【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 程，形成破裂的細(xì)胞壁，代謝旺盛的細(xì)菌才存在肽聚糖的合成，因此此時(shí)有青霉素作用時(shí) 細(xì)胞易死亡。作用機(jī)制：青霉素破壞肽聚糖合成過(guò)程中肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)態(tài)作用。 ？其特點(diǎn)是什么？ 質(zhì)粒 是存在于細(xì)菌染色體外或附加于染色體上的遺傳物質(zhì)。其特點(diǎn)： ① 絕大多數(shù)由共價(jià)閉合環(huán)狀雙螺旋 DNA 分子所構(gòu)成，分子量較細(xì)菌染色體小。 ② 每個(gè)菌體內(nèi)有一個(gè)或幾個(gè)，也可能有很多個(gè)質(zhì)粒。 ③ 質(zhì)?？梢詮木w內(nèi)自行消失，也可通過(guò)物理化學(xué)手段，將其消除或抑制；沒(méi)有質(zhì)粒的細(xì)菌，可通過(guò)接合、轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)等方式，從具有質(zhì)粒的細(xì)菌中獲得，但不能自發(fā)產(chǎn)生。 ④ 質(zhì)粒存在與否，無(wú)損于細(xì)菌生存。但是，許多次生代謝產(chǎn)物如抗生素、色素等的產(chǎn)生、以至芽孢的形成，均受質(zhì)粒的控制。 ⑤ 質(zhì)粒既能自我復(fù)制、穩(wěn)定遺傳，也可插入細(xì)菌染色體中或攜帶的外源 DNA 片段共同復(fù)制增殖；它可通過(guò)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或接合作用單獨(dú)轉(zhuǎn)移，也可攜帶著染色體片段一起轉(zhuǎn)移。質(zhì)粒已成為遺傳工程中重要的運(yùn)載工具之一。 ？ 答：（ 1）采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施成為滅菌，例如各種高溫滅菌措施等。滅菌實(shí)質(zhì)上是殺菌和溶菌兩種，前者指菌體雖死，但形體尚存，后者則是菌體殺死后，其細(xì)胞發(fā)生溶化，消失現(xiàn)象。 （ 2）消毒 從字面意思看，消毒就的消除毒害，這里的毒害就是指?jìng)魅驹椿蛘咧虏≡吹囊馑?。所以，消毒是一種采用教溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的病源菌，而對(duì)消毒的物體基本沒(méi)害的措施。 （ 3）防腐 防腐就是利用某種理化因素完抑制霉菌微生物的生長(zhǎng)繁殖，從而達(dá)到防止食品等發(fā)生霉腐的 措施，措施很多，主要由：低溫。利用低于 4 度以下的低溫以保藏食品，藥品。 缺氧。采用密閉容器中加入除氧劑來(lái)有效的防止食品和糧食的霉變。變質(zhì)，并達(dá)到保鮮的目的。干燥。采用曬干或紅外線(xiàn)干燥等方法對(duì)糧食，食品等進(jìn)行干燥保藏是 最常見(jiàn)的防止霉變的方法。此外，在密閉條件下，用石灰，無(wú)水氯化鈣，五氧化二磷，農(nóng)硫酸，氫氧化鈉也可達(dá)到食品藥品和器材等長(zhǎng)期防腐霉的目的。高滲。通過(guò)鹽腌和糖漬措施來(lái)保存各種食物，是在民間流傳已久的防腐方法。 (4)高酸度。 用高酸度也可達(dá)到到防腐的目的。泡菜是利用乳酸菌厭氧發(fā)酵使新鮮蔬菜產(chǎn)生大量乳品，借以達(dá)到抑制雜菌和長(zhǎng)期保存的目的。 防腐劑。在有些食品。調(diào)味品，飲料和器材中，可以加入適量的防腐劑以達(dá)到防霉變的目的。如化妝品可加入山梨酸，脫氫醋酸等來(lái)防腐等。 6．