蛋白質(zhì)分離技術(shù)-電泳(1)-展示頁
2025-01-27 20:08本頁面
【正文】 3040% 前 β 脂蛋白 15% β 脂蛋白 55% ?注意事項(xiàng)： ①血清樣品要新鮮； ②為了免去離心步驟，吸取預(yù)染血清時(shí)，應(yīng)吸取上層，下層或管底可能有染料顆粒沉渣，否則應(yīng)再離心后吸預(yù)染血清 。 應(yīng) 用 1. 適用于大分子的核酸 、 核蛋白等的分離 、鑒定及純化 2. 臨床生化檢驗(yàn)中常用于 LDH、 CK等同工酶的分離與檢測 3. 為不同類型的高脂蛋白血癥 、 冠心病等提供生化指標(biāo) 瓊脂糖凝膠電泳分離血漿脂蛋白 ? 原理 血清脂蛋白經(jīng)飽和蘇丹黑 B預(yù)染后，以瓊脂糖凝膠為支持介質(zhì)，在 妥緩沖液中電泳，根據(jù)各脂蛋白的組成、大小、形狀分離成不同區(qū)帶。 區(qū)帶易于擴(kuò)散 ， 電泳后必須立即固定染色 。 ， 可直接利用紫外光吸收法作定量測定 （ 二 ） 缺點(diǎn) ， 易破碎 ， 濃度不能太低 。 ， 孔徑較大 ， 可用來分離酶的復(fù)合物 、 核酸 、 病毒 等大分子物質(zhì) 。 瓊脂糖（ agarose） 瓊脂膠（ agaropectin） Acid sulfate Carboxylic acid groups 在電場作用下能產(chǎn)生較強(qiáng)的電滲現(xiàn)象 ? 瓊脂糖 半乳糖及其衍生物構(gòu)成的中性物質(zhì)，不帶電荷 瓊脂糖鏈依分子內(nèi)和分子間氫鍵及其它力的作用使其互相盤繞形成繩狀瓊脂糖束，構(gòu)成大網(wǎng)孔型凝膠。 2. 電泳操作方法簡便，電泳速度快 3. 分辨率高，重復(fù)性好，電泳圖譜清晰。蛋白質(zhì)分離技術(shù) 電泳 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 倪培華 副教授 概 述 ? 凝膠電泳：由瓊脂 、 瓊脂糖 、 淀粉膠及聚丙烯酰胺等物質(zhì)作支持體的電泳 。 ? 特點(diǎn)： ，帶電質(zhì)點(diǎn)在凝膠的孔中泳動。 4. 適用于生化，免疫等定性定量測定 瓊脂糖凝膠 天然瓊脂（ agar） :又名瓊膠、菜燕、凍粉 從石花菜及其它紅藻類植物提取出來的一種線狀高聚物。 D半乳糖 3， 6脫水 L半乳糖 瓊脂糖凝膠的特點(diǎn) （ 一 ） 優(yōu)點(diǎn) ， 幾乎消除了瓊脂的電滲 ， 故無拖尾現(xiàn)象 。 ， 可直接或干燥成薄膜后進(jìn)行染色 。 ， 不易保存 ， 臨用前配制 。 PAGE相比， 分子篩作用小 ，區(qū)帶少。 (一 )血清脂蛋白 (lipoprotein)的組成 ApoA ApoB 蛋白質(zhì)：即載脂蛋白 ApoC ApoD ApoE 甘油三酯 （ TG） 脂類 磷脂 （ PL） 游離膽固醇 （ FC） 膽固醇酯 （ CE） 少量糖 （ 二 ） 分類 1. 按電泳法分 乳糜微粒 （ chylomicron,CM） ?脂蛋白 （ ?位 ） 前 ?脂蛋白 （ ?2位 ）） ?脂蛋白 （ ?1位） 2. 按超速離心法分 乳糜微粒 (chylomicron,CM) ( ) 極低密度脂蛋白 (?) (very low density lipoprotein, VL
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1