【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 從而評(píng)價(jià)受試物抑制02的能力[13]。 具體操作 鄰苯三酚自氧化速率的測(cè)定： 50mmol/L TrisHCl緩沖溶液（）， mL蒸餾水混勻后在25℃水浴中保溫20min，取出后立即加入在25℃預(yù)熱過(guò)的3 mmol/，迅速搖勻后倒入比色杯，420nm下每隔30s測(cè)定吸光度[14]，計(jì)算線(xiàn)性范圍內(nèi)每分鐘內(nèi)吸光度的增加，以10 mmol/L HCl溶液配制空白管作為對(duì)照，記錄結(jié)果。 加入不同溶劑提取物后鄰苯三酚自氧化速率的測(cè)定： mL、 mL、 mL、 mL、 ，蒸餾水減少。同樣以10 mmol/LHCl溶液配制空白管作為對(duì)照。測(cè)定吸光度。 計(jì)算抑制率抑制率（％）＝（△A1/△t △A2/△t）/△A1/△t100%式中： △A1/△t——鄰苯三酚自氧化時(shí)反應(yīng)速率。A2/△t——加入樣品液后鄰苯三酚自氧化時(shí)反應(yīng)速率 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對(duì)N02離子清除作用的測(cè)定 實(shí)驗(yàn)原理N02在酸性條件下，與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，此重氮鹽與顯色劑鹽酸萘乙二胺鹽發(fā)生偶合反應(yīng)．生成紫紅色的偶氮化合物，故可用比色法測(cè)定N02含量。 具體操作分別量取不同濃度梯度的不同溶劑提取物水溶液、Vc水溶液放于25mL具塞試管中，加入5ug/mL的亞硝酸鈉溶液lmL然后置于37℃水浴鍋中反應(yīng)30min，％對(duì)氨基苯磺酸lmL搖勻靜置5min；％，靜置15min后，以蒸餾水作空白測(cè)各溶液的吸光度A，把未加N02離子清除劑的溶液所測(cè)得的吸光度定為A0。即空白值。按以下公式計(jì)算待測(cè)物對(duì)N02的清除率[15]。清除率(％)=(A0A)／A0100式中：A0——不加待測(cè)液時(shí)反應(yīng)體系的吸光度；A——加入待測(cè)液時(shí)反應(yīng)體系的吸光度。3 結(jié)果與分析 普洱茶及其原料不同溶劑提取物水分含量的比較采用傳統(tǒng)的水分測(cè)定方法和快速水分測(cè)定儀測(cè)定樣品的水分含量，測(cè)定結(jié)果如表3。各樣品水分含量的大小除了與樣本本身的結(jié)構(gòu)有關(guān)外，主要與各樣品的烘干溫度和時(shí)間有關(guān)。表3 不同溶劑提取物的水分含量Table 3 Extraction of water content from different solvent不同溶劑提取物水分含量(%)普洱茶曬青毛茶乙醇浸提物水提物乙酸乙酯提取物氯仿提取物正丁醇提取物醇沉醇溶液因此,由于樣品水分含量的差異會(huì)導(dǎo)致樣品所配制的濃度存在一定的差異性,這種不一致性可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的比較。樣品的還原力大小即反映樣品的總抗氧化能力的強(qiáng)弱。根據(jù)還原力的測(cè)定方法測(cè)定提取物的總抗氧化能力的大小見(jiàn)表4和表5。表4不同溶劑提取物不同濃度還原力的評(píng)價(jià)Table 4 Evaluation of reducing power of different solvent extraction of different concentrations 樣品不同濃度下的吸光值（平均值x177。SD）水提（普）177。177。177。177。177。水提（原料）177。177。177。177。177。乙酸乙酯提（普）177。177。177。177。177。乙酸乙酯提（原料）177。177。177。177。177。醇溶液（普）177。177。177。177。177。醇溶液（原料）177。177。177。177。177。醇沉（普）177。177。177。177。177。醇沉（原料）177。177。177。177。177。氯仿提?。ㄆ眨?77。177。177。177。177。氯仿提?。ㄔ希?77。177。177。177。177。表5不同溶劑提取物不同濃度還原力與蘆丁的對(duì)照Table 5 Reduction of control of Rutin and different solvent extraction of different concentrations 樣品不同濃度下的吸光值（平均值x177。SD）正丁醇提（普）177。177。177。177。177。正丁醇提（原料）177。177。