【正文】 析的 16 所有結(jié)果有無潛在的離群值。如果數(shù)據(jù)不可用，參照 。 4． 9 臨床上幾個重要的濃度水平 評價線性范圍時，要注意幾個重要的濃度：最低分析濃度或線性范圍的下限，不同的醫(yī)學(xué)決定水平值，最高分析濃度或線性范圍的上限。對于某些分析物，或在某個濃度水平，需重復(fù)測量 35次。數(shù)據(jù)的刪除按 。 建立 線性 方法： 9到 11個樣本，每個樣本重復(fù)測定 2到 4次； 驗證 聲明范圍或改良方法： 7到 9個樣本，每個樣本重復(fù)測定 2到 3次； 在實驗室內(nèi)證實線性范圍有效性： 5到 7個 樣本，每個樣本重復(fù)測定 2次。 4． 8 數(shù)據(jù)收集 數(shù)據(jù)可以很方便地記錄在工作 表或計算機表格程序中。如需配制 110單位的上述分析物溶液，則可以用 第 1管溶液和 5管溶液混勻，它的編號數(shù)為 。 將分析測量結(jié)果（作為已知濃度）和管號數(shù)（ 1， 2， 3， 4和 5）或計算濃度作散點圖。 樣本管 1和 5每管需 ； 樣本管 2：加 1管溶液和 5管溶液； 樣本管 3：加 1管溶液和 5管溶液； 樣本管 4：加 1管溶液和 5管溶液，第 4管溶液 的濃度計算為： (40*+120*)/(+)=100 單位。 如當(dāng)檢測系統(tǒng)每測試需要反應(yīng)體積為 ，每濃度水平測量 2次，則至少需 考慮反應(yīng)死體積。 V1+C5 （ 2）低濃度（理想狀態(tài)為接近或位于線性范圍下限）管編號為 1，高濃度管編號為 5； （ 3）中間濃度管由高濃度和低濃度管按恒定的間距配成不同的濃度，一種簡便的配制中間濃度的方法如下： 第 2管為 3份低濃度和 1份高濃度標(biāo)本混合而成； 第 3管為 2份低濃度和 2份高濃度標(biāo)本混合而成； 第 4管為 1份的低濃度和 3份的高濃度標(biāo)本混合而成。注意在操作過程中，要有最準(zhǔn)確和精確 的加樣技術(shù)。不管用何種方法準(zhǔn)備低高值溶液，操作時要小心、謹(jǐn)慎。 以下以五個濃度等間距的配制（參考附錄 A： 5到 11個等間距濃度的分配方法）舉例。如果中間分析管的濃度不是等間距的，相鄰管之間的相互關(guān)系一定是已知的。對于等間距濃度來說，每管可以用整數(shù)（如 1， 2， 3， 4， 5等）來分配號碼，也就是說，每一管的的濃度分析前可以未知。 當(dāng)建立方法的線性范圍時，需 7到 11個樣本，且 20%到 30%的樣本的濃度范圍超出預(yù)期的測量范圍，在可接受的線性響應(yīng)范圍內(nèi)，試圖舍去非線性點，可得到較寬的線性范圍。 4． 5 分析順序 14 分析順序應(yīng)是隨機的，但如果存在明顯攜帶污染或漂移，則可妥協(xié)。 表 1 樣本添加原料 分析物 原 料 ALT 純酶 Alb 白蛋白干粉，人 V片斷 酒精 無水乙醇 ALP 如果沒有高濃度的病人樣本，用純酶 AST 純酶 淀粉酶 唾液或胰腺提取物 BIL 如果沒有高濃度的病人樣本時，用純膽紅素，或 低稀釋的 高值質(zhì)控品或標(biāo)準(zhǔn)品 膽固醇 純膽固醇或 質(zhì)控品 CO2 碳酸鈉或碳酸氫鈉 CK 純酶 Cr 無水標(biāo)準(zhǔn)品或高值病人樣本 γGT 純酶 Hb 洗滌后的人類紅細(xì)胞溶血液 Hct 微量高速離心 后的 紅細(xì)胞 LDH 純酶 脂酶 胰腺提取物 P 磷酸二氫鈉或鉀 Mg 氯化鎂 TP 干粉白蛋白，人（首選）或牛 V片斷（由于總蛋白中含有很多種成分，因而有代表性的總蛋白的添加物很難確定。 制成分析樣本的添加物的選擇 選擇添加物時要仔細(xì)考慮，使用其它物種來源的原料也會引起一些影響。大量的常規(guī)臨床生化方法的定標(biāo)都是用水溶液材料，稱量法可用來確定靶值。 水溶液 當(dāng)用水溶液時，對分析方法的響應(yīng)曲線的影響未測試，基質(zhì)效應(yīng)可能影響到響應(yīng)曲線和結(jié)果的解釋。 