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正文內(nèi)容

微生物學(xué)和微生物學(xué)檢驗(yàn)的課程簡(jiǎn)介(編輯修改稿)

2025-05-04 03:29 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 。致病性與免疫性,微生物學(xué)檢查及防治原則。梅毒螺旋體:形態(tài)染色、培養(yǎng)特性、抗原構(gòu)造。致病性與免疫性,微生物學(xué)檢查及防治原則。[基本內(nèi)容]一、生物學(xué)性狀1. 形態(tài)與結(jié)構(gòu) 2. 培養(yǎng)特性 3. 抗原結(jié)構(gòu) 4. 抵抗力二、臨床意義1. 性傳播疾病 2. 自然疫源性疾病 三、微生物學(xué)檢查 1. 鉤端螺旋體 2. 梅毒螺旋體和雅司螺旋體 3. 伯氏螺旋體 4. 其他螺旋體第二十二章 立克次氏體[教學(xué)學(xué)時(shí)] 。[重點(diǎn)] 熟悉立克次氏體的共同特性、主要病原性立克次氏體的傳播方式與致病特點(diǎn)、血清學(xué)試驗(yàn)(外裴氏試驗(yàn))。[要點(diǎn)與基本要求]概述:主要種類及主要特點(diǎn):形態(tài)染色、培養(yǎng)特性、抗原結(jié)構(gòu)、抵抗力、致病性與免疫性。主要病原性立克次氏:普氏及莫氏立克次氏體、恙蟲(chóng)病立克次氏體、Q熱柯克斯體的傳播方式與致病特點(diǎn)、微生物學(xué)檢查。[基本內(nèi)容]一、命名與分類二、生物學(xué)性狀 1. 形態(tài)與結(jié)構(gòu) 2. 繁殖與代謝 3. 抗原成分 4. 變異性 5. 生活力與抵抗力三、臨床意義 1. 立克次體病 2. Q熱 3. 桿菌性血管瘤桿菌性紫癜和貓抓病 4. 埃立克體病四、 微生物學(xué)檢查1. 標(biāo)本采集與處理 2. 直接檢出 3. 分離與鑒定 4. 血清學(xué)診斷5. 實(shí)驗(yàn)室檢查法評(píng)價(jià)第二十三章 衣原體[教學(xué)學(xué)時(shí)] 1學(xué)時(shí)。[重點(diǎn)] 熟悉衣原體的主要種類及主要特性,掌握衣原體沙眼變種的致病性,微生物學(xué)檢查。[要點(diǎn)與基本要求]概述:主要種類及主要特點(diǎn):發(fā)育周期與形態(tài)染色、培養(yǎng)特征、抗原結(jié)構(gòu)、抵抗力。主要病原性衣原體:沙眼生物變種的致病性與免疫性,微生物學(xué)檢查,性病淋巴肉芽腫生物變種的致病性。[基本內(nèi)容]一、命名與分類二、生物學(xué)性狀 1. 生活周期 2. 抗原成分 3. 抵抗力三、臨床意義 1. 沙眼衣原體感染 2. 鸚鵡熱 3. 肺炎衣原體感染四、微生物學(xué)檢查 1. 標(biāo)本采集與處理 2. 直接檢出 3. 分離與鑒定 4. 血清學(xué)診斷第二十四章 病毒學(xué)檢驗(yàn)病毒的基本形狀[授課學(xué)時(shí)] 1學(xué)時(shí)[學(xué)習(xí)重點(diǎn)] 病毒的大小、型態(tài)、結(jié)構(gòu)、增殖;噬菌體和亞病毒的有關(guān)特性。[基本概念]1.病毒:是一類體積極小的非細(xì)胞型微生物。2.病毒體:是具有完整病毒典型形態(tài)結(jié)構(gòu)和感染性的成熟病毒顆粒。3.復(fù)制周期:動(dòng)物病毒的復(fù)制,一般可分為吸附、穿入、脫殼、生物合成、組裝與成熟、釋放等6個(gè)階段,稱為復(fù)制周期。4.頓挫感染:病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后,如細(xì)胞缺乏病毒復(fù)制所需的酶、能量和原料,病毒在其中則不能合成自己所需的成分,或雖能合成部分或全部的核酸與蛋白質(zhì),但不能組裝與釋放有感染性的病毒顆粒,稱為頓挫感染。5.缺損病毒:由于病毒基因組不完整或基因位點(diǎn)改變,病毒核酸復(fù)制時(shí)失去了正常的互補(bǔ)作用,使mRNA正常功能受阻,病毒蛋白質(zhì)的合成失調(diào),因而復(fù)制出不完整無(wú)感染性的病毒,稱為缺損病毒。6.輔助病毒:當(dāng)缺損病毒與另一種病毒共同培養(yǎng)時(shí),若后者能為缺損病毒提供所缺少的物質(zhì),使缺損病毒能增值出完整有感染性的病毒體,這種有輔助作用的病毒稱為輔助病毒。6.干擾現(xiàn)象:當(dāng)兩種不同的病毒或兩株性質(zhì)不同的同種病毒,同時(shí)或先后感染同一細(xì)胞或機(jī)體時(shí),可發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象,稱為病毒的干擾現(xiàn)象。7.