【正文】 ? 一、 目的 ? 學(xué)會(huì)病毒的紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)和凝集抑制試驗(yàn)的操作方法。學(xué)會(huì)病毒的雞胚接種技術(shù) 二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 ? 雞卵的孵育 ? 各種途徑的雞胚接種方法 – 尿囊腔內(nèi)接種 – 尿囊膜接種 – 卵黃囊接種 – 羊膜腔接種 三、注意事項(xiàng) – 無菌技術(shù)一切用品及操作時(shí)必須遵守?zé)o菌操作，以減少污染率。 螺旋體 ： 介于細(xì)菌與原蟲之間的、菌體彎曲成螺旋狀的單細(xì)胞原核型微生物。 （二）有性孢子： 不同的性細(xì)胞或性器官的親和核相結(jié)合后，經(jīng)減數(shù)分裂而形成。如： 黃曲霉素中毒、甘薯黑斑病中毒。 支原體（無細(xì)胞壁） 支原體又叫霉形體（介于細(xì)菌與病毒之間） 電鏡下的支原體 螺 旋 體 ? G陰性菌，但難于著色，螺旋體呈螺旋狀或波浪形，個(gè)體小且活潑運(yùn)動(dòng)，有些種類可通過細(xì)菌濾器。細(xì)胞由細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)三部分構(gòu)成。 ? 化學(xué)治療劑：用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生物的化學(xué)藥品。分為廣譜和窄譜兩種。 第五章 第一節(jié) 細(xì)菌的致病性 一、 侵襲力 ： 病原性細(xì)菌突破宿主機(jī)體的防御屏障，侵入機(jī)體活組織，并在其中生長(zhǎng)繁殖、擴(kuò)散蔓延的能力，稱為侵襲力。 第二節(jié) 病毒的致病性 ? 一、對(duì)宿主細(xì)胞的致病作用 ? （一）干擾宿主細(xì)胞的功能 ? 抑制或干擾宿主細(xì)胞的生物合成 ? 破壞宿主細(xì)胞的有絲分裂 ? 細(xì)胞轉(zhuǎn)化 ? 抑制或改變宿主細(xì)胞的代謝 （二）、損傷宿主細(xì)胞的結(jié)構(gòu) ? 細(xì)胞病變 ? 包涵體的形成 ? 溶酶體的破壞 ? 細(xì)胞融合 ? RBC凝集和溶解 ? （三）、引起宿主細(xì)胞死亡和破裂崩解 二、對(duì)宿主機(jī)體的致病作用 ? 病毒直接破壞機(jī)體的結(jié)構(gòu) ? 病毒的代謝產(chǎn)物對(duì)機(jī)體的致病作用 第三節(jié) 傳染的發(fā)生 ? 病原微生物應(yīng)具備的條件 ? 足夠的毒力 ? 一定的數(shù)量 ? 適當(dāng)?shù)那秩腴T戶或途徑 宿主機(jī)體方面 動(dòng)物的種類 動(dòng)物的年齡、性別和體質(zhì) 動(dòng)物的抗感染能力 免疫概述 ? 免疫概念： ? 機(jī)體對(duì)外源性或內(nèi)源性異物進(jìn) 行識(shí)別、清除和排斥的過程。 五、機(jī)體組織的不感受性 ? 某種動(dòng)物或動(dòng)物的某些組織對(duì)該病原微生物或其毒素沒有反應(yīng)性。 ? 天然主動(dòng)免疫：動(dòng)物患某種傳染病痊愈后，或發(fā)生隱性傳染后產(chǎn)生的特異性免疫。 Ⅱ 型變態(tài)反應(yīng)（ 溶細(xì)胞性反應(yīng)） 變應(yīng)原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體 IgG和IgM。 ? 二、分類及方法 ? 直接凝集試驗(yàn) ? ⑴玻片法 ? ⑵試管法 ? 間接凝集試驗(yàn) ? ⑴正向間接凝集試驗(yàn) ? ⑵反向間接凝集試驗(yàn) 第二節(jié) 沉淀試驗(yàn) ? 一、沉淀試驗(yàn)的概念 ? 可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在適量電解質(zhì)存在下，能形成肉眼可見的白色絮狀或顆粒狀沉淀的反應(yīng)。 ? MR、 VP、靛基質(zhì)、 H2S試劑。 ? 大腸桿菌有哪些主要生物學(xué)特征。 ? （三）診斷液：專供診斷動(dòng)物傳染病及寄生蟲或檢測(cè)動(dòng)物免疫狀態(tài)和鑒定病原的生物制品。經(jīng)再次接觸后可引起局部組織腫脹、化朧、壞死等炎癥部變化。機(jī)體在外來過敏原的刺激下產(chǎn)生 IgE。 ? 三、細(xì)胞免疫應(yīng)答 ? T細(xì)胞在抗原刺激下活化、增殖、分化，并產(chǎn)生淋巴因子而發(fā)揮的特異性免疫應(yīng)答。