【文章內(nèi)容簡介】 1:3，提取次數(shù)分別為 1次、 2 次、 3 次，考察提取時間對多糖提取效果的影響。 數(shù)據(jù)處理方法 經(jīng)過不同 單因素考察 后的數(shù)據(jù)用 Excel2021 統(tǒng)計分析軟件進行處理、作 折線 圖 ，繪制趨勢圖 。運用 SPSS 軟件進行 正交試驗的數(shù)據(jù)直觀分析和 方差分析 。 正交試驗優(yōu)選大青葉中大青葉多糖水 提 醇沉工藝 研究 通過預實驗選取：提取溫度（ A）、提取時間（ B）、 料液比 （ C）、提取次數(shù)（ D）四個因素進行 4 因素 3 水平正交實驗，選用 L9（ 34）正交表，因素水平安排見表 1。 表 1 正交試驗因素水平表 水 平 因 素 提取溫度 A（ ℃ ） 提取時間 B（ h） 料液比 C 提取次數(shù) D 1 85 15 1 2 90 25 2 3 100 35 3 3 結果與分析 單因素實驗結果與分析 提取溫度對多糖得率的影響 提取溫度在中獸藥的實際生產(chǎn)中影響較大，一方面影響有效成分的提 取率和穩(wěn)定性，另一方面又影響提取企業(yè)的能耗，車間溫度，以及工人的生產(chǎn)環(huán)境福利等因素。并且是決定成本的一個重要因素。由圖 1可看出，提取溫度對大青葉粗糖得率隨著提取溫度的升高而增大。故正交設計時選擇提取溫度的水平為 85 ℃、 90 ℃、 100 ℃。 大青葉多糖提取工藝研究 6 圖 1 提取溫度對多糖得率的影響 提取時間對多糖得率的影響 圖 2 提取時間對多糖得率影響 由圖 2可看出，提取時間粗糖得率隨著提取時間的增長先增大后減小，在 5 h時達到最大。而多糖得率則隨著提取時間的增長而下降。下降點在 h左右。故正交設計時 選擇提取時間的水平為 h、 h、 h。 大青葉多糖提取工藝研究 7 料液比對多糖得率的影響 圖 3 料液比對多糖得率的影響 由圖 3 可知，隨著料液比的增加，多糖得率先增加后減小，拐點在 1:30 附近。實際應用中料液比過小不利于浸透提取，過大又不利于濃縮和醇沉的操作，因此正交設計選取水平點設計為 1:15,1:25,1:35。 提取次數(shù)對多糖得率的影響 圖 4 提取次數(shù)對多糖得率的影響 由圖 4 可知，提取次數(shù)對多糖得率的 影響是先增加后降低，提取兩次過后，多糖得率明顯降低，因此正交試驗的水平點?。贝?，２次，３次三個水平。 正交實驗設計對大青葉粗多糖的影響 正交實驗設計對大青葉粗多糖的影響見表 2。 大青葉多糖提取工藝研究 8 表 2 大青葉粗糖提取工藝正交試驗設計表及結果 序號 (serial number) A B C D 粗糖得率 % 1 1 1 1 1 2 1 2 2 2 3 1 3 3 3 4 2 1 2 3 5 2 2 3 1 6 2 3 1 2 7 3 1 3 2 8 3 2 1 3 9 3 3 2 1 K1 K2 K3 R 直觀分析結果來源于極差， 由表 2 中直觀分析結果 顯示 各因素的影響大小順序為 D C B A，即提取次數(shù)對大青粗糖得率的影響 料液比 提取時間 提取溫度， 大青葉粗糖最佳提取方案為 A1B3C3D2，將上述結果進行方差分析，結果如 表 3。 分析表中數(shù)據(jù)可見，僅影響因素 料液比和提取次數(shù) 對大青粗糖得率影響達到顯著地步。將影響因素 料液比和提取次數(shù) 進行多重 比較 分析，確定因素水平之間的差異 顯著性 ，結果如表 4。 大青葉多糖提取工藝研究 9 表 3 大青葉粗糖提取工藝方差分析表 變異來源 平方和 自由度 F 值 p 值 A 2 B 2 C 2 D 2 誤差 18 表 4 大青葉粗糖提取工藝多重比較結果 影響因子 處理 均值 5%顯著水平 1%極顯著水平 C 3 a A 2 a AB 1 b B D 2 a A 3 a A 1 b B 由表可見， 最優(yōu)提取條件 為 A1B1C2D2， 85℃ 提取溫度 ,25:1 的料液比 ,提取 h,提取 2次 ,為粗糖最優(yōu)工藝 . 