基因工程原理-第二章dna重組-文庫吧資料
2025-01-11 17:53本頁面
【正文】 割位點表示方法5’CTGCAG3’3’GACGTC5’Pst I可以表示為：5’CTGCA ↓ G3’反應總體積： 20微升酶的用量緩沖液的組成與酶的種類有關反應時間 13小時。Bcl I,A^GATCT539。3‘Bgl II3‘BclBamHC^C...539。339。...C^C例如 :Hpa II和 Msp? 同裂酶 (isoschizomer)來源不同 ,但識別同樣的核苷酸靶子序列 .IGAATTCCTTAAGGGATCCCCTAGG（ 2）識別序列在 DNA分子上出現(xiàn)的頻率例如：識別序列核苷酸個數(shù) 出現(xiàn)識別序列的幾率4 1/44 （ 1/256）6 1/46 (1/4096)λDNA長 49000bp，Bgl II的識別序列為 AGATCT所以理論上在 λDNA中， A’…5’EcoRN’A’BBC’A’…3’3’…A’C’C? 來源：原核生物? 種類： 500多種? 作用：把外源 DNA切割成片段 。合適的生物材料 —— 裂解細胞 —— 分離 DNA—— 純化核檢測（ 1）大腸桿菌源質(zhì)粒 DNA的提取松弛型質(zhì)粒：加氯霉素嚴緊型質(zhì)粒：不加氯霉素（ 2） λ 噬菌體 DNA的提取 DNA的純化氯化銫 溴化乙錠連續(xù)梯度離心法離子交換層析法瓊脂糖凝膠電泳洗脫法“基因純 ”試劑純化從 DNA樣品中去掉 EB DNA濃縮 DNA純度檢測第三次課結束！第二部分 基因工程工具酶基因工程工具酶? 限制性核酸內(nèi)切酶? DNA連接酶和激酶? DNA聚合酶和 RNA聚合酶? DNA和 RNA修飾酶。這段序列被稱為回文序列。兩類終止子有共同的序列特征：在轉(zhuǎn)錄終止點前有一段 回文序列 ?！?依賴蛋白輔因子才能實現(xiàn)終止作用。transcriptiontranscriptionPribnow box5’AGGAGG3’SD序列 DNA轉(zhuǎn)錄 終止子（ transcription terminator）終止子 （ Terminator） 是一段位于基因或操縱組末端的 DNA片段，可中斷轉(zhuǎn)錄作用。Pribnow box5’AGGAGG3’SD序列ShineDalgarno sequence。復制子的數(shù)量原核生物的染色體 DNA：單個真核生物染色體 DNA：多個質(zhì)粒 DNA：單個、多個 DNA轉(zhuǎn)錄 啟動子 和 轉(zhuǎn)錄區(qū) 的結構啟動子 ： Promotor， DNA分子上能與 RNA聚合酶結合并形成轉(zhuǎn)錄起始復合體的區(qū)域，在許多情況下，還包括促進這一過程的調(diào)節(jié)蛋白的結合位點?；蚬こ淘鞵rinciple of Gene Engineering 第一章第一節(jié) 基因工程原理第二章 第二章 DNA重組第一部分 DNA的組成和結構 DNA的組成 DNA的空間結構線形 DNA：環(huán)形 DNA： DNA復制半保留復制方式復制起始位點（ replication origin site） 原核生物 DNA的復制 解旋酶單鏈結合蛋白DNA拓撲異構酶引物酶DNA聚合酶DNA連接酶 真核生物 DNA的復制 復制子從復制起始點開始復制出的一個 DNA分子或一個 DNA片段的核苷酸序列。 SD sequence 1974年，由 SD序列： 在細菌 mRNA起
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