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微生物學和微生物學檢驗的課程簡介(文件)

2025-04-25 03:29 上一頁面

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【正文】 血,但在代謝過程中產(chǎn)生的毒素樣物質(zhì)可進入血流引起全身癥狀。(3)快速診斷采用免疫熒光法或酶免疫方法檢測標本病毒抗原;用分子雜交或RTPCR法檢測病毒RNA;免疫電鏡查病毒顆粒;用血清學方法檢測特異性抗體??捎妹庖邔W方法直接檢測標本脫落細胞中的病毒抗原;也可用血清學方法進行診斷,但與其它副粘病毒存在一定的交叉反應。(1)用免疫學方法直接檢查鼻咽上皮細胞中的病毒抗原。(二)臨床意義:可感染人體各個器官,出現(xiàn)相應不同的臨床癥狀;常年流行,主要通過呼吸道傳播和接觸該病毒污染物而感染。2周內(nèi)仍無CPE可進行盲傳。 [基本概念]1.腸道病毒:由微小RNA病毒科中的67種獨特的血清型組成,包括脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒A組和B組、埃可病毒及新型腸道病毒5個亞屬或亞群,各亞群中又分不同血清型。多數(shù)人感染腸道病毒后并不出現(xiàn)癥狀,表現(xiàn)為隱性感染。為區(qū)別脊髓灰質(zhì)炎病毒和其它腸道病毒常用NT、IF和PCR法等。[基本要點]一、生物學特性:HAV屬小RNA病毒科,單正股RNA,只有1個血清型,目前已有多種細胞可用于HAV培養(yǎng),復制周期長,眾多靈長類對HAV敏感。HDV為缺陷病毒,敏感動物有黑猩猩、東方土撥鼠。HBV感染與原發(fā)性肝癌有關(guān)。三、微生物學檢查:HAV感染的糞便標本或肝活檢組織可采用電鏡或IF、EIA檢查,以及PCR和核酸雜交的方法;對于血清標本可用ELISA方法檢查抗HAV IgM和總抗HAV。HEV的檢測標本與檢查方法基本同HAV,但對陰性結(jié)果的判斷要慎重,有時不能排除感染的存在?!Ⅷ澓往Z的紅細胞,在地鼠腎、幼豬腎等原代細胞,以及AP61或C6/36蚊傳代細胞中均能增殖,最易感的動物為乳鼠。(2)血清學診斷:2ME敏感的血凝抑制試驗和IgM抗體捕獲ELISA實驗可用于乙腦的早期診斷;補體結(jié)合抗體恢復期效價上升≥4倍時為陽性;中和試驗僅用于流行病學調(diào)查。病毒分離的方法有巨蚊胸內(nèi)接種、C6/36細胞分離和乳鼠腦內(nèi)接種。3.微生物學檢查用A549和VeroE6進行分離病毒,用間接免疫熒光法檢測特異性IgG和IgM抗體,用RTPCR技術(shù)進行快速診斷。第八節(jié) 皰疹病毒[授課學時] 1學時 [學習重點] 各種皰疹病毒的生物學特性及其微生物學檢查方法。2.HSV1主要感染腰以上部位,原發(fā)性感染多見于嬰幼兒,多為隱性感染,感染后常導致病毒潛伏,潛伏病毒可被激活增殖,可導致復發(fā)性局部皰疹,往往發(fā)生于同一部位。(3)血清學診斷不能用于HSV復發(fā)性診斷,雙份血清抗體的測定有助于原發(fā)性HSV感染的診斷,HSV1和HSV2間存在廣泛的交叉反應。(2)分離培養(yǎng)采用人成纖維細胞,初次分離時常需1個月才出現(xiàn)CPE,可用免疫熒光法進行鑒定。帶狀皰疹僅發(fā)生于曾有水痘病史或隱性感染VZV的人,多見于成人和老人。四、EB病毒1.EB病毒具有皰疹病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征;只能在人及部分靈長類的B細胞內(nèi)或含EB病毒基因組的類淋巴母細胞中增殖;分為A、B兩個血清型;病毒表達抗原包括潛伏期表達抗原和增殖性感染相關(guān)抗原。