《高效液相色譜儀》ppt課件-文庫吧
2025-04-20 07:32 本頁面
【正文】 CH2H2CCH2H2CCH2H3CCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiOOOSiCH3H3CCH3 SiCH3H3CCH3HHHHHHH主要是由于修飾到硅膠上的 硅烷化 試劑不同。 C8是修飾的帶 8個碳原子的硅烷， C18是修飾的帶 18個碳原子的硅烷。 C18較 C8極性小， C18更適合分析中等到小極性的化合物， C8更適合中等偏大極性 化合物。 C18柱（ C8柱）性能影響因素 物理性質(zhì) ?硅膠純度 ?色譜柱尺寸 ?顆粒形狀 ?粒徑 ?表面積 ?孔徑 ?鍵合類型 ?碳覆蓋率 ?封端 化學(xué)性質(zhì) 正相柱 ： 固定相通常為硅膠以及其他具有極性官能團(tuán)，如胺基 (NH2)和 氰基 (CN)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基 (SiOH)或其他極性基 團(tuán)極性較強(qiáng)，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小，即 極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱；正相色譜使用的流動相極性相 對比固定相低，如正已烷、氯仿 、二氯甲烷等。 反相柱 ： 固定相通常是以硅膠為基質(zhì)，表面鍵合有極性相對較弱官能團(tuán)的 鍵合相。反向色譜所使用的流動相極性較強(qiáng)，通常為水、緩沖液與甲 醇，乙腈等的混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)的組分最先被 沖洗出 ， 而極性弱的組分會在色譜柱上有更強(qiáng)的保留 。 常用的反向填 料有 :C18(ODS)、 C8(MOS)、 C4(Butyl)、 C6H5(Phenyl)等。 正相柱和反相柱 預(yù)柱和保護(hù)柱 從泵來的流動相 預(yù)柱 進(jìn)樣口 保護(hù)柱 分析柱 檢 測 器 預(yù)柱是針對流動相來保護(hù)色譜柱 保護(hù)柱是針對樣品來保護(hù)色譜柱 precolumn——預(yù)柱 ， guard column——保護(hù)柱 安裝位置不同： 預(yù)柱是泵后進(jìn)樣口前，途經(jīng)流動相；保護(hù)柱是進(jìn)樣口后分析柱前，途經(jīng)樣品和流動相。 作用不同 ：預(yù)柱則只能起到過濾顆粒物作用，防止顆粒物堵塞色譜柱篩板引起柱壓升高。保護(hù)柱除了可以過濾顆粒物外，因為帶 1厘米長的填料，強(qiáng)保留物質(zhì)就先留在保護(hù)柱的柱芯填料里面，這樣可以避免色譜柱被強(qiáng)保留物質(zhì)污染。 (4) 液相色譜 檢測器 分類 按檢測原理： 光學(xué)檢測器（如 紫外、熒光、示差折光、蒸發(fā)光散射 ） 熱學(xué)檢測器 (如吸附熱） 電化學(xué)學(xué)檢測器（如庫倫、安培） 電學(xué)檢測器（電導(dǎo)、介電常數(shù)） 按測量性質(zhì)： 通用型檢測器（如示差折光、蒸發(fā)光散射檢測器） 專屬型檢測器（如紫外、熒光檢測器） 按檢測方式： 濃度型檢測器 質(zhì)量型檢測器 著重介紹四種檢測器：紫外檢測器（光電二極管陣列檢測器）、 示差折光檢測器、熒光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器 工作原理 ：基于朗伯 比爾定律。 即用特定波長的紫外光照射樣品池，通過檢測透光率的變化來測定樣品濃度的檢測器。 它具有波長固定，波長可變和光電二極管陣列三種類型。 a. 紫外檢測器 (UVD)： 應(yīng)用最廣泛的選擇性檢測器。 雙波長紫外檢測器 2487 特點 ：選擇性檢測器， 靈敏度較高（ 109g）， 噪音低。 線性范圍寬， 對流速和溫度波動不靈敏， 適用于梯度洗脫。 光電二極管檢測器（ PDA） 缺點 ：只能檢測有紫外吸收的物質(zhì)。 而且對流動相也有一定的限制， 即流動相的 截止波長 應(yīng)小于檢測波長。 溶 劑 UV截止波長（ nm） 乙 腈 190 水 190 環(huán) 己 烷 195 己 烷 200 甲 醇 210
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