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實驗四pcr及電泳技術-展示頁

2025-05-21 23:45本頁面
  

【正文】 3’ 5’ TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG 引物 ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC 引物 3’ 5’ 5’ 3’ PCR Cycle Step 3 At 72 ℃ Taq DNA polymerase catalyses primer extension as plementary nucleotides are incorporated ③ 引物的延伸: DNA模板 引物結合物在 Taq DNA聚合酶的作用下,以 dNTP為反應原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復制原理,合成一條新的與模板 DNA 鏈。 延伸 (Extension ):在 DNA聚合酶和 4種脫氧核苷酸 (dATP、 dCTP、 dGTP、dTTP)及 Mg2+存在條件下, 5’→3’ 的聚合酶催化以引物為起始點的 DNA鏈延伸反應。 ? PCR的基本步聚 變性 (Denaturation) :通過加熱使 DNA雙螺旋的氫鍵斷裂,雙鏈解離形成單鏈 DNA 。實驗 4 PCR及 電泳技術 1. PCR的基本原理 ? PCR基本原理 類似于 DNA的體內復制。 在模板 DNA、引物和 4種脫氧核苷酸存在條件下依賴于 DNA聚合酶的酶促合成反應。 退火 (Annealing) :當溫度突然降低時,反應體系中引物和其互補的 DNA模板在局部形成雜交鏈。 這種 熱變性 復性 延伸 的過程就是一個 PCR循環(huán), PCR就是在合適條件下的這種循環(huán)的不斷重復。 3’ 5’ 3’ 5’ TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC DNA 聚合酶 TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG DNA 聚合酶 5’ 5’ 3’ 3’ 引物 引物 End of the 1st PCR Cycle –Results in two c
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