同時(shí)，炎癥局部的糖酵解作用增強(qiáng)，產(chǎn)生大量的乳酸等有機(jī)酸。 ? 最小感染量（ MID） 能引起試驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生感染的病原微生物的最小量。 3) 芽孢變異：產(chǎn)芽孢桿菌也可喪失形成芽孢的能力。其噬菌作用具有專一性。 ? 三、射線 (輻射 ) ? 可見光與日光 ? 紫外線：波長(zhǎng) 240~280nm，殺菌力最強(qiáng)。對(duì)熱和一般消毒劑抵抗力弱，對(duì)氯霉素、四環(huán)素較敏感。人工培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高。如： 煙曲霉病 。 ? 酵母菌： 菌落多呈乳白色，少數(shù)呈黃紅色；表面光滑、濕潤(rùn)、粘稠，比細(xì)菌菌落粗厚。 支原體 ： 又稱為霉形體。 四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容 ? 寫明凝集實(shí)驗(yàn)反應(yīng)強(qiáng)度的判定標(biāo)準(zhǔn)并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出正確的判斷。 兔出血癥病毒（ RHDV） ? 該病毒是嵌杯樣病毒科、Lagovinrus屬的兔的一種急性高度接觸性傳染病。兩周以內(nèi)的仔豬發(fā)病率和死亡率較高。病毒存在于神經(jīng)系統(tǒng)和唾液腺中，經(jīng)咬傷而傳染。 ? 病毒的濾過特性 ： 由于病毒細(xì)小，所以能通過孔徑細(xì)小的濾器，這一特性被稱為濾過特性。 四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容 ? 細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性的常用檢查方法及注意事項(xiàng)，并描述真正的細(xì)菌運(yùn)動(dòng)有什么特征。 ? 每種染液染色的過程中應(yīng)保持染色液不干。 二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 ? （一）細(xì)菌的分離培養(yǎng) ? (二 ) 細(xì)菌的純化 ? (三 ) 細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特性觀察 三、注意事項(xiàng) ? 細(xì)菌的分離培養(yǎng)必須嚴(yán)格無菌操作。 實(shí)驗(yàn)二 常用培養(yǎng)基的制備 ? 一、 目的 ? 要求學(xué)生掌握常用培養(yǎng)基的制備過程及培養(yǎng)基 ph的測(cè)定方法和調(diào)節(jié)方法。 ? 抵抗力不強(qiáng)，用巴氏消毒法可殺滅，不耐干燥。 ? 菌體抗原 ：細(xì)胞壁內(nèi)存在的一種半抗原，與毒力無關(guān)，耐熱。 ? 抵抗力：外毒素、內(nèi)毒素。 ? 二、抵抗力：較強(qiáng)，對(duì)青霉素、慶大霉素高度敏感。 ? 細(xì)菌素 ：具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。 ? ⑶根據(jù)催化反應(yīng)的底物不同分為 ：脂肪酶、糖酶、蛋白酶。 ? ⑶碳源：糖類 ? ⑷無機(jī)鹽：鉀、鈉、鈣、鎂、磷、硫、鐵 ? ⑸生長(zhǎng)因子： B族元素、嘌呤、嘧啶 營(yíng)養(yǎng)類型 ? ⑴自養(yǎng)菌（無機(jī)營(yíng)養(yǎng)菌）：能以二氧化碳、碳酸鹽等簡(jiǎn)單的無機(jī)碳化合物作為碳源，以無機(jī)的氮、氨或硝酸鹽作為氮源，合成菌體所需的復(fù)雜的有機(jī)物質(zhì)。堿性美藍(lán)染色法、瑞氏染色法、姬姆薩氏、石炭酸復(fù)紅染色法等。具有抗原性。 細(xì)菌：是一種具有細(xì)胞壁的單細(xì)胞原核型微生物。 任務(wù)： 保障畜禽健康 ， 促進(jìn)畜牧業(yè)發(fā)展；動(dòng)物性食品及其他畜產(chǎn)品的檢驗(yàn)檢疫；確保人類健康；防止傳染病的發(fā)生及疫病傳播 。 動(dòng)物微生物學(xué)： 微生物檢驗(yàn)技術(shù)： 地位： 重要的專業(yè)基礎(chǔ)課 ， 為動(dòng)物防疫與檢疫 、 畜禽傳染病等課程奠定基礎(chǔ) 。