生物：11dna重組技術(shù)的基本工具課件(新人教版選修3)(2)(編輯修改稿)
2025-03-16 10:39 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ）載體 DNA 必須是安全的，不會(huì)對(duì)受體細(xì)胞有害，或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去。 5）載體 DNA分子大小應(yīng)適合，以便提取和體外操作。 （六）模擬操作：重組 DNA分子的模擬操作 注意：這兩條 DNA分子的堿基對(duì)不是隨意亂寫的。 首先，每個(gè) DNA分子上的兩條鏈上的堿基要互補(bǔ)配對(duì)； 第二，每個(gè) DNA分子中每條鏈都存在一個(gè) GAATTC的堿基序列，也就是說(shuō)是 EcoRI限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，并存在 GA的切割位點(diǎn)。 以下是兩種限制酶切割后形成的 DNA片段，試分析： ① GC… ② AATTC… ③ …GC ④ …CTTAA CG… G… …CG …G (1)其中①和 是由一種限制酶切割形成的 末端，兩者要重組成一個(gè) DNA 分子，所用 DNA連接酶通常是 。 （ 2） 和 是由另一種限制酶切割形成的 末端，兩者要形成重組 DNA片段，所用的連接酶通常是 。 實(shí)例 3， 本節(jié)內(nèi)容小結(jié)： ： DNA重組技術(shù)的基本工具： ①限制酶（分子手術(shù)刀）：識(shí)別特定的核苷酸序列并切割兩核苷酸之間的磷酸二酯鍵； ② DNA連接酶（分子縫合針）：連接兩核苷酸之間的磷酸二酯鍵； ③基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體（分子運(yùn)輸車）：最常用的是細(xì)菌質(zhì)粒，還有 λ 噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。 、技巧、規(guī)律總結(jié)： 限制酶切割的是磷酸二酯鍵，而 DNA連接酶連接的正是兩個(gè)斷開此鍵的 DNA片段。“分子運(yùn)輸車”是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體，它具有的若干特點(diǎn)是基因工程鑒定、選擇、表達(dá)的關(guān)鍵，可以說(shuō)，沒有它，目的基因即使進(jìn)入受體細(xì)胞，也難以穩(wěn)定保存，更談不上復(fù)制和表達(dá)。 ： DNA連接酶與 DNA聚合酶根本不是同類酶，其功能特點(diǎn)大不相同，注意其區(qū)別。 DNA聚合酶的異同： 基因工程中所用的連接酶有兩種：從大腸桿菌中分離得到的 Ecoli連接酶、從 T4噬菌體中分
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