【文章內(nèi)容簡介】 品越不易溶出，則要求越高！ (4) 試驗(yàn)前應(yīng)首先進(jìn)行原料藥在各 pH值溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性考察，以確保試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確測定。 在日本橙皮書中，就羅列了該藥物在各種溶出介質(zhì)中的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。 如何運(yùn)用溶出曲線剖析原研品的實(shí)施步驟 ? 對原研制劑的剖析 （知己知彼、百戰(zhàn)不殆！）： 對于測定時(shí)間點(diǎn) 普通制劑與腸溶制劑可為 1 4 60、90、 120分鐘，此后每隔 1小時(shí)直至 6小時(shí)止；緩控釋制劑可為 1 4 60、 90、 120分鐘， 1 24小時(shí)。 當(dāng)連續(xù)兩點(diǎn)溶出率均達(dá) 90%（緩控釋制劑為85%）以上、且差值在 5%以內(nèi)時(shí)，試驗(yàn)則可提前結(jié)束。 對于結(jié)束時(shí)間點(diǎn) 在酸性介質(zhì)中最長測定時(shí)間為 2小時(shí)，在其他各 pH值介質(zhì)中普通制劑為 6小時(shí)，緩控釋制劑為 24小時(shí)。 如何運(yùn)用溶出曲線剖析原研品的實(shí)施步驟 ? 對原研制劑的剖析： 裝置與轉(zhuǎn)速 闡述故有錯(cuò)誤理念 片劑：槳板法 /50轉(zhuǎn)起始。 膠囊劑：轉(zhuǎn)籃法 /50轉(zhuǎn)或槳板法 /50轉(zhuǎn)（加沉降藍(lán)）起始。 溶出介質(zhì) 不建議采用小杯法， 一律采用 900ml或 1000ml。 如樣品濃度過低，可采用加大進(jìn)樣量至 50~500μl。 如何運(yùn)用溶出曲線剖析原研品的實(shí)施步驟 ? 對原研制劑的剖析： 試驗(yàn)參數(shù)的放寬 ? 在某溶出介質(zhì)中最終溶出量未達(dá)要求、無法進(jìn)行比較時(shí)，首選加表面活性劑方式：濃度以 ％ (w/v)為起點(diǎn)、按照 5級別逐步增加，不建議采用 %以上濃度。 ? 但當(dāng)精密度差、必須提高精密度才能使溶出均值更具代表性時(shí)，采用提高轉(zhuǎn)速至 75~100轉(zhuǎn)方式。 有機(jī)溶劑：對比剖析時(shí)可加入，但最終擬定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)決不允許添加。 表面活性劑種類 闡述最常用的十二烷基硫酸鈉和吐溫 80的優(yōu)缺點(diǎn) 如何運(yùn)用溶出曲線剖析原研品的實(shí)施步驟 裝置：槳板法 轉(zhuǎn)速： 100轉(zhuǎn) 加入表面活性劑： %濃度 引申至 創(chuàng)新藥 ：在以上條件下，如仍難以有任何一個(gè)介質(zhì)達(dá) 85%以上溶出量，則建議慎重 考慮，放棄研發(fā)?。ㄕf明這是比石頭還堅(jiān)硬的藥物?。? 放寬溶出試驗(yàn)參數(shù)的“最極端條件” ? 原研制劑曲線類型 參比制劑 15分鐘溶出量達(dá) 85%以上時(shí) ? 無需采用 f1和 f2因子比較。 ? 仿制制劑在 15分鐘內(nèi)平均溶出率也達(dá) 85%以上。 ? 強(qiáng)調(diào)：無需關(guān)注 10分鐘溶出量，但需測定。 體外溶出曲線比較的具體操作 ? 原研制劑曲線類型 參比制劑在 15~30分鐘內(nèi)溶出量達(dá) 85%以上時(shí) ? 