食品中糖類的測定-資料下載頁
2025-08-11 15:11本頁面
【導讀】糖類的分類及性質(zhì)。食品中可溶性糖類通常是指葡萄糖、果。糖等游離單糖及蔗糖等低聚糖。將樣品磨碎、浸漬成溶液（提取液），溶解→滴定→空白試驗→計算。原理將樣液與一定量過量的堿性酒石。氧化亞銅，經(jīng)過濾，得到氧化亞銅沉淀，解，而三價鐵鹽被定量地還原為亞鐵鹽，加入，加水稀釋至500mL，于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。精制石棉：取石棉先用3mol/L鹽酸浸泡。狀軟纖維，用水浸泡并貯存于玻璃瓶中，即可用于填充古氏坩堝。高錳酸鉀標準溶液：。測定吸取50mL處理后的樣品溶液，于。于燒杯上蓋一表面皿，加。及沉淀，至洗液不呈堿性為止。水，用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解，在加熱條件下，以次甲基藍作為指示劑，鉀鈉銅反應(yīng)，生成紅色的氧化亞銅沉淀，平行操作三次取其平均。樣品溶液必須進行預測。續(xù)滴定工作，提高測定的準確度。①為消除氧化亞銅沉淀對滴定終點觀察的干擾，在。②堿性酒石酸銅甲液和乙液
【正文】 紫外分光光度法 、 染料結(jié)合法 、 水楊酸比色法等 。 下面簡單介紹雙縮脲法 1. 原理 脲 （ 尿素 ） NH2— CO— NH2 加熱至 150~160℃ 時 ，兩分子縮和成雙縮脲 。 雙縮脲能和硫酸銅的堿性溶液生成紫色絡(luò)和物 ， 這種反應(yīng)叫雙縮脲反應(yīng) 。 （ 縮二脲反應(yīng) ） 蛋白質(zhì)分子中含有肽鍵 — CO— NH— 與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似 。 在同樣條件下也有呈色反應(yīng) ， 在一定條件下 ，其顏色深淺與蛋白質(zhì)含量成正比 ， 可用分光光度計來測其吸光度 ， 確定含量 。 （ 560nm） NH2— CO— NH— CO— NH2 + NH3 NH2— CO— NH2 + NH2— CO— NH2 方法特點及應(yīng)用范圍 ? 本法靈敏度較低，但操作簡單快速，故在生物化學領(lǐng)域中測定蛋白質(zhì)含量時常用此法。本法亦適用于豆類、油料、米谷等作物種子及肉類等樣品測定。 4. 氨基酸總量的測定 ?（一）甲醛滴定法 ?（二）茚三酮的比色法 （一）甲醛滴定法 ：氨基酸本身有堿性 — NH2— 基，又有 酸性 — COOH 基，成中性內(nèi)鹽，加入甲醛溶液后，甲醛與 — NH2— 結(jié)合，堿性消失，再用強堿來滴定 — COOH 基。 ? 2．適用范圍：適用于發(fā)酵工業(yè)，如發(fā)酵液中含氮量，其發(fā)酵過程中氮量減少情況及食品中游離氨基酸的測定等。 3．試劑： ① 40%中性甲醛溶液：以百里酚酞作指示劑，用氫氧化鈉將 40%甲醛中和至藍色。 ② %百里酚酞乙醇溶液， ③ %中性紅 50%乙醇溶液， ④ mol/L 氫氧化鈉標準溶液。 4．操作：同時取兩份樣： 一份中加中性紅指示劑，用氫氧化鈉直接滴，中和樣液中其它酸性物質(zhì)。 另一份中加百里酚酞、中性甲醛用 NaOH 滴，中和了樣液中氨基酸的羧基與其它酸性物質(zhì)的總和。 二者之差可計算氨基酸含量 （二）茚三酮的比色法 ? 原理：氨基酸在一定條件下與茚三酮起反應(yīng)，生成藍紫色化合物，可比色定量。 5. 氨基酸的分離與測定 （一）薄層色譜法 （ 二 ） 氨基酸自動分析儀法 （ 三 ） 氣相色譜法 （ 四 ） 高效液相色譜法 （一）薄層色譜法 ? 原理： 取一定量經(jīng)水解的樣品溶液，滴在制好的薄層板上，在溶劑系統(tǒng)中進行雙向上行法展開， 樣品各組分在薄層板上經(jīng)過多次的被吸附、解吸、交換等作用，同一物質(zhì)具有相同的 Rf值，不同成分則有不同的 Rf值，因而各種混合物可達到彼此被分離的目的。然后用茚三酮顯色，與標準氨基酸進行對比，鑒別各種氨基酸種類，從顯色斑點顏色的深淺可以大致確定其含量。 ? Rf = a / b a b 樣點 溶劑前沿 點樣原點 操作方法： ① 薄層板制備 ② 樣品液制備 ③ 點樣 ④ 展開 ⑤ 顯色 （二）氨基酸自動分析儀法 （三）氣相色譜法 （四）高效液相色譜法 ? 本章小結(jié) 重、難點及適用范圍 凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)的過程及注意事項 了解儀器法測定蛋白質(zhì)及氨基酸的方法 下次課做實驗 實驗要求 作業(yè)
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