第二章基因工程制藥新版5-文庫吧資料
2024-11-19 22:08本頁面
【正文】 小會影響發(fā)酵物的產(chǎn)量和發(fā)酵周期。 （3）其它組份：無機鹽、微量元素、維生素、生物素。,（三）影響基因工程菌培養(yǎng)的各種因素,基因工程菌 傳統(tǒng)微生物 生物材料 含外源重組基因 不含外源重組基因 發(fā)酵工藝 使外源基因高效表達 使自身基因表達 目的產(chǎn)物 產(chǎn)生外源蛋白質(zhì) 產(chǎn)生自身的代謝 培養(yǎng)基的影響 溶解氧的影響 接種量的影響 誘導(dǎo)時機的影響 溫度的影響 PH值的影響,培養(yǎng)基的影響,（1）常用碳源：葡萄糖、甘油、甘露糖、果糖。 半透膜的種類、孔徑、面積、發(fā)酵液和透析液的比例、透析液的組成、循環(huán)流速、培養(yǎng)持續(xù)時間等因素會影響產(chǎn)物得率。,透析培養(yǎng),透析培養(yǎng)是利用膜的半透性原理，使得代謝產(chǎn)物和培養(yǎng)基分開，通過去除培養(yǎng)液中的代謝產(chǎn)物的方法來消除代謝產(chǎn)物對工程菌的不良影響。 連續(xù)培養(yǎng)利于保持生產(chǎn)環(huán)境的恒定，利于控制菌體的生長速率。 其目的是創(chuàng)造一個良好的微生物環(huán)境，延長菌體的對數(shù)生長期，來獲得高密度的菌體總量。,八、基因工程菌的擴增和發(fā)酵生產(chǎn),（一）基因工程菌培養(yǎng)的程序 （二）基因工程菌的培養(yǎng)方式 （三）影響基因工程菌培養(yǎng)的各種因素分析 （四）基因工程菌的培養(yǎng)設(shè)備發(fā)酵罐 （五）基因工程菌發(fā)酵工藝的優(yōu)化,（一）基因工程菌培養(yǎng)的程序,①搖瓶操作：了解工程菌生長的基礎(chǔ)條件，如溫度、pH、培養(yǎng)基各種組分以及碳氮比，分析表達產(chǎn)物的合成、積累對受體細胞的影響； ②培養(yǎng)罐操作：確定培養(yǎng)參數(shù)和控制的方案和順序。 參數(shù)監(jiān)測控制： 生物反應(yīng)中，有4種參數(shù)需監(jiān)測： 主要參數(shù)：pH值、溫度、溶氧、二氧化碳 生物量：渾濁度、細胞組分、總氮量及菌絲干重 碳源：糖、有機酸、乙醇、淀粉、脂質(zhì) 產(chǎn)品,5 計算機應(yīng)用,熱電耦測量溫度 離子敏感電極元素 氧化還原電極還原電位 熱量計熱平衡,全部數(shù)據(jù)存于計算機,最終目標： 工藝最佳化、產(chǎn)品產(chǎn)量與質(zhì)量不斷提高、原材料與能源消耗不斷下降、成本降低。 基因工程菌中試需考慮以下幾方面： 1 工程菌的選擇 2 反應(yīng)器的設(shè)計 3 發(fā)酵培養(yǎng)基的組成 4 工藝最佳化與參數(shù)監(jiān)測控制 5 計算機應(yīng)用,1 工程菌的選擇,能用基因重組技術(shù)獲得 高產(chǎn)潛力 以工業(yè)原料為培養(yǎng)基 生產(chǎn)工藝能用一般的工業(yè)生產(chǎn)經(jīng)驗 產(chǎn)生和分泌的蛋白質(zhì)不致病、無毒性、能安全生產(chǎn)。,藥物從實驗室的微量制備到工廠的產(chǎn)業(yè)化制備，并不是簡單的數(shù)量級的線性放大關(guān)系，而是各種研究技術(shù)的系統(tǒng)集成和放大優(yōu)化。,七、基因工程菌中試,中試:生物技術(shù)藥物與其他藥物一樣，從實驗室研究到產(chǎn)業(yè)化必須經(jīng)過中間放大試驗的系列工藝研究和驗證，這種中間放大試驗簡稱之。 當合成材料的前體物供應(yīng)不足時，工程細菌就會產(chǎn)生“嚴緊反應(yīng)”。這種停滯與能量供應(yīng)無關(guān)。 （2）分批選用不同的碳源、控制補料速度、能在一定范圍之內(nèi)，控制細菌的過度生長，從而抑制乙酸的產(chǎn)生。其實質(zhì)是由于三羧酸循環(huán)的供能不足，導(dǎo)致部分乙酰輔酶A
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