177。177。177。乙醇浸提（普）177。177。177。177。177。乙醇浸提（原料） 177。177。177。177。177。蘆丁177。177。177。177。177。表6不同溶劑提取物還原力與濃度的相關(guān)系數(shù)Table 6 R2of reducing power of different solvent extractions水提物（普）水提物（原料）乙酸乙酯提(普)乙酸乙酯提(原料)醇溶液（普）R2醇溶液（原料）醇沉（普）醇沉（原料）氯仿提（普）氯仿提（原料）R2 正丁醇提（普）正丁醇提（原料）乙醇浸提（普）乙醇浸提（原料）蘆丁R2由表4和表5可以清楚的看出各樣品均具有一定的還原力。不同原料不同溶劑提取物及對(duì)照蘆丁的吸光值隨濃度的減小而逐漸減小。同一溶劑提取物因原料不同其總抗氧化能力存在一定的差異。其中，～，氯仿提取物的還原力最低，177。，177。；177。177。177。，177。，即原料的正丁醇提取物的還原力遠(yuǎn)大于蘆丁。，177。，177。，177。由表6可看出各樣品及對(duì)照的還原力與濃度之間的呈現(xiàn)良好的線(xiàn)性關(guān)系。各樣品及對(duì)照的相關(guān)系數(shù)順序?yàn)椋核嵛铮ㄔ希┅兇汲粒ㄔ希┅兇汲粒ㄆ眨┅円掖冀幔ㄔ希┅円掖冀幔ㄆ眨┅兟确绿崛∥铮ㄔ希┅冋〈继崛∥铮ㄆ眨┅兟确绿崛∥铮ㄆ眨┅兇既芤海ㄆ眨┅兲J丁﹥醇溶液（原料）﹥水提物（普）﹥正丁醇提取物（原料）﹥ 乙酸乙酯提取物（普）﹥乙酸乙酯提取物（原料）。在相同的濃度條件下各樣品的還原力的比較，見(jiàn)圖1。由圖1可知，：正丁醇提取物（原料）﹥乙酸乙酯提取物（原料）﹥蘆丁﹥乙醇浸提物（原料）﹥正丁醇提取物（普）﹥乙酸乙酯提取物（普）﹥水提物（普）﹥醇溶液（原料）﹥乙醇浸提物（普）﹥水提物（原料）﹥醇溶液（普）﹥醇沉（普）﹥醇沉（原料）﹥氯仿提取物（普）﹥氯仿提取物（原料）。即可看出曬青毛茶的正丁醇提取物及乙酸乙酯提取物的總抗氧化能力均大于對(duì)照蘆丁，且正丁醇提取部分的總抗氧化能力大于乙酸乙酯提取部分。 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對(duì)羥自由基（OH）的抑制效果的比較 普洱茶及其原料不同溶劑提取物對(duì)羥自由基（OH）的抑制效果的分析根據(jù)公式抑制率（％）＝[A0（AiA0i）]/A0 100%計(jì)算抑制率，則可得出提取物及對(duì)照Vc對(duì)羥自由基（OH）的抑制效果，見(jiàn)表7。表7不同溶劑提取物不同濃度對(duì)羥基自由基（OH）抑制率的影響Table 7 Effects of different solvents extracts of different concentrations on the effect of scavenging hydroxyl radical (? OH) 樣品不同濃度下的提取物對(duì)羥自由基（OH）的抑制率（％）（平均值ⅹ177。SD）乙酸乙酯（原料）177。177。177。177?！宜嵋阴ヌ幔ㄆ眨?77。177。177。177?！汲粒ㄔ希?77。177。177。177。—醇沉（普）177。177。177。177?！〈继幔ㄆ眨?77。177。177。177?！〈继幔ㄔ希?77。177。177。177?！既芤海ㄆ眨?77。177。177。177?！既芤海ㄔ希?77。177。177。177。177。水提物（普）177。177。177。177?！嵛铮ㄔ希?77。177。177。177。177。乙醇浸提（原料）177。177。177。177。177。乙醇浸提（普）177。177。177。177。177。氯仿提（普）177。177。177。177。177。氯仿提（原料）177。177。177。177。177。Vc177。177。177。177。177。表8不同溶劑提取物對(duì)羥基自由基的清除率與濃度的相關(guān)系數(shù)Table 8 R2 of scavenging hydroxyl radical (? OH) of different solvent extractions水提物（普）水提物（原料）乙酸乙酯提(普)乙酸乙酯提(原料)醇溶液（普）R2醇溶液（原料）醇沉（普）醇沉（原料）氯仿提（普）氯仿提（原料）R2 正丁醇提（普）正丁醇提（原料）乙醇浸提（普）乙醇浸提（原料）VcR2從表7中可以看出：各樣品及對(duì)照Vc對(duì)羥基自由基（OH）均具有相對(duì)較強(qiáng)的清除能力，且抑制率隨著各樣品濃度的增大而呈增大的趨勢(shì)。，曬青毛茶提取物清除率除了氯仿提取部分外其余都超過(guò)50%。曬青毛茶的乙酸乙酯提取物的清除能力較高，～，其清除羥基自由基的能力均高于其他提取物，接近于維生素C?！?，也接近于維生素C。，177。%， /100mL～，清除率增加相對(duì)