【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 1:3，提取次數(shù)分別為 1次、 2 次、 3 次，考察提取時(shí)間對(duì)多糖提取效果的影響。 數(shù)據(jù)處理方法 經(jīng)過(guò)不同 單因素考察 后的數(shù)據(jù)用 Excel2021 統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理、作 折線(xiàn) 圖 ，繪制趨勢(shì)圖 。運(yùn)用 SPSS 軟件進(jìn)行 正交試驗(yàn)的數(shù)據(jù)直觀分析和 方差分析 。 正交試驗(yàn)優(yōu)選大青葉中大青葉多糖水 提 醇沉工藝 研究 通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)選?。禾崛囟龋?A）、提取時(shí)間（ B）、 料液比 （ C）、提取次數(shù)（ D）四個(gè)因素進(jìn)行 4 因素 3 水平正交實(shí)驗(yàn)，選用 L9（ 34）正交表，因素水平安排見(jiàn)表 1。 表 1 正交試驗(yàn)因素水平表 水 平 因 素 提取溫度 A（ ℃ ） 提取時(shí)間 B（ h） 料液比 C 提取次數(shù) D 1 85 15 1 2 90 25 2 3 100 35 3 3 結(jié)果與分析 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析 提取溫度對(duì)多糖得率的影響 提取溫度在中獸藥的實(shí)際生產(chǎn)中影響較大，一方面影響有效成分的提 取率和穩(wěn)定性，另一方面又影響提取企業(yè)的能耗，車(chē)間溫度，以及工人的生產(chǎn)環(huán)境福利等因素。并且是決定成本的一個(gè)重要因素。由圖 1可看出，提取溫度對(duì)大青葉粗糖得率隨著提取溫度的升高而增大。故正交設(shè)計(jì)時(shí)選擇提取溫度的水平為 85 ℃、 90 ℃、 100 ℃。 大青葉多糖提取工藝研究 6 圖 1 提取溫度對(duì)多糖得率的影響 提取時(shí)間對(duì)多糖得率的影響 圖 2 提取時(shí)間對(duì)多糖得率影響 由圖 2可看出，提取時(shí)間粗糖得率隨著提取時(shí)間的增長(zhǎng)先增大后減小，在 5 h時(shí)達(dá)到最大。而多糖得率則隨著提取時(shí)間的增長(zhǎng)而下降。下降點(diǎn)在 h左右。故正交設(shè)計(jì)時(shí) 選擇提取時(shí)間的水平為 h、 h、 h。 大青葉多糖提取工藝研究 7 料液比對(duì)多糖得率的影響 圖 3 料液比對(duì)多糖得率的影響 由圖 3 可知，隨著料液比的增加，多糖得率先增加后減小，拐點(diǎn)在 1:30 附近。實(shí)際應(yīng)用中料液比過(guò)小不利于浸透提取，過(guò)大又不利于濃縮和醇沉的操作，因此正交設(shè)計(jì)選取水平點(diǎn)設(shè)計(jì)為 1:15,1:25,1:35。 提取次數(shù)對(duì)多糖得率的影響 圖 4 提取次數(shù)對(duì)多糖得率的影響 由圖 4 可知，提取次數(shù)對(duì)多糖得率的 影響是先增加后降低，提取兩次過(guò)后，多糖得率明顯降低，因此正交試驗(yàn)的水平點(diǎn)?。贝?，２次，３次三個(gè)水平。 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)大青葉粗多糖的影響 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)大青葉粗多糖的影響見(jiàn)表 2。 