低稀釋 /過稀釋 商業(yè)質(zhì)控物 如用到這些稀釋液，注意基質(zhì)效應(yīng)可能會影響到檢測結(jié)果， 而且隨濃度的不同而改變。 用鹽水或其它稀釋劑而不是推薦稀釋液 如用到這些稀釋液，注意基質(zhì)效應(yīng)可能會影響到檢測結(jié)果。 商業(yè)質(zhì)控物 /定標(biāo)物 /線性物質(zhì) 如果用到這些物質(zhì)，同病人標(biāo)本一樣進(jìn)行分析，可以用高值和低值標(biāo)本進(jìn)行混合得到中間濃度。注意這些處理可能改變分析物或基質(zhì)的物理或化學(xué)特性。 用 低濃度 或者處理過的標(biāo)本物質(zhì) 稀釋 樣本 如果可能，用低濃度的病人標(biāo)本。當(dāng)存在干擾物時，在報告中需提及其來源、純度、預(yù)期影響等。 可能情況下，生產(chǎn)廠家在制定測量方法時要考慮到稀釋液的研究。對于有些分析系統(tǒng)來說，允許用病人的標(biāo)本稀釋法來評價線性，可用經(jīng)認(rèn)可的稀釋液來對超過分析范圍的病人標(biāo)本進(jìn)行稀釋，這時需提供材料證明該稀釋液是可用于該分析系統(tǒng)的。由于我們測定的病人標(biāo)本 的最終濃度代表驗證的范圍，因而最后的高和（或）低值濃度需要調(diào)整才能達(dá)到期望的范圍。以下為可能用到的樣本類型，注意在一些特殊方法時要選擇合適的基質(zhì)。 4． 3 可接受基質(zhì)體系 如果多種基質(zhì)標(biāo)本類型（如尿液、血清、腦脊液、全血等）在實驗中用到，則應(yīng)評價每種基質(zhì)類型。如果上述條件不可避免，則應(yīng)在最后的報告 中注明在評價實驗中所用的標(biāo)本處理方法或基質(zhì)類型。在全自動、半自動和手工化學(xué)操作系統(tǒng)上，這些試劑可用于定標(biāo)、驗證測量范圍和線性等。5到 11個濃度水平的等間距標(biāo)本的配制方法見附錄 A。在本評價實 驗中，在實驗室內(nèi)用移液管精確地吸取高低值濃度標(biāo)本配成的混合物的誤差比單個的稱量法配制不同濃度的標(biāo)本的誤差要小。 本指南推薦用高值和低值濃度的樣本按比例精確配成等間距的不同濃度樣本，但等間距不是本方法所必需的。根據(jù)不精密度的大小，每個濃度水平測量 2～ 4次。 當(dāng)一個新的測量方法（或廠家或?qū)嶒炇腋牧家粋€ 實驗方法時）需要建立新的線性范圍時，需要 7到 11能覆蓋預(yù)期的測量范圍的不同濃度的標(biāo)本。 4． 1 標(biāo)本要求 線性評價實驗要求有足夠量的標(biāo)本，要能滿足五個或更多濃度標(biāo)本的稀釋和測量。 3． 2 實驗時間 全部實驗數(shù)據(jù)盡可能在較短的時間內(nèi)收集，如可能，單個分析試驗最好在一天內(nèi)做完。 3． 1 熟悉儀器設(shè)備 評價分析程序的實驗室人員必須十分熟悉儀器的操作、質(zhì)量控制和定標(biāo)方法，以及正確的收集樣本等，廠商提供的培訓(xùn)是非常有用的。 本質(zhì)上，多項式回歸是設(shè)計用來評價曲線的反應(yīng)模型，因而它適合于評價非線性。 多項式評價線性首先假設(shè)數(shù)據(jù)組呈非線性，所有數(shù)據(jù)點能用直線或曲線的數(shù)學(xué)方程來表達(dá)，隨機誤差在可接受范圍內(nèi)，則不論最適曲線是直線與否，都不影響（線性范圍內(nèi)）實驗數(shù)據(jù)點之間 其他濃度反應(yīng)狀況，并能得到連續(xù)可靠的結(jié)果 。 2． 4 實驗方法的概述 本指南所用的多項式回歸最初由 Kroll等提出，有嚴(yán)密的統(tǒng)計學(xué)規(guī)律，且容易用表格來完成。 準(zhǔn)確度（ Trueness） ：一組連續(xù)測量結(jié)果的平均值與 公認(rèn)參考值的接近程度。 