高效液相色譜儀ppt課件(編輯修改稿)
2025-06-01 07:32 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 乙 醇 210 乙 醚 220 二氯甲烷 220 氯 仿 240 四氯化碳 265 四氫呋喃 280（ 220） 甲 苯 285 在使用紫外檢測器時(shí)，檢測波長與所用溶劑的截止波長接近（或低于截止波長）時(shí)，容易產(chǎn)生噪音干擾，從而影響檢測結(jié)果。 所以在使用紫外檢測器時(shí)，檢測波長應(yīng)至少比所用溶劑的截止波長大 20nm以上。 截止波長 原理 ：監(jiān)測參比池和測量池中溶液的 折射率之差 來 測量試樣濃度的檢測器。 特點(diǎn) ：通用性檢測器； 對(duì)溫度變化比較敏感，要保持在 177。 ℃ （需配柱溫箱使用） ； 靈敏度低 (106g)； 不能用于梯度洗脫。 b. 示差折光 檢測器 (RID) 原理 : 利用某些溶質(zhì)在紫外光激發(fā)后能發(fā)射可見光 (熒光 ) 的性質(zhì)進(jìn)行檢測。 許多藥物和生命活性物質(zhì) (多環(huán)芳烴，維生素 B、黃曲霉素、卟啉類化合物、農(nóng)藥、藥物、氨基酸、甾類化合物等 )具有天然熒光，能直接檢測。 c. 熒光檢測器 (FLD) 特點(diǎn) : 選擇性檢測器， 靈敏度比紫外檢測器高 23個(gè)數(shù)量級(jí)， 可達(dá)到 1012g； 選擇性好，對(duì)流量和溫度敏感性低。 缺點(diǎn) ：只適合于能產(chǎn)生熒光的物質(zhì)的檢測。 通過 熒光衍生化 可以使本來沒有熒光的化合物轉(zhuǎn)變 成熒光衍生物，從而擴(kuò)大了熒光檢測器的應(yīng)用范圍。 工作原理 :通過檢測光散射程度而測定溶質(zhì)濃度的檢測器 。色譜柱后流出物在通向檢測器途中，被高速載氣 (氮?dú)?)噴成霧狀液滴，再進(jìn)入蒸發(fā)漂移管中，流動(dòng)相不斷蒸發(fā)，含溶質(zhì)的霧狀液滴形成不揮發(fā)的微小顆粒，被載氣載帶通過檢測器。在檢測器中，光被散射的程度取決于溶質(zhì)顆粒的大小與數(shù)量。 d. 蒸發(fā)光散射檢測器 (evaporative lightscatting detector, ELSD) 適用范圍 ： 適用檢測揮發(fā)性低于流動(dòng)相的組分 ，主要用于檢測糖類，高級(jí)脂肪酸，磷脂， 維生素，氨基酸，甘油三酯及甾體等。 特點(diǎn) ：通用型檢測器，對(duì)各物質(zhì)有幾乎相同的響應(yīng)。 消除溶劑的干擾，不受溫度變化影響， 靈敏度比較低（尤其對(duì)有紫外吸收的組分） 流動(dòng)相必須是揮發(fā)性的，不能含有緩沖鹽等。 四、液相色譜的流動(dòng)相 1. 流動(dòng)相特性 ? 液相色譜的流動(dòng)相又稱為：淋洗液，洗脫劑。流動(dòng)相組成改變，極性改變，可顯著改變各組分分離狀況。 ? 親水性固定液常采用疏水性流動(dòng)相，即流動(dòng)相的極性小于固定相的極性，稱為正相液液色譜法，極性柱也稱正相柱。 ? 若流動(dòng)相的極性大于固定液的極性，則稱為反相液液色譜，非極性柱也稱為反相柱。組分在兩種類型分離柱上的出峰順序相反。 2. 流動(dòng)相類別 按流動(dòng)相組成成分 ：單組分和多組分； 按極性分 ：極性、弱極性、非極性； 按使用方式分 ：固定組成淋洗和梯度淋洗。 常用溶劑 ： 正己烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙醇、 甲 醇、異丙醇、乙腈、水。 采用二元或多元組合溶劑作為流動(dòng)相可以靈活調(diào)節(jié)流動(dòng)相的極性或增加選擇性，以改進(jìn)分離或調(diào)整出峰時(shí)間。 在選擇溶劑時(shí)， 溶劑的極性 是選擇的重要依據(jù)。 采用正相液 液分配分離時(shí)：首先選擇中等極性溶劑， 若組分的保留時(shí)間短，降低溶劑極性，反之增加。 也可在低極性溶劑中，逐漸增加其中的極性溶劑， 使保留時(shí)間縮短。 常用溶劑的極性順序 ： 水 (最大 ) 甲酰胺 乙腈 甲醇 乙醇 丙醇 丙酮 二氧六環(huán) 四氫呋喃 甲乙酮 正丁醇 乙酸乙酯 乙醚 異丙醚 二氯甲烷 氯仿 溴乙烷 苯 四氯化碳 二硫化碳 環(huán)己烷 己烷 煤油 (最小 ) 3. 流動(dòng)相選擇 4. 選擇流動(dòng)相時(shí)應(yīng)注意的幾個(gè)問題 液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)： 流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力， 保證樣
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1