細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)分哪幾個(gè)時(shí)期？各時(shí)期有何特征及在工 業(yè)發(fā)酵中的應(yīng)用。 延滯期 ,指數(shù)期 ,穩(wěn)定期 ,衰亡期 （ 1）延遲期：菌數(shù)沒(méi)有增加，細(xì)胞大量合成細(xì)胞物質(zhì)，準(zhǔn)備分裂。生產(chǎn)上要盡量縮短該時(shí)期，如應(yīng)用處于對(duì)數(shù)期的菌體接種，適當(dāng)增大接種量，培養(yǎng)基成分盡量與種子培養(yǎng)基一致； （ 2） 對(duì)數(shù)期：菌數(shù)以指數(shù)增加。是研究微生物生理、遺傳的好材料，是作菌種的好材料，是噬菌體的適當(dāng)宿主； (3)穩(wěn)定期：菌體生長(zhǎng)速度和死亡速度相等，菌體量達(dá)到最大。以培養(yǎng)菌體為目的時(shí)，可結(jié)束培養(yǎng)；開(kāi)始積累次級(jí)代謝產(chǎn)物，以生產(chǎn)次級(jí)代謝產(chǎn)物為目的時(shí)，應(yīng)通過(guò)調(diào) pH 值，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基等方式，延長(zhǎng)該時(shí)期； (4)衰亡期：菌數(shù)以指數(shù)下降。要及時(shí)放罐，避免菌體自溶，不利后處理。 2． pH 值對(duì)微生物生長(zhǎng)有何影響？環(huán)境中的酸堿度通常以氫離子濃度的負(fù)對(duì)數(shù)即 pH 值來(lái)表示。環(huán)境中的 pH值對(duì)微生物的生命活動(dòng)影響很大，主要作用在于：引起細(xì)胞膜電荷的變化，從而影響了微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收；影響代謝過(guò)程中酶的活性；改變生長(zhǎng)環(huán)境中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的可給性以及有害物質(zhì)的毒性。每種微生物都有其最適 pH 值和一定的 pH 范圍。在最適范圍內(nèi)酶活性最高，如果其他條件適合，微生物的生長(zhǎng)速率也最高。大多數(shù)細(xì)菌、藻類(lèi)和原生動(dòng)物的最適 pH 為，在 pH 410 之間也可以生長(zhǎng)；放線(xiàn)菌一般在微堿性即 最適合；酵母菌、霉菌則適合于 pH56 的酸性環(huán)境，但生存范圍在 之間。有些細(xì)菌甚至可在強(qiáng)酸性或強(qiáng)堿性環(huán)境中生活。微生物在基質(zhì)中生長(zhǎng)，代謝作用改變了基質(zhì)中氫離子濃度。隨著環(huán)境pH 值的不斷變化，微生物生長(zhǎng)受阻，當(dāng)超過(guò)最低或最高 pH 值時(shí)，將引起微生物的死亡。為了維持微生物生長(zhǎng)過(guò)程中 pH 值的穩(wěn)定，配制培養(yǎng)基時(shí)要注意調(diào)節(jié) pH 值，而且往往還要加入緩沖物以保證 pH 在微生物生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中的相對(duì)穩(wěn)定。強(qiáng)酸和強(qiáng)堿具有殺菌力。無(wú)機(jī)酸殺菌力雖強(qiáng)，但腐蝕性大。某些有 機(jī)酸如苯甲酸可用做防腐劑。強(qiáng)堿可用作殺菌劑，但由于它們的毒性大，其用途局限于對(duì)排泄物及倉(cāng)庫(kù)、棚舍等環(huán)境的消毒。