高中生物專題5課題2多聚酶鏈式反應擴增dna片段課件新人教版選修1(編輯修改稿)
2024-12-23 23:17 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 保留復制原理 ， 合成一條新的與模板 DNA鏈互補的半保留復制鏈 。 重復循環(huán)變性 — 復性 — 延伸三過程 ， 就可獲得更多的 “ 半保留復制鏈 ” ， 而且這種新鏈又成為下次循環(huán)的模板 。 每完成一個循環(huán)需 2～4 min， 2～ 3 h就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍 。 PCR擴增過程中的易錯點 ① PCR過程中無解旋酶 ， 破壞氫鍵需要升高溫度才能打開氫鍵 ， 但此時的溫度還不能破壞磷酸二酯鍵 ， 因此 ， 熱變性后是 DNA單鏈 ， 并未分解成單體 。 ② 復性時只是在引物和 DNA單鏈之間形成氫鍵 ， 兩條單鏈之間并未形成氫鍵 ， 因此復性后 ， 無雙鏈 DNA分子形成 。 三、 PCR的實驗操作 1． 操作步驟 (1)按 PCR反應體系的配方配制所需試劑 。 (2)用微量移液器按照配方在微量離心管中依次加入各組分 。 (3)蓋嚴離心管口的蓋子 ， 用手指輕輕彈擊管壁 。 (4)將微量離心管放在離心機上 ， 離心約 10 s。 (5)將離心管放在 PCR儀上 ， 設置好 PCR儀的循環(huán)程序 。 以上過程可以概括為準備 、 移液 、 混合 、 離心 、 反應五大步 。 2． 實驗結果與分析 (1)實驗中 DNA含量的測定 。 ① 稀釋：取 2 μL PCR反應液 ， 加入 98 μL蒸餾水 ， 即將樣品稀釋了 50
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