干擾素:病毒作用于宿主細(xì)胞可誘生一種糖蛋白,具有廣譜抗病毒作用,稱干擾素。8.亞病毒:將具有病毒核酸或僅有蛋白質(zhì)的感染性活體,暫分類為亞病毒。屬于非典型病毒,包括類病毒、擬病毒、和朊病毒。[基本要點(diǎn)]注意學(xué)習(xí)以下內(nèi)容1.病毒的測(cè)量單位:納米2.病毒的形態(tài):球形或近球形、桿狀、絲狀、彈形、磚形、蝌蚪形。3.病毒的基本結(jié)構(gòu):核心和衣殼構(gòu)成核衣殼。核心含有一種類型核酸(DNA或RNA),構(gòu)成病毒的基因組。病毒衣殼:是包圍在核酸外面的一層蛋白質(zhì),由數(shù)量不等的殼粒組成。形成三種對(duì)稱型:螺旋對(duì)稱性、20面體立體對(duì)稱型和復(fù)合對(duì)稱型。4.病毒的輔助結(jié)構(gòu):包膜、其它輔助結(jié)構(gòu)(如觸須樣纖維)。5.病毒的增殖:特殊的自我復(fù)制方式,包括吸附、穿入、脫殼、生物合成、組裝與成熟、釋放6個(gè)階段。6.兩種病毒感染同一宿主細(xì)胞時(shí)的增殖情況:雙重感染、互補(bǔ)作用、加強(qiáng)作用、表型混合、病毒交叉。7.注意學(xué)習(xí)亞病毒的概念、生物學(xué)特性和致病特點(diǎn)。第一節(jié) 病毒的分離與鑒定[授課學(xué)時(shí)] 2學(xué)時(shí) [學(xué)習(xí)重點(diǎn)] 標(biāo)本的采集、運(yùn)送及處理的方法和注意事項(xiàng);病毒分離培養(yǎng)與鑒定的方法。[基本概念]1.組織培養(yǎng):將人或動(dòng)物離體組織塊或分散的活細(xì)胞,模擬體內(nèi)的生理?xiàng)l件在試管或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加以培養(yǎng),使之生存和生長(zhǎng),稱為組織培養(yǎng)。目前一般所指的組織培養(yǎng)多指單層細(xì)胞培養(yǎng)。2.原代細(xì)胞培養(yǎng):采用機(jī)械或胰蛋白酶等處理離體的新鮮組織器官,制成分散的單個(gè)細(xì)胞懸液,加入生長(zhǎng)液后,分裝于培養(yǎng)管中培養(yǎng),活細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)繁殖,數(shù)天后形成單層細(xì)胞,稱原代細(xì)胞培養(yǎng)。3.次代細(xì)胞培養(yǎng):將原代細(xì)胞培養(yǎng)物輕微消化后,再洗下分裝至含新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)管中繼續(xù)培養(yǎng),即為次代培養(yǎng)。4.二倍體細(xì)胞株:原代細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次傳代仍能保持二倍體特性,稱為二倍體細(xì)胞株。5.傳代細(xì)胞系:來(lái)源于腫瘤細(xì)胞或細(xì)胞株在傳代過(guò)程中變異的細(xì)胞系,是能在體外無(wú)限傳代的細(xì)胞系。6.細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE):病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖后,由病毒引起的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,稱為細(xì)胞病變效應(yīng)。[基本要點(diǎn)]注意學(xué)習(xí)以下內(nèi)容:1.病毒檢驗(yàn)的大致程序:臨床標(biāo)本 → 分離培養(yǎng) → 初步鑒定 → 最后鑒定。2.標(biāo)本的采集運(yùn)送及處理:發(fā)病初期從感染部位采集足量標(biāo)本,低溫運(yùn)送、保存,盡快送檢,分離培養(yǎng)前去除標(biāo)本中的沉渣、細(xì)菌、真菌和毒性物質(zhì)等,必要時(shí)需濃縮、提純。3.病毒分離培養(yǎng)方法:包括組織培養(yǎng)、雞胚接種、動(dòng)物接種。4.根據(jù)細(xì)胞的來(lái)源、染色體特性及傳代次數(shù),細(xì)胞培養(yǎng)可分為三種類型:原代和次代細(xì)胞培養(yǎng)、二倍體細(xì)胞株、傳代細(xì)胞系。其中傳代細(xì)胞系的增殖特性類似于惡性腫瘤細(xì)胞,不能用于疫苗生產(chǎn),可選擇性地用于病毒的分離、鑒定等研究。5.雞胚接種常用于粘液病毒、皰疹病毒、痘類病毒等的原代培養(yǎng),也可選擇性地用于疫苗生產(chǎn)。根據(jù)病毒種類的不同,接種病毒的部位也各異,包括雞胚尿囊腔接種、羊膜腔接種、卵黃囊接種和絨毛尿囊膜接種。6.動(dòng)物接種分離病毒需要選擇敏感動(dòng)物及合適的接種部位。