酶( isomerase) 合成酶( synthease)或連接酶( ligase) 1. 加入酶液立即計時 , 迅速混勻置 37℃ 水浴 15min。 注意:酶促反應開始 , 從加入酶液起計時至下一步加入堿性溶液停止反應 , 各管反應時間應準確一致 , 均為 15分鐘 。 2. 保溫后各管立即加入 NaOH溶液 , 快速混勻 , 防止局部濃度過高 。 3. 各管混勻之后再 分別加入 % %K3Fe( CN) , 混旋儀充分振蕩混勻 , 使顯色完全 。 室溫放置 10min后以 6號管校正零點 , 在分光光度計中比色(λ=510nm) 注意:必須立即混勻,否則顯色不完全。 注:表 1~表 3中,基質液即底物液(磷酸苯二鈉) 表 1 表 2 以下操作同表 1步聚中 步 表 3 以下操作同表 1步聚中 步 ? 拓展 可通過以后要學習的實驗,開展酶的分離,純化,理化特性分析研究。 純化酶可進行結構、序列分析。 可通過修飾等方法掌握酶的活性中心。 可進行酶的細胞化學定位。 可進行同功酶分析,了解不同物種、品種、品系的遺傳性差異。
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