植物蛋白及其分離純化-資料下載頁(yè)
2024-12-08 10:20本頁(yè)面
【正文】 螺旋藻多糖的提取方法 目前國(guó)內(nèi)外提取螺旋藻多糖 ,主要采用稀酸、稀堿、水抽提的方法，因?yàn)槁菪宥嗵侵泻休^多的極性基團(tuán)，易溶于稀酸、稀堿和水。利用上述方法提取的螺旋藻多糖為粗多糖，含有蛋白質(zhì)、無機(jī)鹽等較多的雜質(zhì)，需要進(jìn)一步提純。一般采用 Sevage 法、三氯乙酸法和酶法脫除蛋白質(zhì)。無機(jī)鹽等小分子一般可用透析除去。螺旋藻多糖純化可用纖維素離子交換柱層析和葡聚糖凝膠柱層析法進(jìn)行 。 螺旋藻多糖的純化 DEAE— 纖維素柱層析分析純化 裝柱 將 100gDEAE52干膠用蒸餾水浸泡，使其充分溶脹，用傾瀉法將上浮的細(xì)小顆粒傾去，分別用稀酸稀堿反復(fù)浸泡，用蒸餾水沖洗至中性，將處理好的凝膠浸泡在洗脫液中，關(guān)閉層析柱出水口，并向柱管內(nèi)注入約 1/3柱容積的洗脫夜，然后在攪拌下，將濃漿狀的凝膠連續(xù)地傾入柱內(nèi)，使之自然沉降，待凝膠沉降約 2~3cm后，打開柱的出口，調(diào)節(jié)合適的流速，使凝膠繼續(xù)沉集，待沉集的凝膠上升到離柱的頂端約 2cm處時(shí)停止裝柱，檢查柱內(nèi)凝膠是否均勻，有無“紋路”或氣泡。若層析柱不均一，必須重新裝柱。 裝好柱后用洗脫液平衡 72h。取 10g粗多糖溶于，離心除去不溶物。取上清液沿柱壁小心加到事先用 柱上（ 40cm），進(jìn)樣后選用 脫，流速 3mL/min，按 5mL/管分部收集，用硫酸 蒽酮法跟蹤檢測(cè)峰值，一直洗至無糖檢出為止。然后改，繼續(xù)分部收集，同法跟蹤檢測(cè)多糖峰位。所得溶液減壓濃縮至適當(dāng)體積，扎袋透析去除 NaCl，乙醇沉淀，再依次用乙醚、丙酮洗滌三次，真空冷凍干燥，得初步純化螺旋藻多糖。 DEAE52 纖維素層析純化結(jié)果 將螺旋藻粗多糖經(jīng) DEAE52 柱層析純化，收集到二組糖峰（ PSPⅠ 和 PSPⅡ ，以下均用此表示螺旋藻多糖），分離結(jié)果見圖 12，各得 PSPⅠ 、 PSPⅡ ,得率分別為 %、 %。 PSPⅠ 、 PSPⅡ 為白色粉末。 SephadexG200 柱層析純化 稱取 8gSephadexG200 干凝膠浸入洗脫液中，室溫下放置 72h，使之充分溶脹，在浸泡時(shí)用傾瀉法將上浮的細(xì)小顆粒傾去，浸泡好的凝膠采用自然沉降法裝柱，平衡 72h。取初步純化的螺旋藻多糖 ，溶于 ，離心去不溶物，取上清液上預(yù)先用 SephadexG200 層析柱（ 60cm）用 脫，流速 12mL/h,按 4mL/管收集硫酸 蒽酮法檢測(cè)多糖峰位，將收集液減壓濃縮，扎袋蒸餾水透析 72h，醇析過夜，4000r/min 離心、沉淀，用乙醚、丙酮洗滌三次，真空冷凍干燥，得螺旋藻多糖精品（白色粉末） 。 Sephadex G— 200 層析純化結(jié)果 經(jīng)離子交換層析分離的二個(gè)多糖組分 PSPⅠ 、 PSPⅡ再分別經(jīng) Sephadex G200層析進(jìn)一步純化，未再分出新的多糖組分。所得螺旋藻多糖精品均為白色粉末。PSPⅠ 、 PSPⅡ ,得率分別為 %、%。 螺旋藻多糖的提取純化流程圖 ? 螺旋藻的應(yīng)用領(lǐng)域日益廣泛，從最初的保健食品擴(kuò)大到了醫(yī)藥、精細(xì)化工、水產(chǎn)養(yǎng)殖等領(lǐng)域。許多國(guó)家包括我國(guó)都在積極研究和開發(fā)利用螺旋藻。如直接添加到各種食品和營(yíng)養(yǎng)保健品中供食用；制成了各種片劑、藥丸和膠囊，治療高血壓、貧血、肥胖等疾病；還有用作添加劑制作各種高檔水產(chǎn)飼料、天然色素和制成香波、面膜及護(hù)膚品等。 ? 大量科學(xué)研究表明螺旋藻具有多種生物活性，可作為治療多種疾病的藥物和輔助藥物。更重要的是螺旋藻具有的無毒性、生長(zhǎng)周期短而速度快、光能轉(zhuǎn)化率高的罕見特點(diǎn)和其在植物界獨(dú)特的地位使得國(guó)內(nèi)外對(duì)它的研究日趨重視。 謝謝！
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1