洋蔥多糖提取及其抗氧化性研究畢業(yè)論文(編輯修改稿)
2025-07-25 05:24 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 正交試驗，以得出最佳提取條件。采用L9（34）正交試驗，方案見表2，表3。 表2 正交試驗因素—水平表L9（34）因 素 水平提取溫度（℃） A提取時間（h） B 料水比 C1601:152701:203801:25表 3 正交試驗安排表L9（34）試驗號溫度（℃） A提取時間（h） B料水比 C160（1）（1）1:15（1）260（1）（2）1:20（2）360（1）（3）1:25（3）470（2）（1）1:25（3）570（2）（2）1:15（1）670（2）（3）1:20（2）780（3）（1）1:20（2）880（3）（2）1:25（3）980（3）（3）1:15（1） 洋蔥多糖含量的測定 測定方法：苯酚—硫酸比色法原理 乙醇沉淀提取多糖以除去單糖、雙糖，氨基酸及醇溶蛋白質(zhì)等干擾成分，然后用水在一定溫度下提取可溶性多糖和蛋白質(zhì)，最終得到多糖、蛋白質(zhì)的水溶液。然后用丁醇、氯仿脫蛋白，即可得到一定量的粗多糖水溶液，然后進(jìn)行定量測定。多糖在濃硫酸作用下水解成單糖，并迅速脫水生成糠醛衍生物，與苯酚結(jié)合生成有色化合物，在490nm波長下，用分光光度計測定其吸光度。 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制： （1）、：精密稱取在105℃,加水定容至100ml→。（2）、6%苯酚溶液：%苯酚溶液,現(xiàn)配現(xiàn)用。（3）、濃硫酸：直接使用分析純的濃硫酸。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：（結(jié)果見表4，圖1） 、、，再各加6%，搖勻；再在冰水中邊震蕩邊緩慢滴加濃硫酸5ml，搖勻后冷卻至室溫再放入沸水浴中加熱15min，再取出放入冰水中冷卻至室溫。，于490nm處測吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸曲線方程： y = + ，R2= 表4 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線試驗結(jié)果葡萄糖含量（ug）20406080100120A490nm/圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 樣品中洋蔥多糖含量的測定 待測樣品溶液的配制： 在單因素實驗中，將除試管③、⑤以外的十只試管所得的各樣品加蒸餾水稀釋10倍，試管③、⑤的樣品加蒸餾水稀釋5倍。在正交試驗中，將9支試管所得樣品加蒸餾水稀釋5倍。以保證待測樣品中多糖濃度處于合理區(qū)間。 樣品中雪蓮果多糖含量的測定： ，按照作標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法即再各加6%，搖勻，搖勻后冷卻至室溫再放入沸水浴中加熱15min，取出放入冰水中冷卻至室溫。%，搖勻，搖勻后冷卻至室溫再放入沸水浴中加熱15min，取出放入冰水中冷卻至室溫，作為空白對照。于490nm處測吸光度來測定樣品溶液的吸光度，再根據(jù)回歸方程計算樣品中洋蔥多糖的含量。（用提取的洋蔥多糖提取率表示） 樣品中多糖含量的計算： 根據(jù)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線得回歸方程：y= + ，R2= ，把所有的吸光值代入上述方程，計算出樣品的多糖濃度x，然后再換算成一定質(zhì)量洋蔥多糖提取率W。 提取多糖的量 （查曲線得多糖含量/2）V多糖提取率= 100%= 100% 香蕉皮樣品的質(zhì)量 香蕉皮樣品的質(zhì)量V— 抗氧化活性測定 抗氧化活性測定原理：機(jī)體中有許多抗氧化性物質(zhì)，能使3價Fe還原成2價Fe，2價Fe可與菲啉類物質(zhì)形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，通過比色可測出其抗氧化能力的高低。 抗氧化活性測定流程：（1）、洋蔥多糖溶液的制?。焊鶕?jù)正交試驗結(jié)果確定的最佳浸提條件，，得到較高濃度洋蔥多糖母液。（2）、將獲得的多糖母液通過加一定量的蒸餾水稀釋，用苯酚硫酸法測定稀釋后的多糖含量，以保證待測抗氧化活性多糖溶液具有較合理的濃度。 （3）、總抗氧化能力測定試劑的配制：將試劑二的粉劑倒入錐形瓶，加120ml蒸餾水充分溶解，在37℃水浴鍋中加速溶解；試劑三在使用前取貯
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