【正文】
應(yīng)速度的影響 酶的最適 pH: 酶催化活性最高時的 pH。 不可逆抑制( irreversible inhibition) 抑制劑與酶的必需基團(tuán)以牢固的共價鍵結(jié)合 , 使酶喪失活性 , 不能用透析超濾等物理方法除去抑制劑使酶恢復(fù)活性 . SH S E + Hg2+ E Hg + 2H+ SH S SH Cl S E + AsCH=CHCl E AsCH=CHCl + 2HCl SH Cl S 巰基酶 路易士氣 例 1: 巰基酶的抑制 可逆抑制 (reversible inhibition) 抑制劑與酶以非共價鍵疏松結(jié)合引起酶活性的降低活喪失 , 結(jié)合是可逆的 , 能夠通過透析、超濾等物理方法使酶恢復(fù)活性。 ? 非競爭性抑制作用過程 : S S E E E E + P S E S I I I I ?非競爭性抑制的動力學(xué)方程 : 1v = Km Vmax (1+ ) + [I]Ki 1 [S] 1 Vmax ( 1+ ) [I]Ki ?非競爭性抑制的特征曲線: 1v 正常 ? [I] 1 [S] 1 Km 1 Vmax (1+ ) [I]Ki ?非競爭性抑制的特點(diǎn): I與 S分子結(jié)構(gòu)不同; Vmax 減小,表觀 Km不變; 抑制程度取決于 [I]大小。 2. 保溫后各管立即加入 NaOH溶液 , 快速混勻 , 防止局部濃度過高 。 純化酶可進(jìn)行結(jié)構(gòu)、序列分析。