電泳技術(shù)和常用電泳儀【精品-展示頁
2025-01-27 19:01本頁面
【正文】 H9 中電 加解 入質(zhì) 了溶 雙液 PH3 加上電場后建立穩(wěn)定PH梯度 蛋白質(zhì)溶液加入，建立電場 染色后，蛋白質(zhì)因 PI值不同，沿 PH梯度分離開 第一向 等電聚焦 PI逐漸降低 等電聚焦膠放在 SDS－聚丙烯酰胺凝膠上 第二向 SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳 分子量逐漸降低 PI 逐漸降低 0607 雙向凝膠電泳示意圖 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 (七 ） 免 (疫 )(役 )電泳 免疫電泳是瓊脂平板電泳和雙相免疫擴(kuò)散兩種方法的結(jié)合 。 第二向采用了十二烷基硫酸鈉一聚丙烯酰胺凝膠電泳 （ SDSPAGE） 就是按蛋白質(zhì)分子量的大小使其在垂直方向進(jìn)行分離 。 前導(dǎo)電解質(zhì)的遷移率高于任何樣品組分 ， 后者則低于任何樣品組分 ， 被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間 ， 在強(qiáng)電場的作用下 ， 各被分離組分在前導(dǎo)電解質(zhì)與尾隨電解 質(zhì)之間的空隙中移動 ， 實(shí)現(xiàn)分離 。⑦ 適用于中、大分子量（如蛋白質(zhì)、肽類、同工酶等）生物組分的分離分析。④ 分辨率高 。 將等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)混合物加入有 pH值梯度的凝膠介質(zhì)中，在電場內(nèi)經(jīng)過一段時間后，各組分將分別聚焦在各自等電點(diǎn)相應(yīng)的 pH值位置上，最后，樣品的各組分在各自的等電點(diǎn)聚焦成一條清晰而穩(wěn)定的窄帶。 它具有機(jī)械強(qiáng)度好、彈性大、 透明、化學(xué)穩(wěn)定性高、無電滲 作用、設(shè)備簡單、樣品量小 (1～ 100μg ） 、分辨率高等優(yōu)點(diǎn)。普通的凝膠電泳在板上進(jìn)行，以凝膠作為介質(zhì)。因此特別 適合于病理情況下 微量異常蛋白的檢測。 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 （二）醋酸纖維素薄膜電泳 電泳時經(jīng)過膜的預(yù)處理、加樣、電泳、染色、脫色與透明即可得到滿意的分離效果。 0602 平臥式電泳槽裝置示意圖 將濾紙條水平地架設(shè)在兩個裝有緩沖溶液的容器之間，樣品點(diǎn)于濾紙中央。 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 二、電泳方法簡介 （一）紙電泳 指用濾紙作為支持載體的電泳方法。 （八）根據(jù)用法的類型可分為：雙向電泳、交叉 電泳、連續(xù)紙電泳、電泳－層析相結(jié)合技術(shù)等。 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 （六）根據(jù)自動化程度的不同，可分為半自動和 全自動型。 2. 恒流電泳 。②高密度的凝膠電泳。 （二）根據(jù)有無固體支持物可分為：自由電泳和支持物電泳 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 （三）根據(jù)支持載體的位置或形狀可分成：水平電泳、垂直電泳、板狀電泳、柱狀電泳、 U型管電泳、倒 V字形電泳、毛細(xì)管電泳等。 第一節(jié) 電泳原理 若將帶凈電荷 Q的粒子放入電場，則該粒子所受到的電荷引力為： F引 =E Q （ 61） 在溶液中 ,運(yùn)動粒子與溶液之間存在阻力 F阻 F阻 =6πrηV （ 62） 當(dāng) F引 =F阻 時 EQ= 6πrηV V = EQ/6πrη （ 63） 由上式可以看出 ,粒子的移動速度 (泳動速度 V)與電場強(qiáng)度 (E)和粒子所帶電荷量 (Q)成正比 ,而與粒子的半徑 (r)及溶液的粘度 (η)成反比。但是在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下，某些物質(zhì)分子會成為帶電的離子（或粒子），不同的物質(zhì)，由于其帶電性質(zhì)、顆粒形狀和大小不同，因而在一定的電場 中它們的移動方向和移 動速度也不同，因此可 使它們分離。 臨床常用的電泳分析方法主要有醋酸纖維素薄膜電泳、凝膠電泳、等電聚焦電泳、雙向電泳和毛細(xì)管電泳等。可以實(shí)現(xiàn)電泳分離技術(shù)的儀器稱之為電泳儀（ electrophoresister）。第六章 電泳技術(shù)和常用電泳儀 第六章 電泳技術(shù)和常用電泳儀 一、概述 generalization) 電泳（ electrophoresis）是指帶電荷的溶質(zhì)或粒子在電場中向著與其本身所帶電荷相反的電極移動的現(xiàn)象。利用電泳現(xiàn)象將多組分物質(zhì)分離、分析的技術(shù)叫做電泳技術(shù)（ electrophoresis technique）。 第六章 電泳技術(shù)和常用電泳儀 目前， 電泳技術(shù)已廣泛用于蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸、核苷酸、無機(jī)離子等成份的分離和鑒定，甚至還用于細(xì)胞與病毒的研究。 第一節(jié) 電泳原理 一、電泳的基本原理 物質(zhì)分子在正常情況下一般不帶電，即所帶正負(fù)電荷量相 等，故不顯示帶電性。 0601電泳現(xiàn)象和電滲流現(xiàn)象 。 第一節(jié) 電泳原理 二、影響電泳的外界因素 （一）電場強(qiáng)度 （二）溶液的 pH值 （三）溶液的離子強(qiáng)度 （四）電滲作用 （五）粒子的遷移率 （六）吸附作用 第二節(jié) 常用電泳技術(shù)和電泳方法 一、電泳技術(shù)的分類 （一）根據(jù)工作原理的不同：可分為移界電泳、區(qū)帶電泳、等速電泳、等電聚焦電泳、免疫電泳等。 （四）根據(jù)支持物的特點(diǎn)又可分為： ①無阻滯支持物電泳。 （五）根據(jù)電源控制的不同，一般可分為以下 3類： 1. 恒壓電泳 。 3. 恒功率電泳 。 （七）根據(jù)其功能的不同，可分為制備型、分析 型、轉(zhuǎn)移型、濃縮型等。 （九）根據(jù)不同的使用目的可分為：核酸電泳、 血清蛋白電泳、制備電泳、 DNA測序電泳等。是最
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