7.病毒的初步鑒定依據(jù):動(dòng)物感染范圍及潛伏期、對(duì)雞胚的敏感性、細(xì)胞形態(tài)變化類型、紅細(xì)胞吸附、病毒干擾現(xiàn)象、血凝性質(zhì)、理化性質(zhì)(核酸類型測(cè)定、大小形態(tài)、乙醚敏感試驗(yàn)、耐酸試驗(yàn))8.病毒的最后鑒定依據(jù):主要是血清學(xué)方法(中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn))和分子生物學(xué)方法。9.分離病毒的病原學(xué)意義(1)從人體組織、腦脊液、血液、眼部、水泡液分離到任何病毒均可認(rèn)為具有高度病原學(xué)意義。尿液中檢出病毒也具有病原學(xué)診斷意義。(2)從呼吸道、陰道、腸道標(biāo)本分離病毒的病原學(xué)意義需要考慮這些病毒是否有無(wú)癥狀攜帶者和長(zhǎng)期排毒者。如果同時(shí)從同一病人的多個(gè)部位分離到同一種病毒,其病原學(xué)意義較大;如果僅從某種標(biāo)本分離到病毒,病原學(xué)意義則較小。(3)分離培養(yǎng)呈陰性結(jié)果時(shí),應(yīng)考慮細(xì)胞的敏感性、是否有細(xì)菌或真菌的污染、是否接種量或病毒含量過(guò)低等。(4)結(jié)合恢復(fù)期血清滴度與急性期血清滴度之比值判斷所分離到的病毒與某一特定疾病的關(guān)系。第二節(jié) 病毒血清學(xué)診斷[授課學(xué)時(shí)] 2學(xué)時(shí) [學(xué)習(xí)重點(diǎn)] 重點(diǎn)學(xué)習(xí)各種血清學(xué)診斷方法的原理和檢測(cè)意義。[基本概念]1.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):應(yīng)用抗原與抗體特異性結(jié)合后,能激活補(bǔ)體的原理而設(shè)計(jì)的方法。包括2個(gè)抗原抗體系統(tǒng)和補(bǔ)體5個(gè)成分,其中病毒特異性抗原與抗體為反應(yīng)系統(tǒng),綿羊紅細(xì)胞與溶血素為指示系統(tǒng)。當(dāng)病毒抗原與抗體特異性結(jié)合,則加入的定量補(bǔ)體被結(jié)合,指示系統(tǒng)因無(wú)補(bǔ)體而不發(fā)生溶血,是為陽(yáng)性結(jié)果。否則出現(xiàn)溶血為陰性結(jié)果。2.中和試驗(yàn):是病毒在細(xì)胞培養(yǎng)中或在活體內(nèi)被特異性抗體中和,使病毒失去感染性的一種試驗(yàn)。3.血凝抑制試驗(yàn):許多病毒,在一定溫度條件下,能夠凝集一定種類動(dòng)物(雞、鴿子、豚鼠、人類)的紅細(xì)胞,稱為血凝現(xiàn)象。這種現(xiàn)象能被特異性抗體所抑制,稱為血凝抑制試驗(yàn)。4.間接免疫熒光檢測(cè):實(shí)驗(yàn)體系包括病毒抗原 + 抗體 + 熒光素標(biāo)記的抗抗體,在熒光顯微鏡下觀察熒光的強(qiáng)弱。[基本要點(diǎn)] 對(duì)于各種血清學(xué)方法,都應(yīng)注意學(xué)習(xí)其原理、方法和檢測(cè)意義??捎靡阎贵w診斷未知病毒抗原,也可用已知病毒抗原檢則相應(yīng)抗體的滴度。1.補(bǔ)體結(jié)合抗體出現(xiàn)早、消失快,可用于早期診斷,也可用已知抗體鑒定分離的病毒及其型別。2.中和試驗(yàn)可用來(lái)檢查患病后或人工免疫后,機(jī)體血清中抗體增長(zhǎng)情況,以便于輔助診斷和免疫效果評(píng)價(jià);也可用已知抗體鑒定病毒。試驗(yàn)中所用病毒量為100TCID50。3.血凝抑制試驗(yàn)常用于正粘病毒和副粘病毒感染的診斷和病毒亞型鑒定及抗原變異的檢測(cè)。4.熒光試驗(yàn)方法包括直接法和間接法,臨床血清學(xué)診斷常用間接法。5.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定的基本原理同免疫熒光檢測(cè),只是標(biāo)記物為辣根過(guò)氧化物酶或堿性磷酸酶。第三節(jié) 病毒感染早期診斷[授課學(xué)時(shí)] 2學(xué)時(shí) [學(xué)習(xí)重點(diǎn)] 早期診斷的一些常用方法。[基本概念]1.快速特異性診斷:指從患者采集分泌物、滲出物、刮取物、血液、腦脊液、活檢組織等,盡快地在3~4h內(nèi)或者當(dāng)天查出病毒抗原、核酸等。 [基本要點(diǎn)]病毒分離鑒定和血清學(xué)診斷一般需要較長(zhǎng)時(shí)間才能判斷結(jié)果。早期診斷主要是應(yīng)用具有高度特異敏感的快速診斷方
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