隨后磺胺藥 發(fā)現(xiàn)了病原體，認(rèn)識(shí)到傳染病及其抵抗力；免疫學(xué)漸建立：凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、溶解反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、過敏反應(yīng)等 顯微鏡的發(fā)明，才使微生物的發(fā)現(xiàn)變可能 近代微生物學(xué)時(shí)期 微生物遺傳方面 微生物代謝方面 免疫學(xué)方面 基因組和基因圖 第一章 細(xì)菌 細(xì)菌屬于微生物中的一種。 主要成分： G+； G－ 細(xì)胞膜（胞漿膜）： 概念：細(xì)胞膜；間體（中介體） 成分：脂類、蛋白質(zhì)及少量多糖 功能：選擇性的吸收和運(yùn)送物質(zhì)；是細(xì)菌細(xì)胞能量轉(zhuǎn)換的重要場(chǎng)所；傳遞信息；參與細(xì)胞壁的生物合成 細(xì)胞漿（細(xì)胞質(zhì)） 概念： 成分：許多酶系統(tǒng)、核糖體、質(zhì)粒、異染顆粒等 功能：細(xì)菌合成蛋白質(zhì)和核酸及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的重要場(chǎng)所 核質(zhì) 成分： DNA、蛋白質(zhì)、磷脂等 功能：攜帶遺傳信息，控制細(xì)菌的遺傳性狀 細(xì)胞膜與間體（示意圖） Return next 細(xì)菌細(xì)胞模式圖（光學(xué)顯微鏡） 三、細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu) 莢膜 鞭毛 菌毛 芽孢 芽胞桿菌及其芽胞 莢膜：某些細(xì)菌在生活過程中，向細(xì)胞壁表面分泌的一層包繞整個(gè)菌體的粘液性 物質(zhì) 。 （一）單染色法：?jiǎn)斡靡环N染料染色。 第二節(jié) 細(xì)菌的代謝 一、細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)與代謝 ? 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及其作用 ? ⑴水：約占細(xì)菌濕重的 80% ? ⑵氮源：氨基酸、蛋白胨等。 ? ⑵根據(jù)催化反應(yīng)的性質(zhì)分為：氧化酶、還原酶、水解酶。 ? 內(nèi)毒素（脂多糖）：菌體死亡崩解后才游離出來，如 G－ 脂多糖本來就是其細(xì)胞壁的成分。 致病性與抵抗力 ? 一、致病力： ? 毒素：內(nèi)毒素 ? 酶：溶血毒素、殺白細(xì)胞素、腸毒素、血漿凝固酶。 ? 二、根據(jù)抗原構(gòu)造分類 ： ? C抗原 ? 蛋白質(zhì)抗原 ? M抗原 致病性與抵抗力 ? 一、致病性 ? 酶：透明質(zhì)酸酶、鏈激酶、溶血素、紅疹毒素等。 ? 莢膜抗原 ：是一種半抗原，與毒力有關(guān)，能抵抗吞噬，失去莢膜后毒力也就消失了。 ? 所致疾病：腸道感染、腸外感染。 ? 繪制 2種細(xì)菌鏡下圖，注意細(xì)菌形態(tài)結(jié)構(gòu)，兩端形態(tài)及顏色等。 實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌的分離培養(yǎng)、純化及培養(yǎng)性狀的觀察 ? 一、 目的 ? 通過本次實(shí)驗(yàn) ,讓學(xué)生掌握細(xì)菌的分離培養(yǎng)、純化的操作技能，會(huì)觀察細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特性。 ? 固定必須確實(shí)，火焰固定時(shí)溫度不宜過高。若由于玻片放置不平導(dǎo)致的液滴流動(dòng)，注意與真正的細(xì)菌運(yùn)動(dòng)區(qū)分。 ? 病毒的血凝現(xiàn)象 ： 許多病毒表面有血凝素，能與雞、豚鼠、人等紅細(xì)胞表面受體結(jié)合，而出現(xiàn)紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。能感染人和各種家畜，病毒侵入神經(jīng)系統(tǒng)繁殖，出現(xiàn)興奮繼而麻痹的神經(jīng)癥狀。其臨床特征為嘔吐和嚴(yán)重的腹瀉。主要侵害鴨的循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、淋巴器官和實(shí)質(zhì)器官，引起頭、頸部皮下膠樣水腫，消化道黏膜發(fā)生損傷、出血、壞死，形成偽膜，肝有特征性的出血和壞死。 ? 制作好 4倍血凝