采用 f2因子比較時(shí)，比較 5或 1 30分鐘三個(gè)時(shí)間點(diǎn)。 ? 對應(yīng)于參比制劑平均溶出率分別為 60％和 85％兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，兩者平均溶出量差均在 177。 15%范圍內(nèi)； 參比制劑在 30分鐘后達(dá) 85%以上時(shí) 采用 f1和 f2因子比較法。 體外溶出曲線比較的具體操作 F1 因 子 計(jì) 算 公 式 Rt和 Tt分別表示兩制劑在第 n個(gè)取樣點(diǎn)的平均累積溶出率。 1 0 01???????n1n1tttttRTRfF2 因 子 計(jì) 算 公 式 Rt和 Tt分別表示兩制劑在第 n個(gè)取樣點(diǎn)的平均累積溶出率。 n對于計(jì)算結(jié)果的貢獻(xiàn)尤甚！ ???????????????????????n)(11 0 05 0 l o gn1i2ttTRf2? 比較時(shí)間點(diǎn)的確定 (1) 溶出量在 85%（緩控釋制劑 80%）以上的時(shí)間點(diǎn)僅能選取一個(gè)。 (2) 普通速釋制劑選取 3~5個(gè)、緩控釋制劑選取 4~6個(gè)時(shí)間點(diǎn)。 因 f2因子計(jì)算結(jié)果有依賴于比較時(shí)間點(diǎn)個(gè)數(shù)的特性（列舉 Excel軟件計(jì)算具體實(shí)例，本人可提供）。 (3) 以上各時(shí)間點(diǎn)溶出量間隔盡可能相近，這也是之前取樣時(shí)間點(diǎn)較為密集的原因所在。 體外溶出曲線比較的具體操作 ? 對于所選時(shí)間點(diǎn)（非測定時(shí)間點(diǎn)）溶出結(jié)果變異系數(shù)的規(guī)定（即精密度的優(yōu)劣評價(jià)均值是否具有代表性） ： 對于 原研制劑 以上所選用的第一時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果變異系數(shù) (RSD)應(yīng)不得過20%，自第二時(shí)間點(diǎn)至最后時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果變異系數(shù) (RSD)均應(yīng)不得過 10%。 若不符合，應(yīng)從儀器適用性予以考慮解決，如 增加轉(zhuǎn)速 。 對于本身變異性較大的品種， n應(yīng)增至 12~18。 對于仿制制劑 如 各時(shí)間點(diǎn) 變異系數(shù)超出規(guī)定，說明 制劑工藝 /處方篩選尚待優(yōu)化、工藝尚未穩(wěn)定。 體外溶出曲線比較的具體操作 f1因子和 f2因子的判定標(biāo)準(zhǔn) f1因子應(yīng)介于 0~15； f2因子應(yīng)至少大于 50。 f2因子 數(shù)值與溶出量差值的關(guān)系 體外溶出曲線比較的具體操作 比較時(shí)間點(diǎn)溶出量平均差異 2% 5% 10% 15% 20% ?2因子臨界值 83 65 50 41 36 若直接觀察，各時(shí)間點(diǎn)差異均在 10%以內(nèi)，則可斷定 ?2因子大于 50。 體外溶出曲線比對的附加要求 ? 當(dāng)某些藥物要求必須飯后服用、且生物等效性試驗(yàn)需分別進(jìn)行“空腹”與“禁食”兩種狀態(tài)下時(shí)，體外溶出度試驗(yàn)則需進(jìn)行溶出介質(zhì)中添加酶液研究。 ? 