強(qiáng)堿對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌與病毒比對(duì)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌作用強(qiáng)。 微生物學(xué) 試題 （ 四）答案： 一．翻譯題（每個(gè) 1 分，共 5 分） Bacillus subtilis Flagella 3 .Actinomyces 放線(xiàn)菌 4． disinfection 消毒 5. continuous culture 連續(xù)培養(yǎng) 二 .名詞解釋 （ 每題 3 分，共計(jì) 15 分 ） ：凡吸附并侵入細(xì)胞后，將噬菌體的 DNA 整合到宿主染色體組上并可長(zhǎng)期隨宿主 DNA 的復(fù)制而同步復(fù)制，因而在一般情況下不進(jìn)行增殖和引起宿主細(xì)胞裂解的噬菌體稱(chēng)溫和噬菌體。 該細(xì)胞的 F 質(zhì)粒已從游離態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)檎蠎B(tài) ,當(dāng)與 F 菌株相接合時(shí) ,發(fā)生基因重組的頻率非常高 . 3. 根圈：也稱(chēng)根際，指生長(zhǎng)中的植物根系直接影響的土壤范圍 ：某些細(xì)菌在其生長(zhǎng)發(fā)育后期 ,在細(xì)胞內(nèi)形成的一個(gè)圓形或橢圓形、壁厚 抗逆性強(qiáng)的休眠構(gòu)造。 5. 基內(nèi)菌絲：當(dāng)孢子落在固體基質(zhì)表面并發(fā)芽后，就不斷伸長(zhǎng)、分枝并以 放射狀向基質(zhì)表面和內(nèi)層擴(kuò)展，形成大量色淺、較細(xì)的具有吸收營(yíng)養(yǎng)和排泄代謝廢物功能的基內(nèi)菌絲 三 .選擇題（ 每題 2 分，共計(jì) 30 分 ） ： A A 內(nèi)毒素 B 細(xì)胞壁抗原特異性 C 噬菌體的吸附位點(diǎn) D 調(diào)節(jié)陽(yáng)離子進(jìn)出細(xì)胞 2. 下述細(xì)菌能通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器的是： C A 大腸桿菌 B 立克次氏體 C 支原體 D 分枝桿菌 3. 下述反應(yīng)中那種物質(zhì)被氧化： （ B） 乙醛 + NA DH + H+ → 乙醇 + NAD+ A 乙醛 B NA DH C NAD+ D 乙醇 4. 通過(guò)有氧代謝，下述那個(gè)反應(yīng)產(chǎn)生的 ATP 最多： B A 葡萄糖 → 6 磷酸葡萄糖 B 葡萄糖 → 丙酮酸 C 琥珀酸 → 延胡索酸 .某生物在有氧和無(wú)氧時(shí)均可生長(zhǎng)，并可利用氧，它屬于：（ D） A 微好氧 B 好氧 C 厭氧 D 兼厭氧 5．一個(gè)細(xì)菌每 10 分鐘繁殖一代，經(jīng) 1 小時(shí)將會(huì)有多少個(gè)細(xì)菌：（ A） A 64 B 32 C 9 D 1 6．下述那個(gè)時(shí)期細(xì)菌群體倍增時(shí)間最快 （ C） A 穩(wěn)定期 B 衰亡期 C 對(duì)數(shù)期 D 延滯期 ，敘述不正確的是（ A ） 8. 下列敘述中正確的說(shuō)法是（ B ） 。 。 Staphylococcus aureus,其中 aureus 屬名， Staphyloccus 是種名 。 ：（ D） A 亞硝酸 B 烷化劑 C 堿基類(lèi)似物 D 丫啶類(lèi)染料 ：（ C） A F+ x F B Hfr x F+ C Hfr x F D F+ x F 11. 趨化性是指微生物能夠 C A 與土壤表面粘著 B 逃避噬菌作用 C 向化學(xué)刺激運(yùn)動(dòng)或避 D 在不利條件下求 生存 12. 