第十三章發(fā)酵產(chǎn)物的提取與精制方法(編輯修改稿)
2024-08-28 13:30 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 行。 ? （ 3）離子環(huán)境對(duì)蛋白質(zhì)在兩相體系分配的影響 ? 在雙水相聚合物系統(tǒng)中，加入電解質(zhì)時(shí)，其陰陽(yáng)離子在兩相間會(huì)有不同的分配。同時(shí)，由于電中性的約束 , 存在一穿過(guò)相界面的電勢(shì)差 (Donnan 電勢(shì) ) ,它是影響荷電大分子如蛋白質(zhì)和核酸等分配的主要因素。同樣，對(duì)于粒子遷移也有相似的影響，粒子因遷移而在界面上積累。故只要設(shè)法改變界面電勢(shì)，就能控制蛋白質(zhì)等電荷大分子轉(zhuǎn)入某一相。 ? （ 4）溫度的影響 ? 分配系數(shù)對(duì)溫度的變化不敏感 ? 成相聚合物對(duì)蛋白質(zhì)有穩(wěn)定化作用 ,所以室溫操作活性收率依然很高 ,而且室溫時(shí)粘度較冷卻時(shí) (4 ℃ ) 低 ,有助于相的分離并節(jié)省了能源開(kāi)支。 ? 雙水相萃取技術(shù)的特點(diǎn) ? (1) 系統(tǒng)含水量多達(dá) 75 %～ 90 % ,兩相界面張力極低 (10 7～ 10 – 4 Nm 1) ,有助于保持生物活性和強(qiáng)化相際間的質(zhì)量傳遞 ? (2) 分相時(shí)間短 (特別是聚合物 / 鹽系統(tǒng) ) ,自然分相時(shí)間一般只有 5～ 15min。 ? (3) 雙水相分配技術(shù)易于連續(xù)化操作。 ? (4) 目標(biāo)產(chǎn)物的分配系數(shù)一般大于 3 ,大多數(shù)情況下 ,目標(biāo)產(chǎn)物有較高的收率。 ? (5) 大量雜質(zhì)能夠與所有固體物質(zhì)一起去掉 ,與其它常用固液分離方法相比 ,雙水相分配技術(shù)可省去 1～ 2 個(gè)分離步驟 ,使整個(gè)分離過(guò)程更經(jīng)濟(jì)。 ? (6) 設(shè)備投資費(fèi)用少 ,操作簡(jiǎn)單 ,不存在有機(jī)溶劑殘留問(wèn)題。 ? 雙水相萃取的工藝流程 ? 雙水相萃取技術(shù)的工藝流程主要由三部分構(gòu)成 :目的產(chǎn)物的萃取 。 PEG的循環(huán) 。 無(wú)機(jī)鹽的循環(huán)。 ? 雙水相的應(yīng)用舉例 ? 分離和提純各種蛋白質(zhì) (酶） ? 用 PEG/ (NH4) 2SO4 雙水相體系 ,經(jīng)一次萃取從 α 淀粉酶發(fā)酵液中分離提取 α 淀粉酶和蛋白酶 , 萃取最適宜條件為 PEG1000 ( 15 %) (NH4) 2SO4 (20 %) ,pH = 8 ,α 淀粉酶收率為 90 % ,分配系數(shù)為 19. 6 ,蛋白酶的分離系數(shù)高達(dá)15. 1。比活率為原發(fā)酵液的 1. 5 倍 ,蛋白酶在水相中的收率高于 60 %。 ? 提取抗生素和分離生物粒子 ? 采用 PEG/ Na2HPO4 體系提取丙酰螺旋霉素，最佳萃取條件是 pH= 8. 0～ 8. 5 ， PEG2022 (14 %) / Na2HPO4 (18 %) ,小試收率達(dá) 69. 2 % ,對(duì)照的乙酸丁酯萃取工藝
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1