當(dāng)原研制劑具有延遲釋放現(xiàn)象時(shí) （現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)至少 10%原研品有該現(xiàn)象） ，仿制制劑亦應(yīng)具有該現(xiàn)象；兩者平均延遲時(shí)間差不應(yīng)超出 3~5分鐘，各自減去延遲時(shí)間后再行溶出曲線比較。否則將會出現(xiàn) BE試驗(yàn)中的 tmax不一致結(jié)果。 體外溶出曲線比對的附加要求 ? 為防止劑量傾瀉（ dosedumping）現(xiàn)象發(fā)生 日本 在最具區(qū)分力的溶出介質(zhì)中，還要增加 100或 200 轉(zhuǎn)比較研究；腸溶制劑還要增加 5倍后的比對研究。 美國 在最具區(qū)分力的溶出介質(zhì)中，增加 5%、 20%和 40%有機(jī)溶劑溶出介質(zhì)測定比對。 → 觀測仿制制劑能否像原研制劑那樣收放自如！ 某一原研制劑 添加不同有機(jī)溶劑時(shí)的溶出曲線 某一仿制制劑 添加不同有機(jī)溶劑時(shí)的溶出曲線 紅色為原研制劑；藍(lán)色為仿制制劑 (11) 投樣方式（槳板法） 采用每間隔固定時(shí)間（如 30秒）投樣。 (12) 濾頭 /針筒的取用 建議采用“ 1個(gè)濾頭 /1個(gè)取樣針筒方式”進(jìn)行多樣品抽取。第 1份樣品抽取 10~20ml后，過濾使濾膜吸附飽和，并將濾液沿溶出杯壁緩慢注回，再抽取所需體積（如 HPLC法、1~2ml即可）即可，其后所有樣品無需再棄去初濾液，直接收集。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 (2) 盡可能采用 HPLC法。一者可排除輔料 /薄膜衣 /腸溶衣 /膠囊殼等易對紫外測定產(chǎn)生干擾的情況；二者，由于線性范圍寬，樣品均可直接進(jìn)樣測定，省略了紫外測定要求吸收度值在 ~、樣品需稀釋的繁瑣步驟，大大提高了工作效率。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 (31) 采用短色譜柱 市售有 2~5cm長、粒徑 5~10μm的短分析柱、 (32) 提高流動(dòng)相中有機(jī)相比例。如此，雖然有雜質(zhì)與主成分未能分離的擔(dān)憂，但考慮到樣品已被稀釋 1000倍（溶出介質(zhì)體積通常為 900~1000ml），在此條件下，存在的微量雜質(zhì)響應(yīng)值已微乎其微，即便有所表現(xiàn)，其影響對于結(jié)果而言亦是完全在誤差范圍之內(nèi)，可忽略不計(jì)。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 (4) 柱溫升高至 40~50℃ 。色譜柱最高承受溫度為 80℃ ，在60℃ 以下操作沒有問題。 (5) 流速亦可根據(jù)柱壓提高至 ~。 (6) 進(jìn)樣量可依據(jù)對照品溶液的精密度予以靈活調(diào)節(jié)。100μl~500μl皆可。且對于小規(guī)格制劑，為提高精密度，縮短保留時(shí)間，使色譜峰 “變細(xì)變尖（銳） ”更為重要。 采用10%溶出量驗(yàn)證精密度。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 (7) HPLC法測定時(shí)取樣量 1~2ml即可。對于小規(guī)格難溶性藥物，可考慮取出后無需過濾，直接置于液相小瓶、放置。 因?yàn)樵谌狱c(diǎn)位置處，吸取這么小體積攜帶出輔料的可能性極小，即便有少量存在，靜置后使其沉淀，就不會影響到測定，更不會堵塞色譜柱。 這樣，還可省略去溶出量累積計(jì)算的繁瑣以及過濾時(shí)濾膜吸附的擔(dān)憂，起到“一舉多得、事半功倍”的效果！ 