【文章內(nèi)容簡介】
SYNPAT獨有的被命名為HDMSE的質(zhì)譜分析技術(shù)可以將因質(zhì)荷比相同而重疊的多肽分離開,輕而易舉地解決了質(zhì)譜信號疊加的問題,得到準確的交換率數(shù)據(jù)[11,12](圖2)。SYNPAT質(zhì)譜平臺一經(jīng)推出就奪得了2007年P(guān)ITTCON金獎,目前已經(jīng)推出了新一代的SYNAPT G2HDMS、SYNAPT G2S HDMS等型號,并具備ESI、MALDI等多種離子源。除氫氘交換技術(shù)外,SYNAPT質(zhì)譜系統(tǒng)在蛋白質(zhì)復(fù)合體結(jié)構(gòu)研究中也是獨具特色,已有多篇高質(zhì)量應(yīng)用文獻發(fā)表[13,14,15]。 實現(xiàn)氫氘交換質(zhì)譜技術(shù)的第四個關(guān)鍵點,是如何高效分析實驗產(chǎn)生的多時間點及多次重復(fù)帶來的大量數(shù)據(jù)。人工完成如此巨大的信息處理工作,將消耗科學家大量的時間。沃特世氫氘交換質(zhì)譜解決方案所提供的DynamX軟件可以為科學家提供簡便直觀的分析結(jié)果,并包含多種呈現(xiàn)方式。 在某些特殊研究中,要求對蛋白氫氘交換位點做到精確到氨基酸的測量,這是氫氘交換質(zhì)譜研究的又一個難點。在常規(guī)的研究中采用CID(碰撞誘導解離)碎裂模式,可能導致氘原子在多肽內(nèi)重排,而致使不能對發(fā)生交換的具體氨基酸進行精確定位。SYNPAT質(zhì)譜提供的ETD(電子轉(zhuǎn)移解離)碎裂模式可以避免氘原子重排造成的信息混亂,并具有良好的碎裂信號[16]。 沃特世的nanoACQUITY UPLC HDExchange System為氫氘交換質(zhì)譜實驗提供了前所未有的簡易的解決方案,強有力地推動了氫氘交換技術(shù)在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)及動態(tài)變化研究、蛋白質(zhì)相互作用位點發(fā)現(xiàn)、蛋白表位以及活性位點鑒定方面的應(yīng)用,正在成為眾多結(jié)構(gòu)生物學科學家和生物制藥企業(yè)必不可少的工作平臺。參考文獻(1) John R. Engen, Analysis of Protein Conformation and Dynamics by Hydrogen/Deuterium Exchange MS. Anal. Chem. 2009,81, 7870–7875(2) Engen et al. probing protein interactions using HD exchange ms in ms of protein interactions. Edited by Downard, John Wiley amp。 Sons, Inc. 2007, 4561(3) Tiyanont K, Wales TE, AsteAmezaga M, et al. Evidence for increased exposure of the Notch1 metalloprotease cleavage site upon conversion to an activated conform