回歸標(biāo)準(zhǔn)誤 （ Standard deviation of y about a regression/standard error of regression， SDy,x)： 獨立變量 Y與預(yù)期變量 X相對應(yīng)的可估計變量 Y’平均值之間的差量檢測大小。 多項式回 歸 （ Polynomial regression） ： 不同 階 別的多次最小二乘法回歸 Y=a+b1X 一次多項式或者擬合直線 Y=a+b1X+b2X2 二次多項式 Y= a+b1X+b2X2+b3X3 三次多項式 重復(fù)性 （ Repeatability） ： (測量儀器 )在相同的測量條件下，對同一樣品多次測量，測量儀器重復(fù)給出十分相近示值的能力 ， 重復(fù)性可以用示值的離散特性定量表示。 測量范圍 （ Measurement range） ： 指測量儀器的誤差在特定范圍內(nèi)的 一系列 分析物的測量結(jié)果 ，以前稱為可報告范圍。 測量誤差 （ Measurement error） ： 測量結(jié)果減去真值 （ 或公認(rèn)的參考值 ） 的大小。 線性回歸 （ Linear regression） ： 待測變量（非獨立）的浮動經(jīng)?？梢裕ú糠值兀w因于其他變量（獨立），回歸的方法量化了獨立變量和非獨立變量之間的關(guān)系。 線性范圍（ Linear range）： 在本指南中，指覆蓋檢測系統(tǒng)可接受線性關(guān)系的范圍，非線性誤差小于設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)。 最小二 乘法 （ Least square regression） ： 一種統(tǒng)計學(xué)方法 ， 由所有數(shù)據(jù)點得到的直線或曲線上每個點到 X軸 （ 即與 Y軸平行 ） 的垂直距離的平方和達(dá)到最小。 截距（ Intercept/Y intercept 1） ：表示一個函數(shù)與數(shù)軸的交叉點，當(dāng)一個變量為 0時另一個變量的值。注：一般情況下，偏倚指公認(rèn)的方法（決定性，參考性或指定方法）與比較方法的測量結(jié)果的差值，用數(shù)值或百分?jǐn)?shù)表示。大多用濃度或活性表示。 允許誤差來表示。 2． 3 定義 允許偏差 /誤差 (Allowable difference/allowable error)： 在一個檢測系統(tǒng)中 ， 來自各種因素的 ， 用戶能夠承受并能滿足醫(yī)學(xué)要求的分析偏差的大小。 Krouwer和 Schlain提出一種通用的方法，即 LPO（ last point off the line），需要多次計算最小二乘法方程。 但這種方法并不簡單，用戶必須對實驗數(shù)據(jù)（多用表格設(shè)計）進(jìn)行多次多項式回歸。這種方法的優(yōu)點是非?？煽?，且基于嚴(yán)格的科學(xué)原理。 2． 2 方法選擇 有很多的方法用來評價線性范圍。如果用戶在自己的實驗室要驗證已知的線性范圍（廠家提供），測量時僅覆蓋該范圍即可。 EP6A僅僅是指導(dǎo)用戶的一系列方法評價文件中的一種，請參照最近發(fā)布的 EP21文件 臨床實驗方法的總分析誤差。線性試驗有助于評價偏倚的大?。ǖ蔷€性并不是偏倚的全部），偏倚是測量誤差的一部分。評價線性覆蓋范圍的 Global 檢驗（如 LoF檢驗）不是特別重要。首先要確定一種方法的非線性濃度范圍，及在每個濃度水平上非線性的程度。 本指南要求實驗室設(shè)定非線性誤差的目標(biāo)，只提供基本概念，沒有特定的要求。精密 度很差時，會妨礙線性關(guān)系的評價，因而重復(fù)性的檢查也包括在內(nèi)。如果一個線性評價失敗，要求重做，可以用更多的重復(fù)次數(shù)，或減少樣本數(shù)而縮小線性范圍。標(biāo)準(zhǔn)防護(hù) 和全身防護(hù)指南見美國 CDC文