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 (8) 波長可根據(jù)峰面積，酌情選取末端吸收或非最大吸收波長（詳細(xì)講述）。 (9) 如采用超高速液相測定，效果自然更好！但由于色譜柱粒徑較小，樣品液若不過濾，恐堵塞色譜柱，建議試驗(yàn)時(shí)驗(yàn)證后予以酌情考慮。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 (10)現(xiàn)今市場上主流品牌色譜儀皆已具有數(shù)據(jù)批量處理功能和打印功能（多張圖譜結(jié)果打印在一張紙上），將這些功能掌握后一次性編輯好模板，便可大大提高工作效率 。 本人曾在 20分鐘內(nèi)完成 200個(gè)樣品的數(shù)據(jù)處理（得到溶出量），每一溶出量數(shù)據(jù)直接從軟件中拷貝出、粘貼至 Excel軟件中、畫出溶出曲線圖的全部過程。 (11) 如何進(jìn)行累積計(jì)算，演示 Excel軟件具體實(shí)例。 如何準(zhǔn)確、快捷、高效地測定大批量溶出度樣品 “ 日本 薬品品質(zhì)再評価工程” 針對的藥物類型 該理論主要應(yīng)用于生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)里的 Ⅱ 和Ⅳ 類藥物。這些類型的藥物目前又多是較為熱門的藥物：如心血管類、抗高血壓、高血脂類。 截止目前、該項(xiàng)工程基本技術(shù)，共進(jìn)行了 857個(gè)品種的溶出度校準(zhǔn)曲線繪制工作。 ? 參閱“奧美拉唑?qū)嶋H案例”！ “ 日本 薬品品質(zhì)再評価工程” 的流程 ? 一年 3～ 4次，一次 20～ 30個(gè)品種，每次結(jié)束后有專門的書籍出版。 ? 原創(chuàng)廠先行測定本廠產(chǎn)品多條溶出曲線，報(bào)送給國家；經(jīng)專家與該企業(yè)協(xié)商溝通后確定并予以公布“標(biāo)準(zhǔn)四條溶出曲線” 。 ? 仿制廠家根據(jù)該“曲線”，測定本廠品種，并將資料報(bào)送，一致 則通過；如不一致將給一定的時(shí)間進(jìn)行制劑工藝的改進(jìn)。 ? 仍未果、文號撤銷！ 卡馬西平片的四條溶出曲線 槳板法、 75轉(zhuǎn)、在四種介質(zhì)中 ， 5分鐘和30分鐘時(shí)分別取樣測定，限度分別為不得過 60%和不得少于 70%。 我國藥典：槳板法、 150轉(zhuǎn)、 酸 1000ml、 60min、 65％ 公布標(biāo)準(zhǔn)批號的意義 完美制劑的完美表達(dá)！ 尼群地平片的四條溶出曲線 槳板法、 100轉(zhuǎn)、在四種介質(zhì)中（其中均含 ％的吐溫 80） ， 45分鐘，限度均為 70% 中國藥典：槳板法、 100轉(zhuǎn)、 溶液－乙醇 (70:30) 900ml， 60分鐘， 60%。 2022年國家評價(jià)性抽驗(yàn)結(jié)果啟示 (一 ) 原研品 3個(gè)批號 —— 完美制劑的完美表達(dá)！ 2022年國家評價(jià)性抽驗(yàn)結(jié)果啟示 (一 ) 國內(nèi)五家企業(yè)產(chǎn)品 4條溶出曲線！ 2022年國家評價(jià)性抽驗(yàn)結(jié)果啟示 (一 ) 國內(nèi)另六家企業(yè)產(chǎn)品 4條溶出曲線！ 法莫替丁片的四條溶出曲線 “錯(cuò)落有致”與“溶解度”相一致 闡述仿制藥意義！ 奧美拉唑腸溶片四條溶出曲線 pH＝ ～ 研究國內(nèi)幾乎無人去做！國產(chǎn)腸溶衣缺陷所在。 延遲釋放請注意！ 茶 堿 緩 釋 片 槳板法、 50轉(zhuǎn)、在四種介質(zhì)中 完美緩釋制劑的完美表達(dá)！ 硝 苯 地 平 緩 釋 片 完美緩釋制劑的