【正文】 ) Approximate mol wt. (by SDS PAGE) Example of 2DGel Separation of Proteins 2D gels are ideal tools of protein separation because of their high resolution (1000 spots are monly visualized on a single gel) and visual readout Western blotting 印跡法（ blotting）是指將樣品轉(zhuǎn)移到固相載體上，而后利用相應(yīng)的探測(cè)反應(yīng)來檢測(cè)樣品的一種方法。當(dāng)凝膠濃度太高時(shí)，凝膠孔徑變小，環(huán)狀 DNA（球形）不能進(jìn)入膠中，相對(duì)遷移率為 0，而同等大小的直線 DNA（剛性棒狀）可以按長軸方向前移，相對(duì)遷移率大于 0。 瓊脂糖凝膠電泳 （ agrose gel electrophoresis ） 聚丙烯酰胺凝膠電泳 （ polyacrylamide gel electrophoresis， PAGE） 凝膠電泳 用于分離、鑒定和純化 DNA片段 重點(diǎn)內(nèi)容 影響 DNA在瓊脂糖凝膠中的遷移速率的因素有哪些？ Western blotting 的基本實(shí)驗(yàn)步驟 ,及每一步的操作意義 . 瓊脂糖凝膠電泳 瓊脂糖（ agarose）是由瓊脂分離制備的鏈狀多糖。 含不同量瓊脂糖的凝膠的分離范圍 凝膠中的瓊脂糖含量 [%（ w/v） ] 線狀 DNA分子的有效分離范圍（ kb） 560 120 瓊脂糖濃度的選擇 ：根據(jù)被分離 線狀 DNA片斷的大小 樣品配制與加樣 DNA樣品用適量 TrisEDTA緩沖液溶解，緩沖液內(nèi)含有 %溴酚藍(lán)或其他指示染料， 含有 10%15%蔗糖或 5%~ 10%甘油，以增加其比重，使樣品集中。一亞甲雙丙烯酰胺參與下，聚丙烯胺鏈與鏈之間交叉聯(lián)接而形成凝膠 . 與瓊脂糖凝膠電泳的比較 , PAGE的特點(diǎn) ?分辨率很強(qiáng)，長度上相差 1bp的 DNA即可分開； ?從聚丙烯酰胺凝膠中回收的 DNA純度很高，可適用于要求最高