用光學(xué)顯微鏡可辨別原核和真核細(xì)胞之間不同的是 D A 核糖體 B 鞭毛 C 細(xì)胞膜 D 核 1致病性革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁組成中具有 ( C ) A ( C ) 15. 質(zhì)粒： D A 與接合沒(méi)有關(guān)系 B 和染色體同時(shí)復(fù)制 C 對(duì)生物的生存是必須的 D 通過(guò)接合可在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移 四 .判斷題（每個(gè) 1 分，共 10 分） 1. O特異側(cè)鏈決定 G+菌細(xì)胞壁抗原特異性。（ 正確 ） 2. 芽孢形成過(guò)程中，芽孢衣形成在前，前芽孢形成在后（錯(cuò)誤 ） 。（ 錯(cuò)誤 ） 4..放線(xiàn)菌的繁殖方式主要是芽殖。（ 錯(cuò)誤 ） Staphylococcus aureus,其中 aureus 屬名，是拉丁文的名詞，Staphyloccus 是種名，是拉丁文的形容詞。（錯(cuò)誤） 6 發(fā)酵和呼吸一樣都需要 O2。（ 錯(cuò)誤 ） 7..青霉素可抑制肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)肽作用，從而殺死細(xì)菌。（ 錯(cuò)誤 ） 8. 濕熱 滅菌時(shí)間要比干熱滅菌時(shí)間短。（ 正確 ） 9. 微生物從一個(gè)細(xì)胞繁殖得到的后代稱(chēng)為該微生物的純培養(yǎng)（正確） 10. 微波、超聲波、紫外線(xiàn)都可用于殺菌。（正確） 五 .問(wèn)答題（ 1— 4 題每個(gè) 5 分， 5— 6 題各 10 分，共 40 分） 配制培養(yǎng)基的原則： ① 目的明確； ② 營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)； ③ 理化適宜； ④ 經(jīng)濟(jì)節(jié)約。配制培養(yǎng)基的步驟：原料稱(chēng)量、溶解（加瓊脂） → （過(guò)濾） → 定容 → 調(diào) pH → 分裝 → 加棉塞、包扎 → 滅菌 → （擺斜面） → 無(wú)菌檢查 2. 防止菌種衰退的措施有哪些？ ① 控制菌種傳代 次數(shù)； ② 創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件； ③ 利用不易衰退的細(xì)胞移種傳代； ④ 采用有效的菌種保藏方法； ⑤ 講究菌種選育技術(shù)； ⑥ 定期進(jìn)行分離純化。 3. 青霉素抑制 G＋的機(jī)理是什么。 答：青霉素抑制肽聚糖的合成過(guò)程，形成破裂的細(xì)胞壁，代謝旺盛的細(xì)菌才存在肽聚糖的合成，因此此時(shí)有青霉素作用時(shí)細(xì)胞易死亡。作用機(jī)制：青霉素破壞肽聚糖合成過(guò)程中肽尾與肽橋間的轉(zhuǎn)態(tài)作用。 ？其特點(diǎn)是什么？ 質(zhì)粒 是存在于細(xì)菌染色體外或附加于染色體上的遺傳物質(zhì)。其特點(diǎn)： ① 絕大多數(shù)由共價(jià)閉合環(huán)狀雙螺旋 DNA 分子所構(gòu)成，分 子量較細(xì)菌染色體小。 ② 每個(gè)菌體內(nèi)有一個(gè)或幾個(gè)，也可能有很多個(gè)質(zhì)粒。 ③ 質(zhì)?？梢詮木w內(nèi)自行消失，也可通過(guò)物理化學(xué)手段，將其消除或抑制；沒(méi)有質(zhì)粒的細(xì)菌，可通過(guò)接合、轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)導(dǎo)等方式，從具有質(zhì)粒的細(xì)菌中獲得，但不能自發(fā)產(chǎn)生。 ④ 質(zhì)粒存在與否，無(wú)損于細(xì)菌生存。但是，許多次生代謝產(chǎn)物如抗生素、色素等的產(chǎn)生、以至芽孢的形成，均受質(zhì)粒的控制。 ⑤ 質(zhì)粒既能自我復(fù)制、穩(wěn)定遺傳，也可插入細(xì)菌染色體中或攜帶的外源 DNA 片段共同復(fù)制增殖；它可通過(guò)轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或接合作用單獨(dú)轉(zhuǎn)移，也可攜帶著染色體片段一起轉(zhuǎn)移。質(zhì)粒已成為遺傳工程中重要的 運(yùn)載工具之一。 ？ 答：（ 1）采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施成為滅菌，例如各種高溫滅菌措施等。滅菌實(shí)質(zhì)上是殺菌和溶菌兩種，前者指菌體雖死，但形體尚存，后者則是菌體殺死后，其細(xì)胞發(fā)生溶化，消失現(xiàn)象。 （ 2）消毒 從字面意思看，消毒就的消除毒害，這里的毒害就是指?jìng)魅驹椿蛘咧虏≡吹囊馑肌Ｋ?，消毒是一種采用教溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的病源菌，而對(duì)消毒的物體基本沒(méi)害的措施。 （ 3）防腐 防腐就是利 用某種理化因素完抑制霉菌微生物的生長(zhǎng)繁殖，從而達(dá)到防止食品等發(fā)生霉腐的 措施，措施很多，主要由：低溫。利用低于 4 度以下的低溫以保藏食品，藥品。 缺氧。采用密閉容器中加入除氧劑來(lái)有效的防止食品和糧食的霉變。變質(zhì)，并達(dá)到保鮮的目的。干燥。采用曬干或紅外線(xiàn)干燥等方法對(duì)糧食，食品等進(jìn)行干燥保藏是最常見(jiàn)的防止霉變的方法。此外，在密閉條件下，用石灰，無(wú)水氯化鈣，五氧化二磷，農(nóng)硫酸，氫氧化鈉也可達(dá)到食品藥品和器材等長(zhǎng)期防腐霉的目的。高滲。通過(guò)鹽腌和糖漬措施來(lái)保存各種食物，是在民間流傳已久的防腐方法。 (4)高酸度。 用 高酸度也可達(dá)到到防腐的目的。泡菜是利用乳酸菌厭氧發(fā)酵使新鮮蔬菜產(chǎn)生大量乳品，借以達(dá)到抑制雜菌和長(zhǎng)期保存的目的。 防腐劑。在有些食品。調(diào)味品，飲料和器材中，可以加入適量的防腐劑以達(dá)到防霉變的目的。如化妝品可加入山梨酸，脫氫醋酸等來(lái)防腐等。 6．細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)分哪幾個(gè)時(shí)期？各時(shí)期有何特征及在工業(yè)發(fā)酵中的應(yīng)用。 延滯期 ,指數(shù)期 ,穩(wěn)定期 ,衰亡期 （ 1） 延遲期：菌數(shù)沒(méi)有增加，細(xì)胞大量合成細(xì)胞物質(zhì)，準(zhǔn)備分裂。生產(chǎn)上要盡量縮短該時(shí)期，如應(yīng)用處于對(duì)數(shù)期的菌體接種，適當(dāng)增大接種量，培養(yǎng)基成分盡量與種子培養(yǎng)基一致； （ 2）對(duì)數(shù) 期：菌數(shù)以指數(shù)增加。是研究微生物生理、遺傳的好材料，是作菌種的好材料，是噬菌體的適當(dāng)宿主； (3)穩(wěn)定期：菌體生長(zhǎng)速度和死亡速度相等，菌體量達(dá)到最大。以培養(yǎng)菌體為目的時(shí)，可結(jié)束培養(yǎng)；開(kāi)始積累次級(jí)代謝產(chǎn)物，以生產(chǎn)次級(jí)代謝產(chǎn)物為目的時(shí)，應(yīng)通過(guò)調(diào) pH 值，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基等方式