【文章內容簡介】 及原因。 ? 培養(yǎng)基 pH值測定和調節(jié)方法。 實驗三 細菌的分離培養(yǎng)、純化及培養(yǎng)性狀的觀察 ? 一、 目的 ? 通過本次實驗 ,讓學生掌握細菌的分離培養(yǎng)、純化的操作技能，會觀察細菌在培養(yǎng)基上的生長特性。 二、實驗內容 ? （一）細菌的分離培養(yǎng) ? (二 ) 細菌的純化 ? (三 ) 細菌在培養(yǎng)基上的生長特性觀察 三、注意事項 ? 細菌的分離培養(yǎng)必須嚴格無菌操作。 ? 滅菌接種環(huán)在挑取菌落前應在無菌落處冷卻，否則會將所挑的菌落燙死而使培養(yǎng)失敗。 ? 劃線接種環(huán)的環(huán)部應稍微彎曲，劃線用力適度。 ? 不同細菌需要的培養(yǎng)時間相差很大，應根據不同的菌種培養(yǎng)觀察所需時間。 四、實驗報告內容 ? 說明平板劃線法分離培養(yǎng)細菌的方法及注意事項。 ? 描述你的實驗結果并分析原因，描述在操作細菌純化時所取菌落的特征。 實驗四 細菌標本片的制備及染色法 ? 一、 目的 ? 通過本次實驗 ,要求學生掌握細菌標本片的制備及染色方法 二、實驗內容 ? （一） 細菌標本片的制備及染色 ? 1．涂片 ? 2．干燥 ? 3．固定 ? 染色 ? 鏡檢 ? （二）細菌觸片的制備 三、注意事項 ? 作細菌涂片時，不宜涂得過厚，以免影響制片效果。 ? 固定必須確實，火焰固定時溫度不宜過高。 ? 每種染液染色的過程中應保持染色液不干。 ? 每種染液染色后，應用水將染液一起沖掉，不可先將染液傾去后再用水沖洗。 四、實驗報告內容 ? 在實驗報告中應簡述細菌標本片制備及染色的基本操作步驟，并總結自己前面實驗的掌握情況，對今后的學習提出更高的要求。 實驗五 細菌運動性的檢查 ? 一、 目的 ? 通過本次實驗 ,讓學生掌握檢查細菌運動性的常用方法（直接鏡檢法），能觀察到細菌的運動，了解半固體培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)法。 二、實驗內容 ? （一）直接鏡檢法 ? 懸滴檢查法 ? 壓滴檢查法 ? （二）半固體培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)法 三、注意事項 ? 檢查細菌運動性，應選擇幼齡培養(yǎng)物，最好是剛從培養(yǎng)箱中取出的。 ? 鏡檢時，真正的細菌運動表現(xiàn)為菌體能離開原來的位置，不斷改變方向的自由運動。而布朗運動則表現(xiàn)為在原地的不斷擺動。若由于玻片放置不平導致的液滴流動，注意與真正的細菌運動區(qū)分。 四、實驗報告內容 ? 細菌運動性的常用檢查方法及注意事項，并描述真正的細菌運動有什么特征。 第二章 病 毒 病 毒 體積微小、結構簡單、 非細胞型的微生物 。 病毒顆粒 病毒的形態(tài) ? 病毒的形態(tài) ? 病毒的形態(tài) ? 病毒的大小 ? 病毒的基本結構 ? 核衣殼 ? 囊膜 ? 纖突 病毒結構 病毒的增殖 ?一、病毒的感染 ?溶解性相互作用 ?轉化性相互作用 ?二、病毒的增殖 ?吸附 ?穿入 ?脫殼 ?生物合成 ?成熟與釋放 病毒組裝釋放時，將動物的細菌膜作為自己的囊膜 病毒的復制圖示 病毒侵染 病毒的培養(yǎng) ? 動物接種： ? 讓病毒在易感動物體內復制。 ? 胚胎接種 ： ? 接種于雞胚、鴨胚、鵝胚。 ? 組織細胞培養(yǎng)： ? 指體外的組織、器官或細胞培養(yǎng)病毒。 ? 組織培養(yǎng) ? 細胞培養(yǎng) 病毒顆粒 第四節(jié) 病毒的其他特性 ? 干擾現(xiàn)象 ： 在兩種病毒感染同一種細胞時，可發(fā)生一種病毒抑制另一種病毒復制的現(xiàn)象。 ? 干擾素 ： 活細胞受到病毒感染后產生的一種低分子量的糖蛋白。 ? 病毒的血凝現(xiàn)象 ： 許多病毒表面有血凝素，能與雞、豚鼠、人等紅細胞表面受體結合，而出現(xiàn)紅細胞凝集現(xiàn)象。 ? 病毒的濾過特性 ： 由于病毒細小，所以能通過孔徑細小的濾器，這一特性被稱為濾過特性。 第五節(jié) 病毒的一般診斷程序 ? 病料的采集｛ 血液、糞便、滲出液、腦脊液、水皰液 ｝ ? 包涵體檢查： 病毒在細胞內繁殖后，于細胞內形成的一種用光學顯微鏡可以看到的特殊‘斑塊’。 ? 病毒的分離培養(yǎng)： 采取可能含有病毒的材料，接種動物、雞胚或組織培養(yǎng)。 ? 病毒的血清學試驗： 中和試驗 補體結合試驗 病毒的紅細胞凝集和紅細胞凝集抑制試驗 熒光抗體技術 免疫酶標記技術 免疫擴散試驗 第六節(jié) 常見動物病毒 ?口蹄疫病毒 ?狂犬病病毒 ?犬細小病毒 ?豬瘟病毒 ?豬傳染性胃腸炎病毒 ?新城疫病毒 ?小鵝瘟病毒 ?鴨瘟病毒 ?兔出血癥病毒 口蹄疫病毒（ FWDV） ? 該病毒屬于小核糖核酸病毒科中的口瘡病毒屬，單股 RNA病毒 。患病動物的口腔黏膜、舌及蹄部或乳房發(fā)生特征性的水皰，進而破潰，有時引起死亡 。 是當前各國最注意的家畜傳染病之一。 狂犬病病毒 ? 該病毒屬于彈狀病毒科、狂犬病毒屬，單股 RNA病毒。能感染人和各種家畜，病毒侵入神經系統(tǒng)繁殖，出現(xiàn)興奮繼而麻痹的神經癥狀。病毒存在于神經系統(tǒng)和唾液腺中，經咬傷而傳染。發(fā)病人畜一般均死亡，無法治療。 犬細小病毒（ CPV） ? 該病毒屬于細小病毒屬，主要發(fā)生于犬類，病犬嘔吐、腹瀉，白細胞減少，死亡率高達 10%50%。 豬瘟病毒 ? 該病毒屬于披蓋病毒科、瘟疫病毒屬、單股 RNA病毒。只侵害豬，使之發(fā)病，死亡率很高，對養(yǎng)豬業(yè)危害很大。 豬傳染性胃腸炎病毒 （ TGEV） ? 該病屬于冠狀病毒科、冠狀病毒屬，單股 RNA病毒。此病僅發(fā)生于豬，是一種傳播極快的高度接觸性傳染性胃腸道疾病。其臨床特征為嘔吐和嚴重的腹瀉。兩周以內的仔豬發(fā)病率和死亡率較高。 新城疫病毒（ NDV） ? 此病又稱“亞洲雞瘟”，屬副黏病毒科、腮腺病毒屬，RNA病毒。能使雞發(fā)生新城疫，具有高度的傳染性，死亡率在 90%以上，嚴重危害養(yǎng)雞業(yè)。 小鵝瘟病毒（ GPV） ? 該病毒屬于細小病毒科、細小病毒屬，單股 RNA病毒。可使初出殼至 1月齡的雛鵝發(fā)生小鵝瘟。本病傳染性強，病程短而死亡率高，以滲出性腸炎、心肌炎和全身敗血性病變?yōu)樘卣鳌? 鴨瘟病毒（ CPV） ? 該病毒為皰疹病毒科、甲皰疹病毒亞科，雙股 DNA病毒。主要侵害鴨的循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、淋巴器官和實質器官，引起頭、頸部皮下膠樣水腫，消化道黏膜發(fā)生損傷、出血、壞死，形成偽膜，肝有特征性的出血和壞死。 兔出血癥病毒（ RHDV） ? 該病毒是嵌杯樣病毒科、Lagovinrus屬的兔的一種急性高度接觸性傳染病。以呼吸系統(tǒng)出血、實質器官腫脹、淤血及出血性變化為特征。 實驗六 病毒的紅細胞凝集試驗和 凝集抑制試驗 ? 一、 目的 ? 學會病毒的紅細胞凝集試驗和凝集抑制試驗的操作方法。 二、實驗內容 ? 病毒的紅細胞凝集試驗 ? 病毒的紅細胞凝集抑制試驗 三、注意事項 ? 病毒材料稀釋準確。 ? 所采雞血要與抗凝劑混合均勻。 ? 用生理鹽水充分洗去血清和白細胞。 ? 血清一定用免疫雞的血液靜置后所取得。 ? 制作好 4倍血凝單位的病毒稀釋液。 四、實驗報告內容 ? 寫明凝集實驗反應強度的判定標準并對實驗結果做出正確的判斷。 實習七 病毒的雞胚接種 ? 一、 目的 ? 掌握病毒的雞胚培養(yǎng)方法及其目的。學會病毒的雞胚接種技術 二、實驗內容 ? 雞卵的孵育 ? 各種途徑的雞胚接種方法 – 尿囊腔內接種 – 尿囊膜接種 – 卵黃囊接種 – 羊膜腔接種 三、注意事項 – 無菌技術一切用品及操作時必須遵守無菌操作，以減少污染率。 – 細心謹慎操作，避免雞胚損傷死亡。 – 保持培養(yǎng)條件，至少 12周，方可得出正確結論。 ? 無菌試驗毒種試用前和收獲后必須作無菌試驗，確定無菌后方能使用或保藏 四、實驗報告內容 ? 寫明病毒的雞胚培養(yǎng)方法及其注意事項，并描述雞胚接種的過程。 第三章 其他微生物 真菌： 有細胞壁結構、沒有根莖葉分化的異養(yǎng) 型單細胞或多細胞真核微生物。 放線菌： 介于絲狀真菌和細菌之間的以孢子繁殖為主的絲狀多細胞原核型微生物。 支原體 ： 又稱為霉形體。是介于細菌與病毒之間、無細胞壁、能獨立生活的最小的單細胞原核微生物。 螺旋體 ： 介于細菌與原蟲之間的、菌體彎曲成螺旋狀的單細胞原核型微生物。 立克次氏體： 是介于細菌與病毒之間的以節(jié)肢動物為傳播媒介的專性細胞內寄生的單細胞原核微生物。 衣原體 ： 是介于細菌與病毒之間的不以節(jié)肢動物為傳播媒介、嚴格細胞內寄生的單細胞原核型微生物。 ?