(2)病毒分離可用不含病毒的胎兒B細胞分離培養(yǎng),并用ACIF進行鑒定。[基本概念]1.內(nèi)基小體:狂犬病毒在易感動物或人的中樞神經(jīng)細胞(主要是大腦海馬回的錐體細胞)中增殖,形成胞漿內(nèi)嗜酸性包涵體,稱內(nèi)基小體。主要有3個傳播途徑。(3)PCR是目前檢測HIV最敏感的方法,有助于HIV感染的早期診斷。三、輪狀病毒(RV)1.RV屬呼腸病毒科,為雙層衣殼,呈車輪狀外觀,核酸為雙股RNA,11個基因片段,根據(jù)VP6核心結(jié)構(gòu)蛋白的特異性將起分為A、B、C、D、E五個組。4.病毒分離培養(yǎng)采用原代猴腎細胞培養(yǎng)后,轉(zhuǎn)種猴腎傳代細胞增殖。(2)用鼠神經(jīng)母細胞瘤進行病毒培養(yǎng),并用DIFA法檢查病毒抗原。3.根據(jù)病史及典型的臨床表現(xiàn)即可診斷,不典型者可做病理學或免役組化檢查,以及PCR檢測,尚不能用組織細胞分離培養(yǎng)。[要點與基本要求]概述:生物學性狀,形態(tài)、結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)、繁殖方式、抵抗力。致病性,微生物學檢查。[基本內(nèi)容]一、真菌及其檢驗的基本特征 1. 生物學性狀 2. 分類與致病 3. 微生物學檢查二、念珠菌和隱球菌及其他醫(yī)學上重要的酵母 1. 念珠菌 2. 隱球菌 3. 其他酵母三、二相性真菌及其他腐生性霉菌 1. 二相性真菌 2. 曲霉菌 3. 毛霉目霉菌四、皮膚真菌 1. 臨床意義 2. 真菌檢驗27 / 27。曲霉菌:致病性。主要致病性真菌:皮膚絲狀菌:形態(tài)培養(yǎng)特性、致病性。[重點]熟悉真菌的主要生物學性狀。五、人乳頭瘤病毒(HPV)1.屬乳多空病毒科,是二十面立體對稱裸病毒,雙股環(huán)狀DNA,有70多個型,具有干擾正常細胞癌抑制蛋白的功能。3.感染動物或人后,引起狂犬病,傷口越深、距頭部越近,潛伏期越短。2.HRV是引起嬰幼兒急性胃腸炎的病原體,經(jīng)糞口傳播。2.可引起多種血液病,HTLVI與成人T細胞白血病淋巴瘤、熱帶下肢痙攣性癱瘓及HTLVI相關(guān)的脊髓病等有關(guān),HTLVII與毛細胞白血病及慢性T4細胞淋巴瘤等有關(guān)。通常是先經(jīng)過2~3次ELISA初篩,再用WB或IFA確證。[基本要點]一、人類免役缺陷病毒(HIV)1.主要生物學特性HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒,有獨特的三層結(jié)構(gòu),核酸為兩條相同的單正股RNA,其復制與一般逆轉(zhuǎn)錄病毒相似,整合在細胞染色體中的前病毒可以非活化方式長期潛伏于宿主細胞內(nèi);該病毒只感染表面有CD4受體的細胞;HIV有兩型,HIVHIV2。方法主要有異嗜性抗體的檢測和特異性抗體檢測。與EB病毒感染有關(guān)的疾病主要有傳染性單核細胞增多癥、非洲兒童惡性淋巴瘤和鼻咽癌。(2)用人胚腎或人胚肺細胞進行分離培養(yǎng),接種物為病灶早期內(nèi)容物,用McAb進行鑒定。三、水痘帶狀皰疹病毒(VZV)1.具有皰疹病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征,只有一個血清型,能在人二倍體腎和肺細胞中增殖,受染細胞出現(xiàn)核內(nèi)嗜酸性包涵體和多核巨細胞。2.感染廣泛,常呈隱性感染,也可導致持續(xù)性感染或潛伏感染,包括先天性感染、產(chǎn)時感染和產(chǎn)后感染。