章酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)教學(xué)用-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 始底物濃度之用去很小部分底物濃度 [S]可看成是 [S0] 。穩(wěn)態(tài)下，當(dāng)K2K1時(shí)，則 Km= K1/K1 =Ks ， 因此平衡態(tài)可以看成是穩(wěn)態(tài)的一個(gè)特例 (二 ) 米 曼氏方程所確定的圖形是一直角雙曲線 ][][m ax0 SKSVvm ??以初始速率作為初始底物濃度 [S]的函數(shù)所做的底物飽和曲線，也稱米 曼氏作圖或米 曼氏曲線 將實(shí)驗(yàn)測(cè)定的米 曼氏曲線的坐標(biāo)作平移，并用新坐標(biāo)系 (x， y) 表示舊坐標(biāo)系 (v0， [S])，米 曼氏方程可以轉(zhuǎn)變?yōu)? xy = Km 其曲線為以坐標(biāo)軸 (x， y)為漸近線的直角或等軸或等邊雙曲線 2maxV從米 曼氏方程或其曲線可以看出三種情況： ][][m ax0 SKSVvm ??mm KSVvKS ][][][ m a x0 ??? ，當(dāng)m a x0m ]K[][ VvS ??? 時(shí)，當(dāng)mm KSVvVvKS ???? ][2m ax2][][ 0m a x0 時(shí)，或時(shí)，當(dāng)(三 ) 米一曼氏動(dòng)力學(xué)參數(shù)的意義 1. KM 的意義 : 真實(shí)解離常數(shù)和表觀解離常數(shù) 2. Kcat 的意義 : 催化常數(shù)或轉(zhuǎn)換數(shù) 3. Kact/KM 的意義 : 催化效率指數(shù)或?qū)Ｒ恍猿?shù) ① 米氏常數(shù) KM是 v0=1/2 Vmax時(shí)的底物濃度。此時(shí)， KM 的意義是真實(shí)解離常數(shù)，代表 ES復(fù)合體中酶對(duì)底物的親和力大小， 但是這種意義對(duì)大多數(shù)酶是不適用的。 以胰凝乳蛋白酶催化酯和酰胺類水解為例： 這里 , EPEPESSE KKK s ?? ??? ??? ??? 232P1 MKESSE ?? ][]][[323][][]][[KKKKEPESSES ???為了某些用途 ,KM可以作為表觀解離常數(shù)來(lái)處理。 ② 判斷酶的專一性和天然底物： KM最小的底物為最適或天然底物。 已知 [S]求 V ⑤ 判斷某一代謝反應(yīng)的方向和途徑 Km的應(yīng)用 2. Kcat 的意義：催化常數(shù)或轉(zhuǎn)換數(shù) PEEPESSEPEESSEKKKKK?? ??? ??? ????? ??? ???32121K1 K2 K1 K2 限速步驟速率常數(shù) K3 限速步驟限速常數(shù) 需要提出一個(gè)更通用的速率常數(shù)，催化常數(shù)， Kcat，用來(lái)描述任一酶促反應(yīng)在飽和時(shí)的限制速率 如果一個(gè)多步驟的反應(yīng) ,其中一步明顯是限速的 ,則該步驟的速率常數(shù)就是 Kcat， K2和 K3。轉(zhuǎn)換數(shù)也稱為酶的分子活力 (molecular activity)或催化中心活力。L)； ? Kcat/KM 可作為在遠(yuǎn)低于飽和量的底物濃度下酶的催化效率指數(shù)。 當(dāng) [S]Km時(shí)，大多數(shù)酶處于游離形式 [E] ≈[Et]: 1122/ kkkkKkMc a t ??因此 : k1存在一個(gè)上限，取決于酶與底物在水溶液中的碰撞頻率。酶的催化效率不能超過(guò)此極限范圍。 只有當(dāng) [A]、 [B]都達(dá)到使酶飽和時(shí)，測(cè)得的 Vmax才是雙底物反應(yīng)的真正最大速率 固定 [B]、改變 [A] 固定 [A]、改變 [B] B K [B] V A K [A] V Q P B A B M B max 0 A M A max 0 ? ? ? ? ? ? ? ? ? v v 酶 雙底物酶促反應(yīng)有三種機(jī)理： ① 隨機(jī)順序反應(yīng)機(jī)理； ② 有序順序反應(yīng)機(jī)理 (依次反應(yīng) )； 1. 序列 (sequential)或單置換 (singledisplacement)反應(yīng)機(jī)制 該機(jī)制涉及非共價(jià)的三元復(fù)合體，如 AEB和 PEQ的形成。 ? 植物和微生物來(lái)源的酶： pH ～ ； ? 動(dòng)物來(lái)源的酶： pH ～ 。 （二）溫度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響 溫度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響有兩個(gè)方面： ① 提高溫度，加快反應(yīng)速度（ 0～ 40℃ ）； ② 提高溫度，酶變性失活 (60℃ )。 要說(shuō)明的幾個(gè)問(wèn)題： ① 使一些本來(lái)有活性的酶活性進(jìn)一步提高，主要是離子或簡(jiǎn)單有機(jī)化合物； ② 激活酶原，無(wú)活性 → 有活性，可能是離子或蛋白質(zhì)。無(wú)選擇性，涉及整個(gè)三級(jí)結(jié)構(gòu)。 ? 這類抑制可用米 曼氏動(dòng)力學(xué)方程進(jìn)行分析。 競(jìng)爭(zhēng)性抑制： I 只能和 ES結(jié)合，形成 IES三元復(fù)合體。 純非競(jìng)爭(zhēng)性抑制較少遇到，多數(shù)情況是 E與 I的結(jié)合和 E與 S的結(jié)合互有影響 , 被稱為混合型非競(jìng)爭(zhēng)性抑制或混合型抑制。抑制專一性強(qiáng)，經(jīng)酶催化后引起
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