最優(yōu)工藝驗證試驗 取 100 克大青葉藥材 ,按照 項下最優(yōu)工藝 85℃ 提取溫度 ,25:1 的料液比 ,提取一小時 ,提取 2 次 , 水浴加溫 .提取三次 ,三次粗糖得率分別為 %， %， %。表明該最優(yōu)工藝在實驗室條件下較穩(wěn)定可靠。 大青葉多糖提取工藝研究 10 4 討論 迄今為止，菘藍的多糖主要從板藍根中提取，大青葉中提取板藍根多糖研究較少。作為同一種植物的不同藥用部位，從療效上看，大青葉主要是清熱解毒涼血消斑功效較強， 板藍根主要是清熱解毒，涼血利咽功效較強。化學成分上看，已有的研究表明大青葉生物堿，有機酸含量較高，板藍根氨基酸以及胞苷腺苷等成分較高。目前還未見以多糖成分作為評價指標評價板藍根和大青葉質(zhì)量的研究，因此對二者多糖的含量，結構，藥理作用研究具有一定的現(xiàn)實意義。 本研究通過得出的最優(yōu)工藝，提取粗多糖的含量與張明 [27]等研究相比略低，評價指標一致，都是重量法計算粗多糖的提取率，張氏用復合酶水解法提取大青葉粗多糖，提取溫度更低，多糖的的得率也比較高。但是復合酶水解條件不易掌握，目前還未工業(yè)化應用。傳統(tǒng)方法一直在生產(chǎn) 一線使用，本研究更具實際意義。再者張氏使用的大青葉未注明來源，中藥具有道地性，也有可能是選用的藥材多糖本身含量不同的原因。 5 結論 通過本實驗的研究 ,大青葉多糖水提醇沉方法的最優(yōu)提取工藝為 :85℃ 提取溫度 ,25:1的液料比 ,提取 h,提取 2 次。粗多糖的平均得率在 %左右。該工藝在實驗室條件下較為穩(wěn)定。 大青葉多糖提取工藝研究 11 參考文獻 [1]李園園，方建國，王文清，等 .大青葉歷史考證及現(xiàn)代研究進展 .中草藥雜志， 2021，第 36卷第 5 期 . 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[27]張明 復合酶法提取大青葉多糖工藝研究 [J].安徽農(nóng)業(yè)科學 ,2021,38(26)1435214353 大青葉多糖提取工藝研究 13 致 謝 仿佛踏進 東農(nóng)的校門還是昨天的事，一轉眼四年就過去了，我還清晰的記得大學第一次班會自己由于緊張把名字都說錯了。現(xiàn)在的我，成熟、從容，這一切，都該感謝這四年間幫助過我的老師和同學，謝謝你們讓我這個異鄉(xiāng)人感覺到了家人的溫暖！ 本課題從試驗設計到論文的撰寫都是在石廣亮老師的悉心指導與幫助下完成的。從論文的選題、設計、實施與寫作，每一個環(huán)節(jié)都凝結著老師的智慧和心血。值此論文完成之際，謹向恩師致以深深的謝意 ! 最后向參加論文答辯和評閱的各位專家教授致以深深的謝意！ 大青葉多糖提取工藝研究 14 東北 農(nóng)業(yè)大學畢業(yè)設計（論文）任務書 論文題目 大青葉多糖提取 工藝研究 學院 動物醫(yī)學學院 專業(yè) 動物藥學 班級 動物藥學 091 班 畢業(yè)論文（設計）的要求 畢業(yè)論文（設計）的內(nèi)容與技術參數(shù) 畢業(yè)論文（設計）工作計劃 接受任務日期 年 月 日 要求完成日期 年 月 日 學 生 （簽名） 指 導 教 師 （簽名） 院 長 （簽名） 大青葉多糖提取工藝研究 15 東 北 農(nóng) 業(yè) 大 學 本 科 畢 業(yè) 設 計 （ 論 文 ） 指 導 教 師 評 語 學生姓名 劉宇典 所在班級 動物藥學 091 班 論文題目 大青葉多糖的提取和含量測定 指導教師評