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高中生物專題5課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增dna片段課件新人教版選修1-在線瀏覽

2025-01-20 23:17本頁面
  

【正文】 與兩條單鏈 DNA結(jié)合;當(dāng)溫度上升到 72 ℃ (70~ 75 ℃ )時(shí) , 溶液中的四種脫氧核苷酸 (A、 T、 C、 G)在Taq DNA聚合酶的作用下 , 根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的 DNA鏈 , 稱為延伸 。 答案: C 二、 PCR技術(shù)的基本原理 類似于 DNA的天然復(fù)制過程 , 由變性 — 復(fù)性 — 延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成: 1. 模板 DNA的變性 模板 DNA經(jīng)加熱至 95 ℃ 左右一定時(shí)間后 , 使模板 DNA雙鏈或經(jīng) PCR擴(kuò)增形成的 DNA的雙鏈解開 , 使之成為單鏈 ,以便它與引物結(jié)合 , 為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備 。 3. 引物的延伸 DNA模板引物結(jié)合物在 Taq DNA聚合酶的作用下 , 以四種脫氧核苷酸為反應(yīng)原料 , DNA母鏈為模板 , 按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理 , 合成一條新的與模板 DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈 。 每完成一個(gè)循環(huán)需 2~4 min, 2~ 3 h就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍 。 ② 復(fù)性時(shí)只是在引物和 DNA單鏈之間形成氫鍵 , 兩條單鏈之間并未形成氫鍵 , 因此復(fù)性后 , 無雙鏈 DNA分子形成 。 (2)用微量移液器按照配方在微量離心管中依次加入各組分 。 (4)將微量離心管放在離心機(jī)上 , 離心約 10 s。 以上過程可以概括為準(zhǔn)備 、 移液 、 混合 、 離心 、 反應(yīng)五
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