電泳技術及其在分子生物學中的應用-展示頁
2025-01-25 19:44本頁面
【正文】 率的因素 ?DNA分子的大小 ?瓊脂糖濃度 ； ?DNA的構象 ：超螺旋環(huán)狀（ I型）、切口環(huán)狀（ II型）和線狀（ III型）； 共價閉環(huán) DNA＞直線 DNA＞開環(huán)雙鏈 DNA。 將已知分子量的標準 DNA的遷移率對分子量對數(shù)作圖，可獲得一條標準曲線，未知 DNA片段在相同條件下進行電泳，根據(jù)它的電泳遷移率即可在標準曲線上求得其分子量。 瓊脂糖凝膠中 DNA的染色 熒光染料 溴化乙錠（ EB） 含有一個可以嵌入 DNA或 RNA的堆砌堿基之間的一個平面基團 與核酸結合后在紫外線激發(fā)下呈現(xiàn)橘黃色熒光，熒光的位置代表核酸片段所在的位置，熒光的強弱代表核酸量的多少 ,可以檢測到少至 10ng的 DNA條帶。 cm ：電場正負極間的距離。在低電壓條件下，線性 DNA分子的電泳遷移率與所用的電壓呈正比。 含不同量瓊脂糖的凝膠的分離范圍 凝膠中的瓊脂糖含量 [%（ w/v） ] 線狀 DNA分子的有效分離范圍（ kb） 560 120 瓊脂糖濃度的選擇 ：根據(jù)被分離 線狀 DNA片斷的大小 樣品配制與加樣 DNA樣品用適量 TrisEDTA緩沖液溶解，緩沖液內(nèi)含有 %溴酚藍或其他指示染料， 含有 10%15%蔗糖或 5%~ 10%甘油，以增加其比重，使樣品集中。 凝膠的制備 以瓊脂糖為溶質(zhì)， 電泳緩沖液 為溶劑，用微波爐加熱，配制 一定濃度 的溶膠，灌入水平膠框，插入 梳子 ，自然冷卻。其結構單元是 D半乳糖和 L半乳糖。 ?電泳的三要素 以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質(zhì)的區(qū)帶電泳法稱為 凝膠電泳 。 ? 在 電場 中，帶電顆粒向陰極或陽極遷移，遷移的方向取決于它們帶電的符號。電泳技術及其 在分子生物學中的應用 環(huán)境科學與技術研究中心 電泳是帶電荷的膠體顆粒在電場中的移動。 ? 凈電荷： 生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸、多糖等常以顆粒形式分散在溶液中，它們的 凈電荷 取決于介質(zhì)的 H+濃度與其他大分子的相互作用。 ? 電泳的實現(xiàn)還依賴于 支持介質(zhì) 的存在。 瓊脂糖凝膠電泳 （
研究報告相關推薦
鄂ICP備17016276號-1