微生物學(xué)-病毒(編輯修改稿)
2024-09-11 22:04 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 膜糖蛋白，具有多種生物學(xué)活性，是啟動病 毒感染所必需的。 有包膜的病毒 第二節(jié) 病毒 的性質(zhì) 一、病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu) 病毒 的結(jié)構(gòu)類型 四種主要結(jié)構(gòu)類型 裸露的二十面體； 裸露的螺旋； 有包膜的二十面體； 有包膜的螺旋； 有些病毒，如有尾噬菌體、痘病毒等結(jié)構(gòu)更為復(fù)雜，不能包括 在這些結(jié)構(gòu)類型之內(nèi)。 不同病毒的毒粒結(jié)構(gòu)復(fù)雜程度有很大的區(qū)別 第三節(jié) 病毒的復(fù)制 病毒的特點： 嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生物，只能在活細胞內(nèi)繁殖。 毒粒 宿主細胞 有繁殖性的病毒基因組 具有感染性的毒粒消失 病毒基因組復(fù)制、表達 病毒核酸和蛋白質(zhì) 裝配形成具有感染性的毒粒 釋放至細胞外 原料； 能量； 生物合成場所； 第三節(jié) 病毒的復(fù)制 病毒的復(fù)制： 病毒感染敏感宿主細胞后，病毒核酸進入細胞，通過其復(fù)制與 表達產(chǎn)生子代病毒基因組和新的蛋白質(zhì)，然后由這些新合成的 病毒組分裝配（ assembly）成子代毒粒，并以一定方式釋放到 細胞外。病毒的這種特殊繁殖方式稱做復(fù)制（ replication）。 第三節(jié) 病毒的復(fù)制 一、病毒的復(fù)制周期 一步生長曲線（ one step growth curve） 1939年， Max Delbruck amp。 Emory Ellis： E. coli / bacteriopage 用噬菌體的稀釋液感染高濃度的宿主細胞； 數(shù)分鐘后，加入抗噬菌體的抗血清 （ 中和未吸附的噬菌體 ） ； 將上述混合物大量稀釋，終止抗血清的作用和防止新釋放 的噬菌體感染其它細胞； 保溫培養(yǎng)并定期檢測培養(yǎng)物中的噬菌體效價（ 對噬菌體含量 進行計數(shù) ）； 以感染時間為橫坐標(biāo)，病毒的感染效價為縱坐標(biāo)，繪制出 病毒特征性的繁殖曲線； 該實驗標(biāo)志著分子病毒學(xué)、分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的建立 Max Delbruck因此榮獲 1969年 Nobel Prize 一、病毒的復(fù)制周期 一步生長曲線（ one step growth curve） 噬菌體復(fù)制（繁殖） 的三個階段： 吸附期； 游離的噬菌體吸附到宿主細胞 潛伏期； 從噬菌體吸附到細胞到釋放 出新噬菌體的最短時期 裂解期； 隨著菌體不斷破裂，新噬菌體 數(shù)目增加，直到最高值 一、病毒的復(fù)制周期 一步生長曲線（ one step growth curve） 取培養(yǎng)物直接測定 病毒數(shù)量 將培養(yǎng)物過濾去細 胞后測定病毒數(shù)量 將細胞裂解后測定病毒的數(shù)量。 前期可將培養(yǎng)物先離心去上清以消除未吸附病毒 的影響 裂解量： 每個受染細胞所產(chǎn)生的子代病毒顆粒的平均數(shù)目。 其值等于潛伏期受染細胞的數(shù)目除以穩(wěn)定期受染細胞所釋放的全部子代病毒數(shù) 目，即等于穩(wěn)定期病毒效價與潛伏期病毒效價之比。 一、病毒的復(fù)制周期 隱蔽期（ eclipse period） 在潛伏期的前一段，受染細胞內(nèi)檢測不到感染 性病毒，后一階段，感染性病毒在受染細胞內(nèi) 的數(shù)量急劇增加。 自病毒在受染細胞內(nèi)消失到細胞內(nèi)出現(xiàn)新的感 染性病毒的時間為為隱蔽期。 隱蔽期病毒在細胞內(nèi)存在的動力學(xué)曲線呈 線性函數(shù) ，而非 指數(shù)關(guān)系 ，從而證明 子代病毒顆粒是由新合成的病毒基因組與蛋白質(zhì)經(jīng)裝配成熟，而不是通過雙分 裂方式產(chǎn)生的。 不同病毒的隱蔽期長短不同， 例如， DNA動物病毒的隱蔽期為 5～ 20小時， RNA動物病毒為 2～ 10小時。 一、病毒的復(fù)制周期 一步生長曲線（ one step growth curve） 一步生長曲線是研究病毒復(fù)制的一個經(jīng)典試驗，最初是為研究噬菌 體的復(fù)制而建立，以后推廣到動物病毒和植物病毒的復(fù)制研究中。 以適量的病毒接種于標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)的高濃度的敏感細胞，待病毒吸附后，離心除去 未吸附的病毒，或以抗病毒抗血清處理病毒 — 細胞培養(yǎng)物以建立同步感染，然 后繼續(xù)培養(yǎng)并定時取樣測定培養(yǎng)物中的病毒效價，并以感染時間為橫坐標(biāo)，病 毒的感染效價為縱坐標(biāo)，繪制出病毒特征性的繁殖曲線，即 一步生長曲線 。 不同病毒的潛伏期長短不同， 噬菌體 以 分鐘 計， 動物病毒 和 植物病毒 以 小時 或 天 計。 潛伏期： 噬菌體 的裂解量一般為 幾十到上百個 ， 植物病毒和動物病毒 可達 數(shù)百乃至上萬個 。 裂解量： 一、病毒的復(fù)制周期 病毒的復(fù)制周期 復(fù)制周期（ replicative circle）或稱復(fù)制循環(huán)： 自病毒吸附于細胞開始，到子代病毒從感染細胞釋放到細胞 外的病毒復(fù)制過程。 ① 吸附； ② 侵入 ； ③ 脫殼；
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