大青葉多糖提取工藝研究 8 表 2 大青葉粗糖提取工藝正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表及結(jié)果 序號(hào) (serial number) A B C D 粗糖得率 % 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 K1 K2 K3 R 直觀分析結(jié)果來(lái)源于極差， 由表 2 中直觀分析結(jié)果 顯示 各因素的影響大小順序?yàn)?D C B A，即提取次數(shù)對(duì)大青粗糖得率的影響 料液比 提取時(shí)間 提取溫度， 大青葉粗糖最佳提取方案為 A1B3C3D2，將上述結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果如 表 3。 分析表中數(shù)據(jù)可見(jiàn)，僅影響因素 料液比和提取次數(shù) 對(duì)大青粗糖得率影響達(dá)到顯著地步。將影響因素 料液比和提取次數(shù) 進(jìn)行多重 比較 分析，確定因素水平之間的差異 顯著性 ，結(jié)果如表 4。 大青葉多糖提取工藝研究 9 表 3 大青葉粗糖提取工藝方差分析表 變異來(lái)源 平方和 自由度 F 值 p 值 A 2 B 2 C 2 D 2 誤差 18 表 4 大青葉粗糖提取工藝多重比較結(jié)果 影響因子 處理 均值 5%顯著水平 1%極顯著水平 C 3 a A 2 a AB 1 b B D 2 a A 3 a A 1 b B 由表可見(jiàn)， 最優(yōu)提取條件 為 A1B1C2D2， 85℃ 提取溫度 ,25:1 的料液比 ,提取 h,提取 2次 ,為粗糖最優(yōu)工藝 . 最優(yōu)工藝驗(yàn)證試驗(yàn) 取 100 克大青葉藥材 ,按照 項(xiàng)下最優(yōu)工藝 85℃ 提取溫度 ,25:1 的料液比 ,提取一小時(shí) ,提取 2 次 , 水浴加溫 .提取三次 ,三次粗糖得率分別為 %， %， %。表明該最優(yōu)工藝在實(shí)驗(yàn)室條件下較穩(wěn)定可靠。 大青葉多糖提取工藝研究 10 4 討論 迄今為止，菘藍(lán)的多糖主要從板藍(lán)根中提取，大青葉中提取板藍(lán)根多糖研究較少。作為同一種植物的不同藥用部位，從療效上看，大青葉主要是清熱解毒涼血消斑功效較強(qiáng)， 板藍(lán)根主要是清熱解毒，涼血利咽功效較強(qiáng)?；瘜W(xué)成分上看，已有的研究表明大青葉生物堿，有機(jī)酸含量較高，板藍(lán)根氨基酸以及胞苷腺苷等成分較高。目前還未見(jiàn)以多糖成分作為評(píng)價(jià)指標(biāo)評(píng)價(jià)板藍(lán)根和大青葉質(zhì)量的研究，因此對(duì)二者多糖的含量，結(jié)構(gòu)，藥理作用研究具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。 本研究通過(guò)得出的最優(yōu)工藝，提取粗多糖的含量與張明 [27]等研究相比略低，評(píng)價(jià)指標(biāo)一致，都是重量法計(jì)算粗多糖的提取率，張氏用復(fù)合酶水解法提取大青葉粗多糖，提取溫度更低，多糖的的得率也比較高。但是復(fù)合酶水解條件不易掌握，目前還未工業(yè)化應(yīng)用。傳統(tǒng)方法一直在生產(chǎn) 一線(xiàn)使用，本研究更具實(shí)際意義。再者張氏使用的大青葉未注明來(lái)源，中藥具有道地性，也有可能是選用的藥材多糖本身含量不同的原因。 5 結(jié)論 通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的研究 ,大青葉多糖水提醇沉方法的最優(yōu)提取工藝為 :85℃ 提取溫度 ,25:1的液料比 ,提取 h,提取 2 次。粗多糖的平均得率在 %左右。該工藝在實(shí)驗(yàn)室條件下較為穩(wěn)定。 大青葉多糖提取工藝研究 11 參考文獻(xiàn) [1]李園園，方建國(guó)，王文清，等 .大青葉歷史考證及現(xiàn)代研究進(jìn)展 .中草藥雜志， 2021，第 36卷第 5 期 . 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