電泳分離技術(shù)ppt課件-展示頁
2025-05-14 03:00本頁面
【正文】 單體丙烯酰胺和交聯(lián)劑 N， N－甲叉雙丙烯酰胺經(jīng)過聚合交聯(lián)從而形成的三維空間凝膠網(wǎng)絡(luò)。 支持介質(zhì)的篩孔 V: 泳動速度 cm/秒 or分 d: 泳動距離 cm t: 電泳時間 (秒 /分 ) E: 電場強(qiáng)度 伏特 /cm u: 泳動率 or泳動度 (cm/伏 顆粒運(yùn)動的方向與電滲方向一致時，加快顆粒的遷移率。 電場強(qiáng)度：電場強(qiáng)度越高，帶電顆粒的泳動速度越快常壓：210V/cm 溶液性質(zhì)：電極溶液和蛋白質(zhì)樣品溶液 pH、離子強(qiáng)度、溶液黏度。 ： ①低壓電泳： 100v~500v，電泳時間較長，適于分離蛋白質(zhì)等生物大分子。 ，分為薄層電泳、板電泳、柱電泳等。 ④等電聚焦電泳： 由兩性電解質(zhì)在電場中自動形成 pH梯度，當(dāng)被分離的生物大分子移動到各自等電點(diǎn)的 pH出聚集成很窄的區(qū)帶。 電泳的分類 ，分為區(qū)帶電泳、移動界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳等。 簡化操作，縮短電泳時間。已被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)理論研究，臨床診斷及工業(yè)制造等方面。 凝膠電泳和等電聚焦電泳由于其明顯的優(yōu)越性，得到了越來越廣泛的應(yīng)用。其裝置復(fù)雜，價格昂貴，費(fèi)時費(fèi)力，不便于推廣應(yīng)用。 第一次的自由溶液電泳；第一臺電泳儀； 1948年，獲諾貝爾化學(xué)獎； 由于早期的電泳儀價格昂貴，分辨率低，易產(chǎn)生對流，因而逐漸發(fā)展起了區(qū)帶電泳。他用不同 pH的溶液在 U形管中測定了轉(zhuǎn)化酶和過氧化氫酶的電泳移動和等電點(diǎn)。 1809年俄國物理學(xué)家 Peiice首次發(fā)現(xiàn)電泳現(xiàn)象，他在濕粘土中插上帶玻璃管的正負(fù)兩個電極，加電壓后發(fā)現(xiàn)正極玻璃管中原有的水層變渾濁，即帶負(fù)電荷的粘土顆粒向正極移動，這就是電泳現(xiàn)象。第十一章 電泳分離技術(shù) 廣泛應(yīng)用于各個科學(xué)領(lǐng)域的新型 分離技術(shù) 概述 在電解質(zhì)溶液中，位于電場中的帶電離子在電場力的作用下，以不同的速度向其所帶電荷相反的電極方向遷移的現(xiàn)象，稱之為電泳。由于不同離子所帶電荷及性質(zhì)的不同，遷移速率不同，可實(shí)現(xiàn)分離。 1909年 Michaelis首次將膠體離子在電場中的移動稱為電泳。 1937年， Tiselius(瑞典 )將蛋白質(zhì)混合液放在兩段緩沖溶液之間，兩端施以電壓進(jìn)行自由溶液電泳，第一次將人血清提取的蛋白質(zhì)混合液分離出白蛋白和 α、 β、 γ球蛋白。 自由界面電泳：又稱移動界面電泳，是指在沒有支持介質(zhì)的溶液中進(jìn)行的電泳。 區(qū)帶電泳是指在電泳遷移中以一個緩沖溶液飽和了的固相介質(zhì)作為支持介質(zhì)，減少外界干擾的電泳技術(shù)。 電泳分析的特點(diǎn) 各種電泳技術(shù)具有如下特點(diǎn)： 凡是帶電物質(zhì)均可應(yīng)用某一電泳技術(shù)進(jìn)行分離，并可以進(jìn)行定性或定量分析； 樣品量極少； 設(shè)備簡單，可在常溫下進(jìn)行； 操作簡單省時； 分辨率高
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