電泳技術(shù)方王楷ppt課件-展示頁(yè)
2025-05-10 18:13本頁(yè)面
【正文】 用量 少 ， 靈敏 度 可 達(dá) 10－ 6g 6 、 凝膠 孔徑 可 調(diào)節(jié) 7 、 分辨 率 高 ， 尤其 在 不 連續(xù) 凝膠 電泳 中 不連續(xù)凝膠電泳的分離原理： 1 、樣品的濃縮效應(yīng) 1 ）凝膠層的不連續(xù)性 2 ）緩沖液離子成分的不連續(xù)性 2 、電荷效應(yīng) 各種蛋白質(zhì)所帶電荷不同，有效遷移率也不同 3 、分子篩效應(yīng) 凝膠濃度不同，網(wǎng)孔徑大小不同。 5. 支持介質(zhì)的篩孔 ： 篩孔越小，則顆粒在移動(dòng)的過程中所受到的阻力也就越大 分 類 按 支持介質(zhì) 的不同可分為： ⑴ 紙電泳（ Paper electrophorisis） ⑵ 醋酸纖維薄膜電泳（ Cellulose Acetate electrophoresis） ⑶ 瓊脂凝膠電泳（ Agar Gel electrophoresis） ⑷ 聚丙烯酰胺凝膠電泳（ Polyacrylamide Gel electrophoresis）（ PAGE） ⑸ SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDS－ PAGE）。 過低 ，電泳時(shí)間增加，擴(kuò)散。一般所用離子強(qiáng)度為 。 將這兩個(gè)公式代入上述公式 ， 得到 U=v/X=dL/Et d=u*Et/L 由此可以得到兩種物質(zhì)移動(dòng)距離的差為 △ d=(dAdB)=(uAuB)Et/L 從這個(gè)公式可以看出物質(zhì)能否進(jìn)行分離決定于二者的遷移率 。 u＝ v/E=q/6πrη v=QX /6πrη 在具體實(shí)驗(yàn)中 ， 移動(dòng)速度 V為單位時(shí)間 t（ 單位為 s） 內(nèi)移動(dòng)的距離 d（ 單位為 cm） ， 即 V＝ d/t。 ? 在電場(chǎng)中，推動(dòng)帶電質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)的力（ F）等于質(zhì)點(diǎn)所帶凈電荷量（ Q）與電場(chǎng)強(qiáng)度（ X）的乘積。 由于混合物中各組分所帶電荷性質(zhì) 、 電荷數(shù)量以及分子量的不同 ， 在同一電場(chǎng)的作用下 ， 各組分泳動(dòng)的方向和速度也各異 。電泳（ electrophoresis） 電泳的基本原理 帶電的膠?；虼蠓肿釉谕饧与妶?chǎng)中 ， 向帶相反電荷的電極作定向移動(dòng)的現(xiàn)象稱為電泳 。 生物分子都帶電荷 ， 其電荷的多少取決于分子性質(zhì)及其所在介質(zhì)的 pH及其組成 。 因此 ， 在一定時(shí)間內(nèi)各組分移動(dòng)的距離不同 ， 從而達(dá)到分離鑒定各組分的目的 。 F＝
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