高效液相色譜儀ppt課件-wenkub
2023-05-20 07:32:42 本頁面
【正文】 1。當將扳手扳至“進樣 inject”位時，進樣閥的 流路發(fā)生了改變，流動相通過樣品管，將注入的樣品帶入色譜柱進行分析。 定義為英鎊 /平方英寸， 它們之間的換算關系為： 1bar≈ =105Pa ， 145psi = 1Mpa 1psi = = 高壓泵 應具有以下性能 ? 流量穩(wěn)定，精度在 1%左右 ? 輸出壓力高，通常 20~30MPa，最高 50 MPa ? 流量范圍寬，一般在 ~10mL/min范圍內 ? 能抗溶劑腐蝕 ? 壓力波動小、更換溶劑方便、容易清洗、具梯度洗脫 ? 操作方便、容易維修 ? 根據(jù)泵的操作原理不同，分為恒壓泵和恒流泵 氣動放大泵（恒壓泵） 往復泵 （恒流泵）是目前液相色譜使用最普遍的一種 高 壓泵。 特點：高壓、高效、高速 分離對象 ：適用高沸點、熱不穩(wěn)定有機及生化試樣分離分析 （與 GC區(qū)分） 三、流程及主要部件 1. 流程 2. 主要部件 (1) 高壓輸液泵 單元泵 雙 元 泵 高壓泵作用 ：輸送流動相。 也即是貯液瓶中的有機溶劑或緩沖溶液靠 高壓泵 送入色譜柱。其中又分單頭往復泵和雙頭往復泵。 六通進樣閥具有使用方便，進樣量準確等優(yōu)點。L等不同容積， 可以根據(jù)需要選配。 自動進樣器 色譜柱是高效液相色譜的心臟，在 HPLC的使用中， 保持色譜柱的柱效，延長柱子的使用壽命非常重要。 規(guī)格：常規(guī)分析柱 (常量柱 ) 內徑 2～ 5mm(常用 ， )，柱長 10～ 30cm (15cm， 25cm居多） 制備柱 （ 、 30mm、 50mm） 半制備柱（ 〉 5mm， 、 、 10mm） C18柱（ C8柱） SiSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiOOOSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiCH2H3CCH3H2CCH2H2CCH2H2CCH2H3CSiOOOSiCH3H3CCH3 SiCH3H3CCH3HHHHHHH主要是由于修飾到硅膠上的 硅烷化 試劑不同。由于硅膠表面的硅羥基 (SiOH)或其他極性基 團極性較強，因此，分離的次序是依據(jù)樣品中各組分的極性大小，即 極性較弱的組份最先被沖洗出色譜柱；正相色譜使用的流動相極性相 對比固定相低，如正已烷、氯仿 、二氯甲烷等。 常用的反向填 料有 :C18(ODS)、 C8(MOS)、 C4(Butyl)、 C6H5(Phenyl)等。 (4) 液相色譜 檢測器 分類 按檢測原理： 光學檢測器（如 紫外、熒光、示差折光、蒸發(fā)光散射 ） 熱學檢測器 (如吸附熱） 電化學學檢測器（如庫倫、安培） 電學檢測器（電導、介電常數(shù)） 按測量性質： 通用型檢測器（如示差折光、蒸發(fā)光散射檢測器） 專屬型檢測器（如紫外、熒光檢測器） 按檢測方式： 濃度型檢測器 質量型檢測器 著重介紹四種檢測器：紫外檢測器（光電二極管陣列檢測器）、 示差折光檢測器、熒光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器 工作原理 ：基于朗伯 比爾定律。 雙波長紫外檢測器 2487 特點 ：選擇性檢測器， 靈敏度較高（ 109g），
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