3.微生物學檢查(1)用免疫電鏡、免疫熒光法或酶免疫法直接檢查皰疹液、皮膚粘膜病灶刮取物、活檢組織中的病毒或特異性抗原。一、單純皰疹病毒(HSV)1.能在多種細胞中增殖,有原代細胞(兔腎、貂肺、人胚肺或腎)、二倍體細胞和傳代細胞(HepBHK21等),形成典型CPE??梢鹦陆鲅獰?,但無腎綜合征。四、漢坦病毒1.主要生物學特性為布尼亞病毒科漢坦病毒屬,單負股RNA包膜病毒,呈多形態(tài)性,包膜上有血凝素;可在A54VeroE6及地鼠腎細胞中生長;黑線姬鼠、小鼠、乳鼠對其敏感,鼠肺和腎中可檢出大量病毒;國際上確認的血清型有漢坦病毒(HTN)、漢城病毒(SEO)、普馬拉病毒(PUV)、希望山病毒(PH)。二、森林腦炎病毒傳播媒介為森林硬蜱,屬自然疫源性疾?。恍∈蠛碗u胚對其敏感;微生物學檢查方法與乙腦病毒相似。3.微生物學檢查:(1)分離與鑒定:采用乳鼠腦內(nèi)接種和金黃地鼠腎原代細胞及蚊傳代細胞進行分離培養(yǎng),用交叉中和試驗、血凝抑制試驗等進行鑒定,也可用IFA對細胞培養(yǎng)物進行鑒定。[基本概念]蟲媒病毒:是指一大群通過吸血的節(jié)肢動物叮咬人、家畜及野生動物而傳播疾病的病毒,具有自然疫源性。HCV檢測標本主要是血清與血漿,檢查方法主要有兩類:血清學方法(EIA或RIA)測定抗HCV及PCR法測定HCV RNA,并進行基因分型。HDV感染的傳播途徑與HBV相似,只在感染了HBV的人中才能發(fā)生,與 HBV可同時感染,也可重疊感染,引起嚴重或進行性肝病。二、臨床意義:HAV通過消化道感染,引起隱性感染或急性肝炎癥狀。尚不能用細胞培養(yǎng),少數(shù)靈長類動物對其敏感。第六節(jié) 肝炎病毒[授課學時] 1學時 [學習重點] 常見肝炎病毒的生物學特性及其檢驗方法。2.病毒的分離與鑒定:多種傳代細胞對腸道病毒敏感,CPE典型。二、臨床意義:腸道病毒從消化道侵入,并在整個消化道中增殖,病毒侵入血流,進入腸道外組織增殖,不同的腸道病毒對各種器官組織的嗜性不同,引起腸外多器官系統(tǒng)的疾病。4.血清學診斷:可用 CF、EIA、HI、NT等試驗方法。2.直接檢查病毒抗原與核酸:可采用電鏡和免疫電鏡、免疫熒光和酶免疫試驗、PCR與核酸電泳的方法。(3)血清學診斷除檢測IgG外,尚能檢測急性期血清中IgM、IgA抗體,進行早期診斷。2.臨床意義:經(jīng)呼吸道傳播,引起上呼吸道感染,繼而引起下呼吸道感染,感染嬰兒有時會出現(xiàn)呼吸暫停。2.臨床意義:通過呼吸道傳播,引起上呼吸道感染。3.微生物檢查(1)于發(fā)病頭3天內(nèi)采集鼻腔洗液、咽拭子、鼻拭子、喉拭子等標本。[基本要點]常見的呼吸道病毒有正粘病毒科的流感病毒,副粘病毒科的副流感病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒,以及腺病毒、冠狀病毒、風疹病毒、呼腸病毒等。[基本概念]1.呼吸道病毒:是一群能侵犯呼吸道的病毒。通過光學顯微鏡用組織、細胞學方法檢查感染組織或脫落細胞中的特征性病毒包涵體(包括包涵體的位置和染色性)。試驗時必須設嚴格的對照,才能作出準確的判斷。 [基本要點]病毒分離鑒定和血清學診斷一般需要較長時間才能判斷結(jié)果。4.熒光試驗方法包括直接法和間接法,臨床血清學診斷常用間接法。1.補體結(jié)合抗體出現(xiàn)早、消失快,可用于早期診斷,也可用已知抗體鑒定分離的病毒及其型別。這種現(xiàn)象能被特異性抗體所抑制,稱為血凝抑制試驗。當病毒抗原
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