高中生物專題11dna重組技術的基本工具課件新人教版選修3(編輯修改稿)
2025-01-09 18:50 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 線兩側的雙鏈 DNA 上的堿基是反向?qū)ΨQ重復排列的。 如GCCG ?? GCCG以中心線為軸，兩側堿基互補對稱； CCAG GG G T CC以AT為軸，兩側堿基互補對稱。 (2)判斷黏性末端或平末端是否由同一種限制酶切割形成的方法是：將黏性末端或平末端之一旋轉(zhuǎn) 180176。 后，看它們是否是完全相同的結構。 (2021棗莊高二檢測 )現(xiàn)有一長度為 1 000個堿基對 (bp)的 DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶 EcoR Ⅰ 酶切后得到的 DNA分子仍是 1 000 bp，用 Kpn Ⅰ 單獨酶切得到 400 bp和 600 bp兩種長度的 DNA分子，用 EcoR Ⅰ 、 Kpn Ⅰ 同時酶切后得到 200 bp和600 bp兩種長度的 DNA分子，該 DNA分子的酶切圖譜正確的是 ( ) 解析：選 D。從題干中 “ 用限制性核酸內(nèi)切酶 EcoR Ⅰ 酶切后得到的 DNA分子仍是 1 000 bp” ，再結合選項中 DNA分子的可能酶切圖譜分析可知，此 DNA分子是環(huán)狀，故 A、 B排除。同理，從 “ 用 Kpn Ⅰ 單獨酶切得到 400 bp和 600 bp兩種長度的 DNA分子 ” ，又可推知圖譜中應有兩個 Kpn Ⅰ 酶切位點，故選 D。 DNA連接酶及相關的比較 1．限制酶與 DNA連接酶的相互作用 2．幾種工具酶作用特點的比較 名稱 作用 參與的生理過程或應用 作用位 點 (如圖 ) DNA連接酶 連接兩個 DNA片段 基因工程 a 限制性核酸內(nèi)切酶 能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開 a 名稱 作用 參與的生理過程或應用 作用位 點 (如圖 ) DNA聚合酶 在脫氧核苷酸鏈上添加單個脫氧核苷酸 DNA的 a 復制解旋酶 使 DNA堿基間的氫鍵斷裂，把兩條螺旋的雙鏈解開 DNA復制 b 特別提醒 有關酶的進一步說明 (1)DNA連接酶無識別的特異性，連接兩個互補末端的 DNA片段間的磷酸二酯鍵，而 DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸加到已有 DNA片段上，且需一條 DNA鏈為模板。 (2)解旋酶打開堿基對之間的氫鍵，但氫鍵是分子間的靜電引力，不需要通過酶的催化形成。 下列有關 DNA連接酶的敘述正確的是 ( ) A． T4DNA連接酶只能將雙鏈 DNA片段互補的黏性末端之間連接起來 B． Ecoli DNA連接酶能將雙鏈 DNA片段平末端之間進行連接 C． DNA連接酶能恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 D． DNA連接酶可連接 DNA雙鏈的氫鍵，使雙鏈延伸 C [解析 ] DNA連接酶能使兩個 DNA片段之間形成磷酸二酯鍵 ,從而將它們連接起來。 Ecoli DNA連接酶只能將雙鏈 DNA片段互補的黏性末端之間連接起來，不能將雙鏈 DNA片段平末端
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